鸭瘟病毒、鹅细小病毒和番鸭细小病毒三重PCR检测方法的建立

论文摘要

为建立鉴别鸭瘟病毒（DPV）、鹅细小病毒（GPV）和番鸭细小病毒（MDPV）的多重PCR检测方法,参考文献合成针对DPV UL6基因、GPV NS基因和MDPV VP1基因序列的特异性引物。通过优化多重PCR反应中的引物浓度和退火温度,建立快速鉴别3种病毒的多重PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行检验。结果显示,该方法对禽流感病毒、新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭源巴氏杆菌、鸭疫里氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性,表明特异性较强;DPV、GPV和MDPV的最低核酸检出量分别为237.3 pg、22.45 pg和204.6 pg,表明敏感性良好;该方法对DPV+GPV+MDPV、DPV+GPV、DPV+MDPV、GPV+MDPV、DPV、GPV和MDPV的核酸均能扩增出与预期大小一致的目的条带,表明该多重PCR方法重复性较好。本研究方法具有特异性强、敏感性良好、重复性较好和快速简便等特点,可用于DPV、GPV和MDPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 毒株
•   1.2 主要试剂
•   1.3 引物
•   1.4 病毒增殖
•   1.5 病毒DNA 的提取
•   1.6 单重PCR检测及产物鉴定
•   1.7 多重PCR方法的建立及条件优化
•   1.8 特异性试验
•   1.9 敏感性试验
•   1.10 多重PCR方法的重复性
• 2 结果
•   2.1 单重PCR检测及产物鉴定
•   2.2 多重PCR方法的建立及条件优化
•   2.3 特异性试验
•   2.4 敏感性试验
•   2.5 多重PCR方法的重复性
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 饶体宇,张益,鲜思美,包细明,李婷,吴伯梅,张友,吴专伟,彭庆波

关键词: 鸭瘟病毒,鹅细小病毒,番鸭细小病毒,多重

来源: 畜牧与兽医 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 贵州大学动物科学学院,贵州省动物疫病研究所

基金: 贵州省农业攻关项目[黔科合支撑(2016)2506号],贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目[黔科合人才团队(2015)4016号],贵州大学大学生创新创业训练计划项目[贵大国创字(2018)014号]

分类号: S852.65

页码: 85-89

总页数: 5

文件大小: 496K

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