论著
摘要：目的观察督脉灸对衰老大鼠骨骼肌形态与质量的影响。方法 将30 只SD 大鼠随机分为空白组10 只、模型组10 只、督脉灸组10 只。空白组与模型组均未予干预；督脉灸组予以督脉灸干预，每天1 次，每次20 min，共20d；结束后处死大鼠，剥离双侧竖脊肌并称重，分析骨骼肌SI（Sarcopenia Index 肌萎缩指数）值，进行HE 染色观察形态学变化。结果 模型组的肌肉湿度和SI 值较空白组明显的降低（P＜0.05），督脉灸组的肌肉湿度和SI 值较模型组组明显的升高（P＜0.05）；组织形态学：肌萎缩程度空白组最轻、模型组程度最重，督脉灸组轻于模型组。结论督脉灸可以改善衰老大鼠骨骼肌形态，增加骨骼肌质量与状态，延缓骨骼肌衰老。
关键词：督脉灸；骨骼肌衰老；骨骼肌质量
0 引言
骨骼肌衰老表现为衰老性肌萎缩，即肌肉质量减少和肌力减退[1]。脊柱骨骼肌具备一定的质量和力量，是脊柱发挥正常生理功能的基础。伴随着年龄的增长，机体的骨骼肌会逐渐出现衰老性萎缩，尤其是椎旁肌中的竖脊肌发生衰老性萎缩退变可以引起一系列的脊柱退行性病变，表现为腰背部沉重僵硬酸痛，老年性驼背，身高变矮等[2]。根据研究统计，有80%的成年人在他们的一生中会发生腰背部疼痛，在很大程度上与脊柱退行性疾病有关[3]，发病率仅次于普通感冒[4]。督脉为阳脉之海，可调节机体一身之阳气。《黄帝内经》提到“灸则强食产肉”，本团队长期应用督脉灸治疗骨骼肌衰老导致脊柱退行性病变，临床疗效显著。本研究通过督脉灸干预大鼠骨骼肌衰老模型，观察大鼠骨骼肌形态学及肌肉质量的变化。
基于工作过程的项目化课程教学遵循以工作过程为导向的原则，以实际工作为基础，以项目为载体，以技能训练为主线，整理融合教学内容，学生通过完成项目任务实现学习目标。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
30 只SPF 级健康雄性SD 大鼠，12 周龄，体重约（270±30）g，合格证号：SYXK（闽）2014-0001，研究动物由福建中医药大学动物实验中心负责购买及喂养。
轮腿机构设计应满足以下要求:结构简单,可以快速灵活地实现单个轮腿的升降，从而稳定挖沟机车体姿态,保证挖沟机工作部件运行平稳、工作可靠.
1.2 试验药物与试剂
D-半乳糖（上海信裕生物科技有限公司）；苏木素伊红染色液（碧云天生物技术有限公司）；中性树胶（福州迈新生物技术公司）。
1.3 主要实验设备及试剂
研究数据采用SPSS 18.0 进行统计处理，计量数据都采用均值±标准差来表示。如果数据均符合正态性和方差齐性则采用单因素方差分析分析组间差异；如果不满足正态性及方差齐性则用非参数检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。
2 实验方法
2.1 造模
取材后，在电子天平上迅速称量肌肉重量并记录，然后通过竖脊肌与最终体重的比值得到SI 值。
2.2 干预
造模后对督脉灸组大鼠行督脉灸干预治疗。具体操作步骤：大鼠俯卧位固定，沿背部脊柱部位剪去宽度约为0.5 cm 的毛发，将6 根艾条用竹签并排串连起来，选择大椎、至阳、命门、腰阳关、腰俞、长强等6 个穴位，使艾条最低点距离大鼠皮肤4～5 cm 行温和灸，每日1 次，每次20 min，连续20 天。
2.3 动物取材与标本制备
见表1。
2.4 大鼠的SI（sarcopenia index）值
采用随机数字表30 只SD 大鼠随机分为空白组、模型组、督脉灸组各10 只。模型组和督脉灸组采取同样的方式造模[5-6]：按照125 mg/(kg…d)的剂量，从大鼠颈背部（C5-C7）皮下注射D-半乳糖，每天1 次，连续6 周。空白组大鼠在颈背部同一位置注射等量的生理盐水，作为对照，每天1 次，连续6 周。
2.5 HE 染色观察形态学变化
《黄帝内经》提到“灸则强食产肉”。督脉循行在背部正中脊柱中央，“循脊”，督脉为阳脉之纲，“总督诸阳”，为阳脉之海，可调节全身阳气。有医家结合历代医家的经典论著，认为脊柱退行性病变的根本为督脉阳气虚，“通督强脊，扶阳固本”，可以改善脊柱退行性病变。因此本研究的中医理论基础为督脉灸可以通督强脊，强壮保健，扶阳固本，延缓衰老性肌肉萎缩，改善脊柱退行性病变。在临床上督脉灸也是常用疗法，对加强肌肉功能，改善脊柱病变有显著效果。临床上采用督脉灸治疗脊柱退行性病变的疗效已经得到肯定。章慎磊等[19]对76 例慢性非特异性腰痛患者进行分析，中药内服加熏蒸加督灸治疗慢性非特异性腰痛，不仅可以提高治疗效果，改善腰部局部和整体肌肉群的恢复，还能有利于患者生活质量的提高。林海波等[20]将脾肾阳虚型绝经后PMOP 腰背痛患者共70 例随机分为对照组和治疗组两组，对照组采用常规钙剂进行治疗，治疗组则配合督灸疗法。结果发现督灸能减轻患者腰背痛的程度，并能由此改善患者腰部肌肉功能障碍，有利于老年人生活质量的提高。
2.6 统计学分析
倒置显微镜（德国徕卡公司）；低温高速离心机（美国Thermo公司）；金属恒温箱（上海精宏实验设备有限公司）；石蜡包埋机（湖北省孝感市亚光医用电子技术有限公司）；切片机德国徕卡公司）；电子天平（上海奥美斯仪器公司）。
3 结果
3.1 大鼠原始体重与最终体重比较
干预结束后，大鼠进行称重，然后用3% 戊巴比妥钠溶液（25 mg/kg）腹腔注射方式处死。将大鼠取俯卧位固定，于大鼠背部后正中线沿着整个脊柱切开皮肤，剔除皮毛、筋膜，暴露分离出脊柱周围肌肉，剥离双侧竖脊肌并称湿重，然后将取下的竖脊肌组织放入提前准备好的标记的离心管中。取竖脊肌颈段组织放入4%多聚甲醛溶液中固定，用于HE 染色进行形态学观察。
表1 大鼠原始体重与最终体重比较）
注：与空白组比较，1）P＞0.05；与模型对照组比较，2）P＞0.05。
3.2 竖脊肌的肌肉湿重及SI 值比较
骨骼肌衰老伴随着衰老的发生，是人体最先衰老的组织之一，表现为肌肉质量减少和肌力减退[1]。大量研究[12-14]表明，随着年龄增大机体衰老，衰老性肌萎缩的流行率及发病率逐步增高。骨骼肌具备一定的质量和力量是脊柱发挥正常生理功能的基础。衰老性肌肉萎缩不仅可以引起质量减少，也会不可避免的造成椎旁肌肌肉功能下降，尤其是竖脊肌的功能降低可以引起一系列的脊柱退行性病变，表现为腰背部沉重僵硬酸痛，老年性驼背，身高变矮等[2]。据研究统计，80%的成年人在一生之中会出现腰背部疼痛，多与脊柱退行性病有关[3]，发病率仅次于普通感冒[4]。腰背痛的致病原因有很多，在很大程度上和竖脊肌老化萎缩及其导致的收缩功能下降有着互为因果的关系[18]。竖脊肌等脊椎旁肌群衰退降低了骨骼肌质量及力量，影响了脊柱稳定性及活动范围，导致机体维持平衡的能力降低，姿势控制能力下降，使机体易于跌倒，闪挫腰，导致骨折，脊柱佝偻变形等脊柱退行性疾患的发生。因此，延缓衰老性肌肉萎缩对改善脊柱疾病，提高脊柱功能有很大作用，对提高老年人的生活质量和健康水平，有着重要的社会学意义。
表2 竖脊肌的肌肉湿重及SI 值比较
注：与空白组比较，1）P＜0.05；与模型对照组比较，2）P＜0.05。
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3.3 肌肉HE 染色的形态学观察
空白组大鼠的肌纤维细胞排列整齐，呈多边形，大小基本一致，细胞核大部分分布在肌细胞边缘，极少位于细胞的中心部位；模型组大鼠肌纤维细胞表现出不同程度的萎缩或者退行性改变，肌细胞呈现圆形化，大小不等，排列紊乱不齐，各个细胞间隙增大，细胞直径的差别增大；督脉灸组大鼠的骨骼肌在形态学上萎缩退变程度较模型组轻，表现为：肌细胞呈现圆形化，大小不等，排列趋于整齐，细胞间隙相对减小，细胞直径差别相对减小。如图1 所示。结果提示：6 周D-Gal 皮下注射复制亚急性骨骼肌衰老模型，可以造成大鼠骨骼肌细胞出现萎缩和退行性改变等衰老的现象，督脉灸可以从一定程度上减轻萎缩和退行性改变的程度。
图1 各组大鼠骨骼肌形态学表现(HE 染色×100)
4 讨论
见表2
认为“人工智能不应具有法律人格”的重要论点之一，是认为人工智能和人存在根本性不同，人工智能不可能成为人。[注]熊琦：《人工智能生成内容的著作权认定》，《知识产权》2017年第3期，第3—8页；王迁：《论人工智能生成的内容在著作权法中的定性》，《法律科学(西北政法大学学报)》2017年第5期，第148—155页；罗祥、张国安：《著作权法视角下人工智能创作物保护》，《河南财经政法大学学报》2017年第6期，第144—150页。根据现行法律制度和法学原理，除了法人可具有拟制法律人格外，法律人格只有自然人才能享有，故人工智能不可能具有法律人格。
将取材后剪下的竖脊肌组织放入提前准备好的装有4%多聚甲醛的50 mL EP 管中，室温固定48 h。而后水洗、常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片，HE 染色，显微镜下利用无偏体视学(unbiased stereology)技术，每张切片随机取3 个不同视野(100×)骨骼肌片。
衰老过程中随着骨骼肌质量发生下降，却并没有引起体重的明显下降，这是由于在机体的衰老进程中，伴随着骨骼肌质量明显下降的同时，脂肪组织也会逐渐增加[21]。这与本实验的研究结果相一致，各组大鼠的体重在实验开始前无明显差异，实验结束后各组称量体重发现最终体重无明显差异，各组大鼠的最终体重都较原始体重有所增加。大量研究通过CT 扫描、超声影像等发现[22-24]，老年人的骨骼肌横截面积与年轻人相比明显变小，骨骼肌密度明显减小，同时机体非肌肉组织，如脂肪和其它组织等的含量要明显高于年轻人。Takahashi 等[25]为了研究由于衰老导致的肌肉质量的变化，采用核磁共振方法扫描测试年龄在20 岁至79岁之间的女性腰部竖脊肌的横断面积，发现女性腰部竖脊肌在20岁时最大，随着年龄增大，会呈现减小趋势。依据Baumgartner 等人提出的基本判定标准，可以通过计算靶骨骼肌的湿重和体重的比值，来求得Sarcopenia Index，即SI 值，用它作为衰老性肌萎缩的间接判定标准 [26]。结合本研究的实验结果发现，与空白组相比，模型组大鼠的SI 值出现了明显的降低，表明衰老造模后模型组大鼠出现了骨骼肌衰老的改变。与模型组大鼠相比，督脉灸干预大鼠的SI 值出现了升高，表明督脉灸可以改善大鼠的骨骼肌衰老，延缓大鼠衰老性肌萎缩。
本实验采用HE 染色法，可以很直观地观察到空白组、模型组、督脉灸干预组三组大鼠骨骼肌组织的形态学变化，以此来判断造模后骨骼肌的形态学以及督脉灸干预后大鼠骨骼肌的形态学变化。通过HE 染色，我们观察到空白组大鼠为正常骨骼肌组织形态学特征，而模型组与督脉灸干预组都有明显的萎缩退变，其中模型组的程度较督脉灸干预组更为严重。在显微镜下可观察到空白组大鼠骨骼肌表现为肌纤维集合成肌束，每一个肌纤维排列整齐，略呈现多角形，大小基本一致，细胞核大多位于肌纤维细胞边缘，极少位于细胞体的中心部。表明空白组大鼠骨骼肌组织为大致正常。模型组大鼠骨骼肌形态学表现为肌细胞呈现圆形化，大小不等，排列紊乱不齐，细胞间隙增大，细胞直径的差别增大。表明模型组大鼠经过衰老造模后，衰老骨骼肌有一定程度的萎缩退变。督脉灸组大鼠的骨骼肌与模型组相比在形态学上萎缩退变程度相对较轻表现为：肌细胞呈现圆形化，大小不等，排列趋于整齐，细胞间隙相对减小，细胞直径差别相对减小。表明督脉灸组大鼠经督脉灸干预处理后，骨骼肌形态学表现较模型组有所改善，说明督脉灸干预对骨骼肌衰老有改善作用。
综上所述，督脉灸可以改善衰老大鼠骨骼肌形态，增加骨骼肌质量，延缓骨骼肌衰老，其确切的作用机制，需要进一步研究。
新预算法的推进和实施，是对我国近来年财务预算管理问题的一次总结和归纳，有针对性的对财务预算管理曾出现的问题做出了解释、回答并给出了真实有效的管理办法和约束性的法规。因此，事业单位需要严格依照新预算法的相关内容，在深入了解和认识自身的预算体系和具体情况后进行改革和完善，强化财务管理力度，提高行政事业单位财务的透明化水平。这样一来，才能对事业单位的资金、人力以及物力进行高效的配置和运用，最大限度发挥政府资源的公共效益，更好的为国家和人民群众服务。
由表4可以看出，第1期农产品价格对自身变动的贡献率为100%，当其稳定时贡献率在88%左右；而CPI对农产品价格变动的贡献率在第1期时为0，当其稳定时贡献率在11%左右。说明在其他条件不变的情况下，农产品价格的变动主要是由自身变动引起的。
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Effect of Du Meridian Moxibustion on Erector Spinae Morphology of Aging Model Rats
HUANG Cheng-wu1, LIU Wu-long2, LIN Jian-ping1, CHEN Yi-min 1, CHEN Shao-qing1, WANG Shi-zhong1, WANG Xi2*
(1. Fujian University of traditional Chinese medicine, Fuzhou Fujian； 2. Key Laboratory of rehabilitation technology, Fuzhou Fujian)
ABSTRACT:Objective To observe the effect of Du Meridian Moxibustion on the morphology and quality of skelet al muscle in aging rats. Methods Thirty SD rats were randomly divided into blank group (10 rats), model group (10 rats) and Du Meridian Moxibustion group (10 rats). The blank group and the model group were not intervened； the Du Meridian Moxibustion group was intervened by Du Meridian Moxibustion once a day, 20 minutes each time, for 20 days； after the end of the experiment, rats were killed, bilateral erector spine muscles were stripped and weighed,SI (Sarcopenia Index muscular atrophy index) values of skelet al muscles were analyzed, and morphological changes were observed by HE staining. Results Muscle humidity and SI values in model group were significantly lower than those in blank group (P＜0.05), while those in Du Meridian Moxibustion group were significantly higher than those in model group (P＜0.05)； Histomorphology: Muscle atrophy was the lightest in blank group, the heaviest in model group and lighter in Du Meridian Moxibustion group than in model group. Conclusion Du Meridian Moxibustion can improve skelet al muscle morphology, increase skelet al muscle quality and state, and delay skelet al muscle aging in aging rats.
KEY WORDS: Du Meridian Moxibustion； Skelet al Muscle Aging； Skelet al Muscle Quality
中图分类号：R746.4
文献标识码：A
DOI:10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.86.001
本文引用格式：黄承武,刘午龙,林建平,等.督脉灸对衰老模型大鼠竖脊肌形态学的影响[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(86):1-2,5.
基金资助：福建省科技厅科技平台建设项目（2015Y2001）；福建省自然科学基金（2019J01360）
作者简介：黄承武（1990-），男，2017 级在读研究生，研究方向：脊柱与相关疾病康复研究。
通讯作者＊：王喜（1979-），男，医学硕士，主治医师，研究方向：脊柱与骨关节康复研究。
标签：骨骼肌论文; 督脉论文; 衰老论文; 大鼠论文; 脊柱论文; 医药论文; 卫生论文; 中国医学论文; 中医临床学论文; 针灸学论文; 针灸疗法论文; 《世界最新医学信息文摘》2019年第86期论文; 福建省科技厅科技平台建设项目(2015Y2001)福建省自然科学基金(2019J01360)论文; 福建中医大学论文; 福建省康复技术重点实验室论文;