牡蛎酶解工艺优化及其酶解产物对小鼠睾酮分泌的影响

论文摘要

【目的】优化太平洋牡蛎(Crassostreagigas)酶解工艺条件,并研究酶解产物及其超滤组分对体外培养的睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【方法】以多肽得率为参考标准,对木瓜蛋白酶酶解牡蛎的加酶量、初始pH、酶解时间、酶解温度进行单因素及正交实验优化;通过MTT法及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度牡蛎酶解产物及其超滤组分对TM3小鼠睾丸间质细胞增殖及睾酮分泌的影响。【结果】木瓜蛋白酶最佳酶解条件为加酶量3 000 U/g,初始pH 6. 5,酶解温度62.5℃,酶解时间4.5 h,在此条件下其多肽质量浓度为14.95 mg/mL;牡蛎酶解液及其超滤组分在0.25～1.00 mg/mL质量浓度范围内,与空白对照组相比,能够显著增加TM3细胞的增殖活性(P<0.05),且具有浓度依赖性和时间依赖性。其中,<5 ku和5～10 ku超滤组分细胞增殖活性及促进睾酮分泌活性均最强。【结论】牡蛎酶解产物及其超滤组分可有效增强小鼠睾丸间质细胞增殖活性并促进其分泌睾酮。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 木瓜蛋白酶酶解牡蛎单因素条件选择
•     1.3.2 正交实验设计
•     1.3.3 多肽含量的测定
•     1.3.4 牡蛎酶解产物的制备流程
•     1.3.5 超滤分级
•     1.3.6 MTT法检测牡蛎酶解产物及其超滤组分对TM3细胞体外增殖的影响
•     1.3.7 酶联免疫吸附实验 （ELISA） 检测睾酮含量
•   1.4 统计分析
• 2 结果与分析
•   2.1 木瓜蛋白酶酶解条件的确定
•     2.1.1 加酶量对酶解效果的影响
•     2.1.2 初始p H对酶解效果的影响
•     2.1.3 酶解温度对酶解效果的影响
•     2.1.4 酶解时间对酶解效果的影响
•     2.1.5 正交实验结果
•   2.2 牡蛎酶解产物及其超滤组分对TM3细胞体外增殖的影响
•   2.3 酶联免疫吸附实验 （ELISA） 检测睾酮含量
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张雪妍,秦小明,高加龙,林海生,章超桦,黄艳球

关键词: 牡蛎,酶解产物,小鼠睾丸间质细胞,增殖活性,睾酮

来源: 广东海洋大学学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 广东海洋大学食品科技学院,广东省水产品加工与安全重点实验室,广东普通高等学校水产品深加工重点实验室,国家贝类加工技术研发分中心(湛江)

基金: 贝类产业技术体系(CARS-49),广东省应用型科技研发专项资金项目(2016B020235002)

分类号: TS254.1

页码: 96-102

总页数: 7

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