黄沙鳖抗菌肽cathelicidin基因克隆及表达特征分析

论文摘要

【目的】克隆黄沙鳖cathelicidin基因并分析其组织分布特征及在攻毒后的表达变化,为深入研究cathelicidin功能及在黄沙鳖先天免疫中的潜在作用提供基础数据。【方法】采用RT-PCR结合RACE克隆黄沙鳖cathelicidin基因cDNA全长序列,利用生物信息学分析软件对黄沙鳖cathelicidin基因及其推导氨基酸序列进行结构特征分析,并采用实时荧光定量PCR检测黄沙鳖cathelicidin基因在不同组织中的表达特征及攻毒后的表达变化。【结果】黄沙鳖cathelicidin基因cDNA序列全长1026 bp（GenBank登录号MK250818）,包括483 bp的开放阅读框（ORF）、315 bp的5’非编码区（5’UTR）和228 bp的3’非编码区（3’UTR）。黄沙鳖cathelicidin基因c DNA序列编码160个氨基酸,包括氨基端的信号肽区域、含有4个保守半胱氨酸（Cys）残基的cathelin区域及羧基端的成熟肽区域。黄沙鳖cathelicidin基因推导氨基酸序列与中华鳖cathelicidin基因推导氨基酸序列（KY948708.1）的相似性最高,为97.5%;基于cathelicidin基因推导氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示黄沙鳖与中华鳖的亲缘关系最近。黄沙鳖cathelicidin基因在脾脏和肝脏中的相对表达量相对较高,其次是心脏,在脑组织、肾脏、肠道、肌肉、表皮和背甲的相对表达量较低。以温和气单胞菌攻毒后,黄沙鳖脾脏cathelicidin基因相对表达量呈升—降—升—降的波动变化趋势,出现2个峰值（攻毒后第3和36 h）,对应的cathelicidin基因相对表达量分别是对照（注射等量无菌生理盐水）的23.1和3.5倍。【结论】黄沙鳖cathelicidin基因在脾脏和肝脏中高表达量,且可被温和气单胞菌感染诱导,说明cathelicidin基因在黄沙鳖抵抗病原感染过程中发挥重要作用。

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 RNA提取及cDNA合成
•   1.3 黄沙鳖cathelicidin基因克隆
•   1.4 生物信息学分析
•   1.5 黄沙鳖cathelicidin基因组织分布特征及攻毒后的表达变化
•     1.5.1 黄沙鳖cathelicidin基因的组织分布特征
•     1.5.2 黄沙鳖cathelicidin基因攻毒后的表达变化
• 2 结果与分析
•   2.1 黄沙鳖cathelicidin基因克隆及序列分析结果
•   2.2 黄沙鳖cathelicidin基因在不同组织中的表达情况
•   2.3 黄沙鳖cathelicidin基因在攻毒后的表达模式
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 马沙,盛雪晴,许飘尹,贺晓晨,黎姗梅,韦汉英,韦慕兰,黄立春,梁静真,黄钧

关键词: 黄沙鳖,抗菌肽,基因克隆,表达特征

来源: 南方农业学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,水产和渔业

单位: 广西大学动物科学技术学院/广西水生动物病害诊断实验室,广西水产技术推广总站,大化县水产管理站,都安县水产技术推广站,南宁市水产畜牧兽医技术推广站

基金: 广西自然科学基金项目（2015GXNSFBA139063,2018GXNSFAA138167）,广西水产畜牧兽医局水产养殖动物病情测报专项（桂渔牧财〔2017〕23号）

分类号: S947.1;Q78

页码: 1605-1612

总页数: 8

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