固碳微生物菌株的分离鉴定及其固碳能力测定

论文摘要

利用微生物回收和固定CO2气体的生物固碳方法,成为解决"温室效应"这一重大环境问题的焦点,本研究目的是分离筛选固碳微生物菌株。利用无碳源无机培养基从活性污泥、沼液和设施土壤中分离筛选出以CO2为碳源的菌株24株,选取其中生长较快的8株菌进行cbbL基因、形态观察、生理生化反应测定和16S rDNA测序分析,将测序结果在BlAST数据库中比对,进行固碳菌株的分子鉴定,并对其菌体含量和RubisCO酶活性进行比较。选取RubisCO酶活性最高的菌株C2-8R,进行土壤施用试验,通过土壤RubisCO酶活性的测定,确定分离筛选的固碳菌的固碳能力。研究表明,可通过无碳源培养基进行固碳微生物菌株的筛选,筛选的固碳菌分别隶属于假单胞菌属和嗜甲基菌属,并可通过RubisCO酶活性来反映微生物的固碳能力。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 样品
•     1.1.2 无碳源无机培养基组成成分[15, 19]:
•   1.2 方法
•     1.2.1 固CO2菌株分离纯化及筛选
•     1.2.2 固CO2菌株固碳功能基因cbbL的克隆
•       1.2.2. 1 细菌基因组DNA的提取及固CO2菌株cbbL基因的扩增
•       1.2.2. 2 cbbL基因测序
•     1.2.3 固CO2菌株的鉴定
•       1.2.3. 1 固CO2菌株形态特征
•       1.2.3. 2 固CO2菌株生理生化特性
•       1.2.3. 3 16S rDNA基因的扩增
•       1.2.3. 4 16S r DNA基因与载体pMD20-T的连接
•       1.2.3. 5 重组子的筛选
•       1.2.3. 6 序列测定与分析
•     1.2.4固碳菌菌体生长及菌体含量测定
•     1.2.5 土壤中固碳菌培养试验
•     1.2.6 RubisCO酶活性测定
•       1.2.6. 1 样品处理
•       1.2.6. 2 RubisCO酶酶联免疫分析测定
• 2 结果
•   2.1 菌株分离筛选
•   2.2 cbbL基因分析
•   2.3 固CO2菌株的鉴定
•     2.3.1 固CO2菌株形态特征
•     2.3.2 固CO2菌株生理生化反应
•   2.4 16S rDNA序列分析结果
•     2.4.1 细菌基因组DNA的提取及扩增
•     2.4.2 重组质粒的的分子验证
•     2.4.3 序列测定与分析
•   2.5 固碳菌菌体生长及菌体含量测定
•   2.6 固碳菌菌液RubisCO酶活性测定
•   2.7 土壤中施固碳菌试验结果
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭珺,樊芳芳,王立革,武爱莲,郑军

关键词: 固碳微生物菌株,基因,酶活性

来源: 生物技术通报 2019年01期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学

单位: 山西省农业科学院农业环境与资源研究所山西省土壤环境与养分资源重点实验室,山西省农业科学院高粱研究所,山西省农业科学院小麦研究所

基金: 国家重点研发计划子课题(2017YFD0800405),山西省煤基重点科技攻关项目(FT201402-15),山西省重点研发计划项目(201703D221008-2)

分类号: Q93

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0544

页码: 90-97

总页数: 8

文件大小: 1206K

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