导读:本文包含了遗传转化抗逆性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:白桦,BpBEE2基因,载体构建,遗传转化
遗传转化抗逆性论文文献综述
颜斌,武丹阳,李慧玉[1]（2019）在《白桦BpBEE2基因的遗传转化及抗逆性分析》一文中研究指出Brassinolide Enhanced Expression2(BEE2)基因属于bHLH转录因子家族,是调控油菜素内酯信号转导的上游调控因子。本研究通过RT-PCR技术克隆BpBEE2基因的全长cDNA序列,构建植物过表达及抑制表达载体,并通过农杆菌介导法进行白桦的遗传转化,对获得的转基因株系进行生长量及盐、旱胁迫分析,结果表明:获得了长度为1 080 bp的全长cDNA序列,成功构建了该基因的过表达及抑制表达载体,并获得了过表达和抑制表达的白桦株系。BpBEE2基因过表达白桦株系的苗高高于对照株系,而抑制表达株系的苗高低于对照株系。同时发现BEE2基因对盐、旱胁迫后对植株的鲜重也产生了影响。说明Bp BEE2可能参与了植物的生长发育过程,并且改善了植物的抗旱、耐盐性。(本文来源于《植物研究》期刊2019年02期）
胡有良[2]（2017）在《盐生草HgNHX1对大麦的遗传转化及转基因大麦抗逆性分析》一文中研究指出大麦(Hordeum vulgare L.)属禾本科植物,主要用于制造啤酒及饲用。其具有抗旱、耐盐碱等特性。随着全球气候与生态环境的日益恶化,土壤盐碱化和干旱仍然是限制大麦生长的两个主要环境因素。采用基因工程手段,培育高抗旱耐盐性大麦新品种已成为大麦栽培的迫切要求。而受体材料是遗传转化的基础,寻求一种来源广泛、取材方便、受基因型和季节限制小、高频再生的体系对于有效地开展大麦转基因研究具有重要意义。因此,本实验通过建立大麦茎尖再生体系,利用农杆菌介导法将盐生草(Halogeton glomeratus)Na+/H+逆向转运蛋白(NHX)HgNHX1基因导入大麦,获得转基因阳性植株并对转基因大麦T1代植株进行抗逆性分析。主要研究结果如下:1.以栽培中常用品种甘啤3号、甘啤4号和甘啤6号为材料,研究了大麦茎尖高频再生体系影响因素,其中种子浸泡在30%的硫酸中,30℃、180 r/min摇动1 h为去除颖壳最佳方法;75%的乙醇处理1.5 min+2%的NaClO处理15 min为较好的灭菌方法;3 d苗龄、茎基部2 mm处切段效果最好;3 mg/L 2,4-D有利于愈伤组织诱导,参试品种中甘啤4号再生能力较强。2.利用盐生草HgNHX1对大麦进行遗传转化,采用农杆菌介导法,真空渗透处理5 min,超声波处理30 s,100 r/min摇动侵染30 min的瞬时转化率较高,获得了抗性再生植株23株,PCR检测阳性植株数7株,并获得了T1代种子。3.对T1代转基因大麦植株抗逆性分析发现,在干旱、盐胁迫下,HgNHX1基因在大麦中表达丰度增高,转HgNHX1基因大麦植株的耐盐性不明显,而抗旱性增强。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2017-06-01）
沈进娟[3]（2008）在《挪威鼠Hspa4基因的克隆及遗传转化水稻抗逆性的研究》一文中研究指出热激蛋白(Heat Shock Proteins,HSP)又称热休克蛋白或应激蛋白(Heat Stress Proteins),是一组在进化上高度保守的、原核和真核生物中普遍存在的蛋白质。在热激、冷激、有机物、重金属、缺氧以及基因损伤、组织创伤、微生物感染等应激条件下,生物体内大部分正常蛋白质的合成和mRNA的转录被抑制,同时迅速合成一些逆境蛋白能够抵御不良环境。挪威鼠热激蛋白(Rattus norvegicus heat shock protein 4,Hspa4),又称为irp94(ischemia responsive 94 kDa protein),通过参与热激响应、未折迭蛋白应答等来保护机体免受损伤,在正常生理条件下参与依赖ATP的蛋白质运输,折迭和装配过程;Hspa4(HSP70)是哺乳动物细胞内很重要的一种移动性较大的分子伴侣,具有阻止蛋白质变性的功能,热激或其它胁迫下可能参与体内变性蛋白质的清除,以防止其凝聚,损伤细胞。本文通RT-PCR技术克隆了Hspa4基因,构建了超表达载体和诱导表达载体,将其转化水稻愈伤组织,用潮霉素抗性基因筛选出株转基因植株并进行检测。为通过基因工程改良植物抗逆性提供了材料和理论基础,并为提高作物产量提供了依据。取得了如下进展:①Hspa4基因的克隆采用RT-PCR技术克隆了Hspa4基因的全长cDNA长度2530 bp,该序列包含2523bp阅读框,编码840个氨基酸,与GenBank中Hspa4序列比对,核苷酸序列同源性为99.96%,只有一个碱基发生突变,1682bp处的碱基T突变为C,导致该位点处氨基酸由Met变为Thr,氨基酸序列分析结果显示在该位置处氨基酸Thr和Met几乎各占一半,小家鼠在该位置处为Thr,推测Hspa4在该氨基酸位点处最大的可能性应为Thr。而且立体结构分析显示,克隆的序列与原序列立体结构完全一致。②高等植物启动子的克隆利用PCR方法共克隆了3个植物启动子,其中组成型的启动子有两个包括玉米泛素Ubi-1启动子和水稻激动蛋白Actin启动子(Genbank登录号:EU155408),GUS组织染色法表明这两个启动子都具有瞬时检测活性,其转化效率远远高于CaMV 35S启动子,该启动子为超量表达目的基因提供了基础.。本实验还克隆了拟南芥耐高盐、耐低温、耐干旱Rd29A启动子,该启动子可在高盐、低温、干旱的诱导下大量表达目的基因,可提高作物的抗性。③植物表达载体的构建本实验构建了6个植物表达载体,其中3个含有启动子驱动GUS基因的植物表达载体pBI121-Ubi-GUS、pCAMBIA1301-Actin-GUS、pCAMBIA1301-Rd29A -GUS,为研究启动子的功能打下了基础;成功构建了分别由2个启动子分别驱动的Hspa4基因的植物表达载体pCAMBIA1301-Ubi-Hspa4、pBI121-Hyg-Ubi-Hspa4 pCAMBIA1301-Rd29A-Hspa4,为通过基因工程提高水稻的抗性提供了材料。④转基因植株的获得及检测通过农杆菌介导法将6个植物表达载体转化进水稻基因组中,共获得了近百株转基因植株,有66株已通过PCR检测,其中阳性转基因植株有27棵。转基因植株的获得为筛选抗逆性水稻品种提供了材料和依据。(本文来源于《重庆大学》期刊2008-04-01）
刘甜甜[4]（2006）在《柽柳泛素交联酶基因的遗传转化及抗逆性分析》一文中研究指出本研究将从极度抗旱、耐盐植物柽柳(Tamarix androssowii)中克隆得到的泛素交联酶基因(ubiquitin conjugating enzymes E2s),成功构建到植物表达载体pROKⅡ上,利用农杆菌介导法将泛素交联酶基因导入模式植物烟草基因组中,通过对转基因烟草的盐、旱胁迫试验,对泛素交联酶基因进行功能验证。 对烟草进行遗传转化,共获得68株卡那霉素抗性芽,从中选出长势最优的15个株系,进行PCR检测,结果均为阳性;从15个株系中随机对6个株系进行PCR-Southem杂交,各转基因株系均出现杂交谱带,证明泛素交联酶基因己整合到烟草基因组中;进一步对6个株系进行RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测,结果表明外源基因能够表达,但各株系外源基因的表达水平不尽相同,表达量最高的为TL3和TL1,TL10和TL11次之、最低的为TL5和TL7。 分别对6个转基因株系进行了NaCl胁迫和干旱胁迫试验,分析逆境胁迫条件下转基因烟草与非转基因对照烟草的丙二醛(MDA)含量、相对电导率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、叶绿素含量、相对生长量、生根率等指标的变化,结果表明,不同浓度NaCl胁迫处理后,各株系的相对电导率、MDA含量都逐渐增大,在NaCl浓度为440mmol.L~(-1)时,各转基因株系相对电导率平均值低于对照烟草的27.1%,MDA平均含量低于对照的22.6%;NaCl胁迫下,各转基因株系SOD平均活性最低的TL5也高于对照烟草的47.5%,叶绿素平均含量最高的TL10高于对照烟草的64.4%,最低TL3也高于对照烟草的29.7%:当NaCl浓度220mmol.L~(-1)时对照烟草生根率只有30%,而转基因烟草生根率保持在50～70%,综上说明,盐胁迫条件下,转基因烟草受害程度明显小于对照。 干旱胁迫处理10d时,转基因烟草相对电导率平均值低于对照烟草的19.6%;对照烟草MDA含量为7.7μmol.g~(-1),而转基因烟草MDA含量大多在4.9～6.3μmol.g(-1)左右,低于对照烟草;此时转基因烟草的叶绿素平均含量为1.01mg.g~(-1),高于对照的64.5%,而SOD平均活性高于对照的32.3%;对转基因株系干旱胁迫10d时相对生长量进行调查,各转基因株系相对生长量在59%～83%范围之间,而对照株系的相对生长量为29.7%,说明泛素交联酶基因的导入提高了烟草的抗旱能力。 综合以上结果,泛素交联酶基因的组成型表达能够不同程度提高转基因烟草逆境胁迫下细胞膜稳定性、SOD活性、叶绿素含量及相对生长量,说明泛素交联酶基因具有提高植物抗旱、耐盐性的功能。(本文来源于《东北林业大学》期刊2006-05-01）
遗传转化抗逆性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
大麦(Hordeum vulgare L.)属禾本科植物,主要用于制造啤酒及饲用。其具有抗旱、耐盐碱等特性。随着全球气候与生态环境的日益恶化,土壤盐碱化和干旱仍然是限制大麦生长的两个主要环境因素。采用基因工程手段,培育高抗旱耐盐性大麦新品种已成为大麦栽培的迫切要求。而受体材料是遗传转化的基础,寻求一种来源广泛、取材方便、受基因型和季节限制小、高频再生的体系对于有效地开展大麦转基因研究具有重要意义。因此,本实验通过建立大麦茎尖再生体系,利用农杆菌介导法将盐生草(Halogeton glomeratus)Na+/H+逆向转运蛋白(NHX)HgNHX1基因导入大麦,获得转基因阳性植株并对转基因大麦T1代植株进行抗逆性分析。主要研究结果如下:1.以栽培中常用品种甘啤3号、甘啤4号和甘啤6号为材料,研究了大麦茎尖高频再生体系影响因素,其中种子浸泡在30%的硫酸中,30℃、180 r/min摇动1 h为去除颖壳最佳方法;75%的乙醇处理1.5 min+2%的NaClO处理15 min为较好的灭菌方法;3 d苗龄、茎基部2 mm处切段效果最好;3 mg/L 2,4-D有利于愈伤组织诱导,参试品种中甘啤4号再生能力较强。2.利用盐生草HgNHX1对大麦进行遗传转化,采用农杆菌介导法,真空渗透处理5 min,超声波处理30 s,100 r/min摇动侵染30 min的瞬时转化率较高,获得了抗性再生植株23株,PCR检测阳性植株数7株,并获得了T1代种子。3.对T1代转基因大麦植株抗逆性分析发现,在干旱、盐胁迫下,HgNHX1基因在大麦中表达丰度增高,转HgNHX1基因大麦植株的耐盐性不明显,而抗旱性增强。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
遗传转化抗逆性论文参考文献
[1].颜斌,武丹阳,李慧玉.白桦BpBEE2基因的遗传转化及抗逆性分析[J].植物研究.2019
[2].胡有良.盐生草HgNHX1对大麦的遗传转化及转基因大麦抗逆性分析[D].甘肃农业大学.2017
[3].沈进娟.挪威鼠Hspa4基因的克隆及遗传转化水稻抗逆性的研究[D].重庆大学.2008
[4].刘甜甜.柽柳泛素交联酶基因的遗传转化及抗逆性分析[D].东北林业大学.2006