ARTP诱变联合抗生素抗性选育纳豆激酶高产菌株

论文摘要

为获得产纳豆激酶(nattokinase,NK)活力增强的菌株,以纤维蛋白平板法测得酶活力值为判定指标,采用常压室温等离子体诱变系统(ARTP)对枯草芽孢杆菌XZI125进行诱变,通过酪蛋白平板法和利福平、卡那霉素、链霉素、氯霉素四种抗生素抗性筛选法获得高产NK突变菌株。结果表明,经6轮摇瓶发酵验证,获得了3株遗传稳定的高产突变菌株A27,Ar41和Ac35,摇瓶发酵5 d的产酶活力分别比原始菌株(2490 IU/mL)提高了23.0%、25.1%、26.5%。比较酪蛋白平板筛选方法和0.7μg/mL利福平、50μg/mL卡那霉素、60μg/mL链霉素、300μg/mL氯霉素四种抗性筛选方法,抗生素抗性筛选方法更有利于NK高产菌株的筛选。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 培养基的配制
•     1.2.2 纳豆激酶活力的测定
•       1.2.2. 1 尿激酶标准曲线的测定
•       1.2.2. 2 发酵液中纳豆激酶活力的测定
•     1.2.3 菌悬液的制备
•     1.2.4 ARTP诱变
•     1.2.5 抗生素最小抑菌浓度（MIC）的测定
•     1.2.6 高产突变株的筛选
•     1.2.7 高产突变株遗传稳定性的测定
•   1.3 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 尿激酶标准曲线
•   2.2 ARTP诱变结果
•     2.2.1 ARTP处理时间的确定
•     2.2.2 抗生素抗性筛选浓度的确定
•       2.2.2. 1 利福平的MIC
•       2.2.2. 2 卡那霉素的MIC
•       2.2.2. 3 链霉素的MIC
•       2.2.2. 4 氯霉素的MIC
•     2.2.3 高产突变株筛选结果
•     2.2.4 高产突变株的遗传稳定性
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 薛莹莹,林福兴,别小妹,吕凤霞,赵海珍,陆兆新

关键词: 纳豆激酶,枯草芽孢杆菌,诱变,抗生素抗性,突变株筛选

来源: 食品工业科技 2019年23期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,轻工业手工业

单位: 南京农业大学食品科技学院

基金: 国家自然科学基金(31571887)

分类号: TS201.3

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.23.016

页码: 93-97

总页数: 5

文件大小: 767K

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