导读:本文包含了高丝氨酸论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:L-高丝氨酸内酯盐酸盐,柱前衍生,高效液相色谱,手性拆分
高丝氨酸论文文献综述
解银萍,王滢秀,董文凯,柴洪伟[1]（2019）在《柱前手性衍生化HPLC法拆分D,L-高丝氨酸内酯盐酸盐》一文中研究指出建立了一种简单、快捷的柱前手性衍生高效液相色谱法拆分D,L-高丝氨酸内酯盐酸盐的方法。以邻苯二甲醛(OPA)和N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)为手性衍生化试剂,流动相为乙腈-醋酸铵水溶液(v∶v=10∶90),色谱柱为WondaSil C18色谱柱,流速0.8 mL·min~(-1),柱温25℃,在230 nm紫外检测波长下进行检测。L-高丝氨酸内酯盐酸盐与其光学异构体分离度大于3.5,该方法的线性相关系数为0.999 2,相对标准偏差为0.064%,加标回收率为99.25%。(本文来源于《精细化工中间体》期刊2019年04期）
左泽红,魏韬,郭丽琼,林俊芳,张中浩[2]（2019）在《平菇高丝氨酸乙酰基转移酶基因的克隆及异源表达优化》一文中研究指出目的:为进一步提高酶法合成蛋氨酸的产量,从平菇中克隆获得蛋氨酸酶法合成的备选基因。方法:提取平菇菌丝球总RNA作为模板,通过反转录PCR获得高丝氨酸乙酰基转移酶基因(homoserine acetyltransferase gene,hta),利用酶切连接法构建含hta基因的表达载体pET32a-hta,转化至大肠杆菌BL21诱导表达并对诱导条件进行优化,同时,将表达载体pET32a-hta和pET22b-hta分别转入大肠杆菌工程菌Rosetta、Origami B和Rosetta gami plysS,探究该酶在不同载体及宿主组合中的表达情况。结果:经ExPAS-ProtParam tool、PSIPRED、SWISS-MODEL等软件分析表明,hta基因编码的多肽由445个氨基酸组成,等电点为5.93,二级结构主要有螺旋、无规则卷曲和延伸链。SDS-PAGE分析表明,IPTG终浓度为0.2 mmol/L,诱导温度为25℃,诱导时间为16 h时,工程菌BL21/pET32a-hta的可溶性高丝氨酸乙酰基转移酶(HTA)表达量最高。HPLC结果表明,当表达载体为pET32a-hta,表达宿主为Rosetta时,工程菌Rosetta/pET32a-hta诱导表达的HTA比活力最高为2.2 mU/mg。结论:经诱导条件和表达系统优化后,HTA的表达量提高且比活力增强,为进一步大规模生产蛋氨酸打下基础。(本文来源于《食品工业科技》期刊2019年13期）
黄瑾辉,胡熠,顾岩岭,史亚慧[3]（2018）在《SPE前处理-UHPLC-MS/MS测定MBR中两种N-酰基高丝氨酸内酯》一文中研究指出选用N-己基高丝氨酸内酯(C6-HSL)和N-辛基高丝氨酸内酯(C8-HSL)两种酰基高丝氨酸内酯类(AHLs)为代表物,建立了固相萃取(SPE)-超高效液相色谱串联叁重四级杆质谱(UHPLC-MS/MS)分析膜生物反应器(MBR)活性污泥中AHLs的方法.研究结果表明C6-HSL和C8-HSL在1～200μg/L内有良好的线性关系(R2> 0.998),方法的检出限为0.100μg/L,定量限为1.000μg/L,在3个浓度水平下的平均加标回收率为80.69%～83.75%,相对标准偏差(RSD)为4.71%～7.25%.方法精确度高、重复性好、基质效应弱,适用于MBR活性污泥中痕量AHLs的测定.(本文来源于《湖南大学学报(自然科学版)》期刊2018年12期）
罗梦,易皓,陈静,张文哲,韩云平[4]（2019）在《高效液相串联质谱法检定活性污泥中N-高丝氨酸内酯》一文中研究指出N-高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性菌群体感应系统中最重要的一类信号分子.本研究建立了高效液相串联质谱(HPLC-MS/MS)检测活性污泥中7种AHLs的方法.采用乙腈-水为流动相,选择电喷雾源正离子模式,经过梯度洗脱分离,在多反应监测模式下进行测定,分析时间为10 min.本方法在1—1000μg·L~(-1)范围内具有良好的线性关系,仪器检出限为1.0—2.0μg·L~(-1),仪器定量限为2.0—5.0μg·L~(-1),平均加标回收率在80.0%—113.4%之间.采用该方法对某污水处理厂和实验室序批式活性污泥装置(SBR)中活性污泥进行检测,均可检测到不同种类的AHLs,并具有良好的峰型及分离效果,说明方法可满足实际测定要求.(本文来源于《环境化学》期刊2019年02期）
刘诗梦,韩彩静,高云娜,赵兰,卢红妍[5]（2019）在《蛋氨酸特异性合成途径关键酶——高丝氨酸O-酰基转移酶的研究进展》一文中研究指出在蛋氨酸生物合成过程中,蛋氨酸特异性合成反应的第一步是高丝氨酸酰基化,由高丝氨酸O-酰基转移酶催化,生成酰基高丝氨酸。高丝氨酸O-酰基转移酶受到末端产物蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸的反馈抑制和反馈阻遏,且高温下极易失活,严重影响碳流流向蛋氨酸,是蛋氨酸生物合成的关键酶,因此对高丝氨酸O-酰基转移酶的研究和改造具有重要意义。但目前关于高丝氨酸O-酰基转移酶的改造和研究较少,在微生物代谢途径中,碳流不能过多流入蛋氨酸合成途径,制约了微生物过量积累蛋氨酸,阻碍了发酵法生产蛋氨酸的工业进程。本文简述了高丝氨酸O-酰基转移酶在蛋氨酸生物合成途径中的作用,在介绍该酶的结构、催化机制和研究现状的基础上,提出该酶在反馈抑制和提高稳定性方面的分子改造策略。(本文来源于《食品科学》期刊2019年11期）
解银萍,王滢秀,董文凯,柴洪伟[6]（2018）在《FMOC-Cl柱前衍生高效液相色谱法测定L-高丝氨酸内酯盐酸盐》一文中研究指出建立了一种简捷、快速测定L-高丝氨酸内酯盐酸盐的分析方法,L-高丝氨酸内酯盐酸盐经氯甲酸笏甲酯(FMOC-Cl)衍生化后用HPLC定量分析。采用Wonda Sil C18色谱柱,流动相为乙腈-水(体积比为50∶50),流量为1.0m L/min,柱温为25℃,检测波长为210nm进行检测。该方法的线性相关系数为0.9991,标准偏差为0.0016,平均回收率为99.39%。(本文来源于《山东化工》期刊2018年12期）
杨华青,吴一平,尹胜,王成涛,孙宝国[7]（2018）在《酿酒酵母O-酰基高丝氨酸硫解酶的原核表达及其催化蛋氨酸合成的研究》一文中研究指出酵母中存在着O-乙酰高丝氨酸硫解酶催化底物O-乙酰高丝氨酸和硫供体生成L-蛋氨酸的生物合成途径,为实现L-蛋氨酸的工业化生产提供了可能途径。为了建立L-蛋氨酸体外高效酶促合成方法,本研究从酿酒酵母中克隆了O-乙酰高丝氨酸硫解酶基因Met17,在大肠杆菌中成功进行了表达,并验证了其催化L-蛋氨酸合成的功能。从Saccharomyces cerevisiae S288C克隆的O-乙酰高丝氨酸硫解酶基因Met17大小为1335 bp,测序分析表明其与GenBank数据库中的对应序列(Accession No. NC_001144.5)具有100%的同源性。利用大肠杆菌诱导型表达载体构建了Met17基因表达载体pEASY-E1-MET17,转化至Escherichia coli BL21 (DE3)菌株,筛选出了Met17基因表达工程菌株E. coli BL21-MET17。q RT-PCR检测结果表明,IPTG诱导条件下,E. coli BL21-MET17中Met17基因的转录水平显着高于对照菌株E. coli BL21。SDS-PAGE检测结果表明,IPTG诱导条件下,重组蛋白Met17在大肠杆菌中获得了高效表达,分子量约为49 kD,且主要以可溶蛋白形式存在于细胞中。酶活检测结果表明,工程菌株E. coli BL21-MET17细胞破碎上清粗酶液能够以O-乙酰高丝氨酸和甲硫醇钠为底物合成L-蛋氨酸,其合成L-蛋氨酸的酶活力为49 U/g。研究结果将为L-蛋氨酸的高效生物合成方法的建立奠定重要基础。(本文来源于《益生菌：技术及产业化——第十叁届益生菌与健康国际研讨会摘要集》期刊2018-05-22）
靖宪月[8]（2018）在《高丝氨酸内酯信号分子影响电活性生物膜产电呼吸的效果与机制》一文中研究指出生物电化学系统(Bioelectrochemical System，BES)是一种利用电活性生物膜(Electroactive Biofilm,EAB)的氧化还原反应实现化学能与电能相互转换的装置。因其有助于污染修复技术向低投入、低能耗、低污染的方向转型,在环境污染治理等方面具有重要的应用前景。在BES中,EAB起着最为核心的作用,研究EAB形成的调控机制能优化BES的性能。生物膜的形成和成熟由不同形式的信号交流机制调节,大部分革兰氏阴性菌以高丝氨酸内酯类物质(N-acylhomoserineLactone,AHL)作为信号进行交流。然而,AHL 在 EAB 中的研究,特别是典型的电活性微生物--地杆菌(Geobacter)中的研究较少。基于此,本论文以电活性混合菌及典型电活性微生物GeobactersoliGSSO1为研究对象构建BES,综合运用电化学及分子生物学手段,从EAB的电化学活性、电导率、生物量、生物膜的活死细胞比率、紧密度、胞外聚合物(EPS)浓度及电子接受/供给能力方面,研究AHL对混合菌和GSS01生物膜产电呼吸性能的影响,从EAB微生物群落结构的角度解析其效应,从蛋白水平上探究其深层机制。论文主要结果如下:(1)在混合菌BES中外源添加叁种AHL(C4-HSL、C6-HSL和30C12-HSL),以及一种AHL淬灭剂(能够破坏AHL酰胺链和内酯环之间的酰胺键,使得AHL失去原有的功能,用于研究内源AHL),结果表明外源及内源AHL将BES启动时间分别缩短了 6天和3天。外源AHL使BES的库仑效率从28.3 ± 4.1%分别增加到 35.5 ± 5.5%(C4-HSL)、35.2 ± 5.8%(C6-HSL)和 36.2 ± 5.1%(30C12-HSL),内源AHL使库仑效率提高约了 8%左右,表明EAB的产电呼吸能力增强。因此,外源及内源AHL均能通过提高EAB的氧化还原学活性、电导率、生物量、活死细胞比率、紧密度、EPS总量及电活性来提高EAB的产电呼吸性能,此外,内源AHL还提高了 EPS种类的丰富度,以上均为提高混合菌EAB产电呼吸性能的原因。(2)高通量测序的结果表明,在添加外源AHL后EAB中典型的电活性微生物 Geobbacter sp.的比例从 56 ± 14%分别增加到 76 ± 4%(C4-HSL)、78 ± 6%(C6-HSL)和 71 ± 6%(30C12-HSL),内源 AHL则对Geobacter sp.在 EAB 中的占比无影响。电活性微生物Geobacter sp.比率的提高,是投加外源AHL后混合菌EAB产电呼吸性能提高的一个重要原因,是后续研究的立论基础。(3)基于结论(2),以Geobacter soli GSS01为对象,研究其成膜及产电呼吸性能对内外源AHL的响应规律。结果表明,外源及内源AHL对GSS01的成膜及产电呼吸均有促进作用,最大产电量分别提高了约50%和20%。同时,外源及内源AHL使BES的启动时间分别缩短了 2个周期和1周期,即形成稳定EAB的速度提高。与混合菌相同,AHL通过改善EAB的氧化还原活性、电导率、活死细胞比率、紧密度及EPS电活性改善其产电呼吸性能。此外,对GSS01生物膜从开始形成到成熟的整个过程进行监测,结果表明外源AHL促进了 GSS01的成膜速度,改善了成膜结构。(4)对GSS01生物膜进行原位电化学傅立叶红外光谱二维分析及蛋白质组学定量分析,结果表明外源AHL及内源AHL对GSS01生物膜的促进机制有所不同。由红外结果看出,外源AHL促进了添加外源AHL后,促进了酸胺Ⅱ的形成,而内源AHL则提高了 EAB外膜蛋白的丰富度。二维红外光谱的结果看出,随电压的变化(-0.8 V-0.4V)EAB膜外基团的振动顺序由:酰胺Ⅰ(β-链延伸)→血红素,变为:血红素→酰胺Ⅲ,而内源AHL被淬灭后EAB膜外基团随电压振动的顺序为:C-O伸缩振动→CH2/CH3结合→酰胺Ⅲ→酰胺Ⅰ(β-转角)。因此,内源AHL被淬灭后,参加外膜蛋白电子传递的血红素消失,外源AHL则促进膜蛋白内氢键的形成。蛋白组的结果表明,添加外源AHL后,其中与电子传递相关的NADH脱氢酶上调了 3倍,这是EAB产电性能提高的原因。添加淬灭剂后,在COG分类的“氨基酸转运和代谢”、“能量产生和转化”和“预测性一般功能”叁大类功能体系中显着性下调的蛋白最多,表明内源AHL对这叁类功能影响较大。另外,与EPS形成相关的磷酸烯醇丙酮酸合酶及与TCA循环相关的蛋白-柠檬酸合酶显着下调,这也是内源AHLs促进EABs生物膜形成的原因。(本文来源于《福建农林大学》期刊2018-03-01）
郭沐晗,廖建萌,孙力军,王雅玲,房志家[9]（2018）在《高效液相色谱-串联质谱法检测副溶血弧菌生物被膜形成过程中的N-酰基高丝氨酸内酯信号分子》一文中研究指出N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是副溶血弧菌的群体感应系统的信号分子,参与微生物的毒力调控,目前缺乏准确检测生物被膜中的信号分子的方法。在现有信号分子HPLC-MS/MS检测条件基础上,针对副溶血弧菌生物被膜生成过程中信号分子定性定量检测方法进行优化。结果显示:无水甲醇∶0.1%乙酸铵水为流动相分离效果较优;当选择碰撞能量为10~15 e V时,各信号分子均可形成较高比例的特征碎片离子(m/z)102.1和74.1,并在0~20μg/L范围内均有良好的线性关系(R2>0.995),采用该法能够检测副溶血性弧菌生物被膜形成过程中产生的C4-HSL、3-oxo-C6-HSL和3-oxo-C14-HSL叁种信号分子,其中C4-HSL的量占绝对优势(>91.67%)。在生物被膜形成的前期(0.5~3 d),信号分子的浓度缓慢增长,与生物被膜的生成量成正相关;当被膜进入消散期时(4~5 d),信号分子的浓度快速增长,与被膜生成量呈显着负相关。高效液相色谱-串联质谱法的优化有助于更加有效地检出生物被膜中的信号分子,为更好地认识生物被膜与群体感应信号分子间的调控关系提供支撑。(本文来源于《食品工业科技》期刊2018年12期）
蒋栋磊,刘延,葛攀玮,吴满刚,葛庆丰[10]（2017）在《酰化高丝氨酸内酯对巨噬细胞模型影响初探》一文中研究指出酰化高丝氨酸内酯类(Acyl-homoserine lactones,AHLs)化合物是革兰氏阴性菌群体感应系统中最重要的一类信号分子,本文模拟淡水鱼革兰氏阴性腐败菌产生的5种主要AHLs(C_4-HSL、C_6-HSL、C_8-HSL、C_10-HSL和3OC_12-HSL)。通过构建Ana-1和RAW 264.7两种巨噬细胞模型,筛选敏感识别特定AHLs的巨噬细胞株,为构建基于细胞传感的淡水鱼腐败菌的检测方法进行前期初步研究。结果表明,5种AHLs均能造成Ana-1和RAW 264.7细胞的活性降低;胞内Ca~(2+)荧光检测发现,在C_10-HSL的刺激作用下,Ana-1细胞的活性与胞内Ca~(2+)水平变化呈现一定的相关性,由此推测C_10-HSL具有诱导Ana-1细胞胞内Ca~(2+)上升,进而引发细胞内钙离子探针的荧光反应。同时采用流式细胞术和电镜分析对Ana-1细胞识别C_10-HSL的敏感性进行了验证,为构建基于Ana-1细胞的淡水鱼腐败菌信号分子C_10-HSL的荧光传感检测方法提供了前期研究基础。(本文来源于《食品工业科技》期刊2017年24期）
高丝氨酸论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:为进一步提高酶法合成蛋氨酸的产量,从平菇中克隆获得蛋氨酸酶法合成的备选基因。方法:提取平菇菌丝球总RNA作为模板,通过反转录PCR获得高丝氨酸乙酰基转移酶基因(homoserine acetyltransferase gene,hta),利用酶切连接法构建含hta基因的表达载体pET32a-hta,转化至大肠杆菌BL21诱导表达并对诱导条件进行优化,同时,将表达载体pET32a-hta和pET22b-hta分别转入大肠杆菌工程菌Rosetta、Origami B和Rosetta gami plysS,探究该酶在不同载体及宿主组合中的表达情况。结果:经ExPAS-ProtParam tool、PSIPRED、SWISS-MODEL等软件分析表明,hta基因编码的多肽由445个氨基酸组成,等电点为5.93,二级结构主要有螺旋、无规则卷曲和延伸链。SDS-PAGE分析表明,IPTG终浓度为0.2 mmol/L,诱导温度为25℃,诱导时间为16 h时,工程菌BL21/pET32a-hta的可溶性高丝氨酸乙酰基转移酶(HTA)表达量最高。HPLC结果表明,当表达载体为pET32a-hta,表达宿主为Rosetta时,工程菌Rosetta/pET32a-hta诱导表达的HTA比活力最高为2.2 mU/mg。结论:经诱导条件和表达系统优化后,HTA的表达量提高且比活力增强,为进一步大规模生产蛋氨酸打下基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
高丝氨酸论文参考文献
[1].解银萍,王滢秀,董文凯,柴洪伟.柱前手性衍生化HPLC法拆分D,L-高丝氨酸内酯盐酸盐[J].精细化工中间体.2019
[2].左泽红,魏韬,郭丽琼,林俊芳,张中浩.平菇高丝氨酸乙酰基转移酶基因的克隆及异源表达优化[J].食品工业科技.2019
[3].黄瑾辉,胡熠,顾岩岭,史亚慧.SPE前处理-UHPLC-MS/MS测定MBR中两种N-酰基高丝氨酸内酯[J].湖南大学学报(自然科学版).2018
[4].罗梦,易皓,陈静,张文哲,韩云平.高效液相串联质谱法检定活性污泥中N-高丝氨酸内酯[J].环境化学.2019
[5].刘诗梦,韩彩静,高云娜,赵兰,卢红妍.蛋氨酸特异性合成途径关键酶——高丝氨酸O-酰基转移酶的研究进展[J].食品科学.2019
[6].解银萍,王滢秀,董文凯,柴洪伟.FMOC-Cl柱前衍生高效液相色谱法测定L-高丝氨酸内酯盐酸盐[J].山东化工.2018
[7].杨华青,吴一平,尹胜,王成涛,孙宝国.酿酒酵母O-酰基高丝氨酸硫解酶的原核表达及其催化蛋氨酸合成的研究[C].益生菌：技术及产业化——第十叁届益生菌与健康国际研讨会摘要集.2018
[8].靖宪月.高丝氨酸内酯信号分子影响电活性生物膜产电呼吸的效果与机制[D].福建农林大学.2018
[9].郭沐晗,廖建萌,孙力军,王雅玲,房志家.高效液相色谱-串联质谱法检测副溶血弧菌生物被膜形成过程中的N-酰基高丝氨酸内酯信号分子[J].食品工业科技.2018
[10].蒋栋磊,刘延,葛攀玮,吴满刚,葛庆丰.酰化高丝氨酸内酯对巨噬细胞模型影响初探[J].食品工业科技.2017
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