菜籽蛋白水解物的分离纯化及抗肿瘤活性研究

论文摘要

本研究将菜籽蛋白通过碱性蛋白酶-风味蛋白酶分步酶解制备得到菜籽蛋白水解物（RPH）,在经过超滤、葡聚糖凝胶柱（Sephadex G-15）以及半制备液相（RP-HPLC）分离纯化得到各级分离组分。采用MTT比色法分析菜籽蛋白水解物各组分RPHs（MW<1 ku）对人体肝癌细胞HepG2、乳腺癌细胞MBA-MD-231及人体结肠癌细胞Caco-2的体外抗增殖活性。当RPHs质量浓度为50～1 000μg/mL时,RPHs对HepG2细胞、MBA-MD-231细胞及Caco-2细胞均有一定的抑制作用,且抑制效果与样品浓度之间呈现出剂量依赖性;其中,HepG2细胞对RPHs的作用最为敏感。经Sephadex G-15凝胶柱分离后得到2个洗脱峰,收集并测定其活性,发现组分RPHs-F2具有更强的抗肿瘤细胞增殖活性;再进一步对其经半制备液相分离得到的组分进行体外抗增殖活性分析发现,除组分RPHs-F2-4外,其他3个分离组分都具有显著的抑制作用,而组分RPHs-F2-3对HepG2细胞具有最高的体外增殖抑制率,当作用质量浓度为1 000μg/mL时,抑制率为（51.53±5.59）%。因此认为菜籽蛋白酶解物分离组分RPHs-F2-3具有较好的抗肿瘤活性,可以作为功能性成分用于抗肿瘤相关的功能食品及保健品的开发。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 菜籽蛋白的制备
•     1.3.2 菜籽蛋白水解物的制备
•     1.3.3 菜籽蛋白水解物的超滤膜分离
•     1.3.4 葡聚糖凝胶柱Sephadex G-15分离纯化
•     1.3.5 半制备型RP-HPLC分离纯化
•     1.3.6 细胞培养
•     1.3.7 抗肿瘤活性分析
•     1.3.8 数据统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 菜籽蛋白水解物的超滤分析
•     2.1.1 超滤膜分离组分得率
•     2.1.2 超滤膜分离组分的抗肿瘤活性分析
•   2.2 菜籽蛋白水解物的凝胶色谱分析
•     2.2.1 Sephadex G-15凝胶色谱分离
•     2.2.2 凝胶色谱分离组分的抗肿瘤活性分析
•   2.3 菜籽蛋白水解物的半制备型RP-HPLC分析
•     2.3.1 半制备型RP-HPLC分离纯化
•     2.3.2 半制备RP-HPLC分离组分的抗肿瘤活性分析
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰

关键词: 菜籽蛋白酶解物,分离纯化,抗肿瘤活性

来源: 中国粮油学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 南京财经大学食品科学与工程学院/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心,江南大学食品学院

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0401401),南京市科技计划(201716034)

分类号: TQ464.7

页码: 47-53

总页数: 7

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