一株鸽新城疫病毒Pi/YN/CH/0122/2018株的分离鉴定

一株鸽新城疫病毒Pi/YN/CH/0122/2018株的分离鉴定

论文摘要

为了确诊云南省某赛鸽公棚疑似感染新城疫发病鸽子死亡的原因,采集病死鸽的组织样品,经9日龄鸡胚接种分离病毒,利用HA和HI试验、RT-PCR对分离株进行鉴定,并通过鸡胚接种试验测定鸡胚最小致死剂量和平均死亡时间,测定扩增核酸序列构建系统进化树。结果显示,从送检的病死鸽中分离到1株病毒,命名为Pi/YN/CH/0122/2018,该毒株能凝集鸡红细胞,其F2代尿囊液HA效价为27,血凝性能被NDV阳性血清所抑制,而不能被减蛋综合征、禽流感(H5、H7、H9)阳性血清抑制; RT-PCR检测NDV核酸呈阳性,毒株最小致死量和平均致死时间(MDT)分别为10-6和66 h;其核苷酸序列与鸽Ⅰ型副黏病毒的同源性较高,相似性达92. 3%,与LaSota株、F48E9北京株的同源性较低,相似性约为82. 4%、81. 2%;裂解位点的氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合NDV强毒株特征。结果表明,分离的鸽新城疫毒株是导致鸽子发病死亡的原因。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病料
  •     1.1.1 鸡胚和NDV病毒
  •     1.1.2 阳性血清
  •   1.2 分子生物学试剂及引物合成
  •   1.3 病毒分离
  •   1.4 病毒鉴定
  •     1.4.1 血凝 (HA) 和血凝抑制 (HI) 试验
  •     1.4.2 病毒MDT测定
  •     1.4.3 病毒RNA的提取及PCR扩增
  •     1.4.4 PCR产物核酸序列测定及进化树的构建
  • 2 结果与分析
  •   2.1 发病鸽临床症状及剖检情况
  •   2.2 接种后死亡胚体的病变观察
  •   2.3 病毒鉴定
  •   2.4 EID50及MDT的测定结果
  •   2.5 RT-PCR扩增结果
  •   2.6 核酸序列比对分析
  • 3 小结
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李敏,和春林,严红亚,信爱国,常志顺

    关键词: 鸽新城疫病毒,分离鉴定,基因,序列分析

    来源: 云南畜牧兽医 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 云南省畜牧兽医科学院养禽与禽病研究所

    基金: 云南省现代农业产业技术体系——禽蛋产业技术体系(云农科[2018]10号)

    分类号: S852.65

    页码: 1-4

    总页数: 4

    文件大小: 1430K

    下载量: 172

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