全文摘要
本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种具有保水抗旱功能的生物有机肥及其制备方法。所述生物有机肥包含枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3；所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3保藏编号为CGMCCNo.11966。该菌株在干旱环境中不但具有较强的定殖能力，而且还能显著提高林木在干旱环境中的成率，促进林木的生长。本发明保水抗旱生物有机肥以含有枯草芽孢杆菌GE3的固体抗旱菌剂、发酵水洗牛粪为主要成分，添加少量的保水剂，各成分相互作用，可极大促进林木在干旱环境中的生长，提高了林木抗干旱胁迫能力，提高了林木在干旱环境中的成活率。
主设计要求
1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3，其特征在于，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.11966。
设计方案
1.一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3，其特征在于，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.11966。
2.权利要求1所述枯草芽孢杆菌在提高植物抗旱能力中的应用，其特征在于，所述植物为接骨木、金银花。
3.一种抗旱菌剂，其特征在于，由活化腐殖酸和包含权利要求1所述枯草芽孢杆菌的微生物发酵液混合而成。
4.根据权利要求3所述的一种抗旱菌剂，其特征在于，由活化腐殖酸和包含枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3的微生物发酵液按料液比5：1～2W\/V混合而成，所述W\/V为kg\/L；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3保藏编号为CGMCC No.11966；所述抗旱菌剂有效活菌数≥1×10 9<\/sup>cfu\/g。
5.根据权利要求3或4所述的一种抗旱菌剂，其特征在于，所述活化腐殖酸的制备方法为将褐煤腐殖酸原料和20～25％的硝酸按照2:1的比例混合反应20～40min，离心掉硝酸溶液，然后加入自来水，离心，反复操作，至离心液pH>5.5，烘干。
6.一种保水抗旱生物有机肥，其特征在于，由抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1～0.2：20组成；
所述抗旱菌剂由活化腐殖酸和包含枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3的微生物发酵液按料液比5：1～2W\/V混合而成，所述W\/V为kg\/L；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3，保藏编号为CGMCC No.11966；所述保水抗旱生物有机肥含总有效活菌数≥0.3×10 8<\/sup>cfu\/g；
制备方法为：
将抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1～0.2：20的比例投入混合机中充分混合，得到混合物，将混合物粉碎；
将粉碎好的物料投入挤压造粒机中制粒，将柱状颗粒投入烘干机中，烘干温度控制在50℃以下，烘干至含水量≤15％，再冷却后筛分包装，即得。
7.根据权利要求6所述的一种保水抗旱生物有机肥，其特征在于，所述发酵水洗牛粪的制作方法为：采用条垛发酵的方式将水洗牛粪原料进行腐熟，条垛堆高>1m，宽>3m,长度>20m，待堆体温度升高后进行翻堆，发酵时间为7～15d，腐熟风干后粉碎过1～2mm筛，即得。
8.权利要求6或7所述的一种保水抗旱生物有机肥在植物造林中的应用，所述植物为金银花。
设计说明书
技术领域
本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种具有保水抗旱功能的生物有机肥及其制备方法。
背景技术
生物有机肥是指特定功能微生物与主要以动植物残体(如畜禽粪便、农作物秸秆等)为来源并经无害化处理、腐熟的有机物料复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。然而，大量研究表明：功能微生物和作物的互作关系往往并不稳定，这种不稳定性源于不同环境条件对微生物生长造成影响，从而制约其效果。这就要求微生物肥料中的功能微生物适应外在环境，才能更好的发挥其功效。
干旱严重威胁到植物的生长、发育和繁殖。干旱问题也成为全球的普遍问题。全球干旱半干旱地区的面积约占陆地面积的35％，我国的干旱半干旱地区，地域辽阔，涉及东北、西北、华北的12个省、市自治区，面积约占全国总面积的52.5％。干旱生境中，大量微生物不能成功定殖成活，导致土壤细菌数量大幅减少，群落结构多样性明显降低，从而影响植物根际土壤生长环境，影响植物正常的水分和养分吸收，降低植物的抗旱能力。这就需要生物有机肥料中的微生物适应干旱逆境才能更好的发挥微生物肥料的功效。
本发明人已从核桃根际土样中筛选出了一株核桃根际促生乙酸钙不动杆菌X128，保藏编号为CGMCC No.7071，能明显促进核桃生长发育，改善核桃根际土壤的生长环境。该菌株及其应用已获国家发明专利授权(CNCN103060241B)。针对干旱逆境，本发明人还筛选到一株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)L90，该菌株也已获发明专利保护(CN103667132B)。
然而，自然界中微生物资源丰富多样，进一步挖掘适应干旱逆境的微生物资源，对于微生物肥料在干旱逆境中的应用，提高林木干旱耐受性具有重要意义。
发明内容
针对背景技术中涉及的问题，本发明提供了一种具有保水抗旱功能的生物有机肥及其制备方法。本发明所述具有保水抗旱功能的生物有机肥含有枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3，该菌株不但可适用于干旱环境，提高苗木的干旱耐受性；而且该菌株还可显著增加生物有机肥的稳定性，使有机肥肥力持久。
本发明采用以下技术方案：
本发明第一个方面，提供一种枯草芽孢杆菌，该菌株分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.11966。
所述植物根际促生细菌的菌落特征为：GE3菌株在LB培养基上菌落呈圆形不规则，培养24h菌落大小约为5mm，表面干燥无光泽边缘不整齐，菌落呈棕黄色且中间颜色较深，不透明，有芽孢。
本发明第二个方面，提供以上所述枯草芽孢杆菌在提高植物抗旱能力中的应用。
进一步地，所述植物为林木，优选的为接骨木或金银花。
本发明枯草芽孢杆菌作用于林木土壤中，可显著促进接骨木、金银花等林木的生长及抗旱性能。
本发明第三个方面，提供一种抗旱固体菌剂，由活化腐殖酸和枯草芽孢杆菌的微生物发酵液混合而成；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3保藏编号为CGMCCNo.11966；所述抗旱固体菌剂有效活菌数≥1×10 9<\/sup>cfu\/g。
进一步地，所述抗旱固体菌剂由活化腐殖酸和包含枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3的微生物发酵液按料液比5：1～2W\/V混合而成；所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3保藏编号为CGMCC No.11966。
进一步地，所述活化腐殖酸的制备方法为将褐煤腐殖酸原料和20～25％的硝酸按照2:1的比例混合反应20～40min，离心掉硝酸溶液，然后加入自来水，离心，反复操作，至离心液pH>5.5，烘干。
本发明发现，利用以上所述的腐殖酸与枯草芽孢杆菌GE3混合，不但可有效吸附菌体，有利于菌体与其它成分的混合均匀，而且还可保护枯草芽孢杆菌GE3的活力，防止造粒对菌体活力的损害，并且可在干旱的土壤环境中，可更好地促进枯草芽孢杆菌GE3的定殖和繁殖。采用本发明方法制备得到的活化腐殖酸作为枯草芽孢杆菌GE3的吸附载体，效果最佳。
本发明第四个方面，提供一种保水抗旱生物有机肥，包含枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3保藏编号为CGMCC No.11966。
进一步地，所述保水抗旱生物有机肥由固体抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1～0.2：20组成；所述固体抗旱菌剂由活化腐殖酸和包含枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3的微生物发酵液按料液比5：1～2W\/V混合而成；所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3保藏编号为CGMCC No.11966；优选的，所述发酵水洗牛粪的制作方法为：采用条垛发酵的方式将水洗牛粪原料进行腐熟，条垛堆高>1m，宽大于3m，长度>20m，待堆体温度升高后进行翻堆，发酵时间为7～15d，腐熟风干后粉碎过1～2mm筛，即得；优选的，抗旱生物有机肥含总有效活菌数≥0.3×10 8<\/sup>cfu\/g。
本发明保水抗旱有机肥，以含有枯草芽孢杆菌GE3的固体抗旱菌剂和发酵水洗牛粪作为主要成分，并配合少量的保水剂，各成分共同作用，可显著提高土壤的肥力，有效促进林木的生长和抗旱能力，肥力持久，长期使用可改善土壤环境。
本发明第五个方面，提供以上所述保水抗旱生物有机肥的制备方法，将固体抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1～0.2：20的比例投入混合机中充分混合，得到混合物，将混合物粉碎；将粉碎好的物料投入挤压造粒机中制粒，将柱状颗粒投入烘干机中，烘干温度控制在50℃以下，烘干至含水量≤15％，再冷却后筛分包装，即得。
本发明保水抗旱生物有机肥的制备方法将烘干温度控制在50℃以下，水分含量≤15％，有利于减少了高温、干燥对枯草芽孢杆菌GE3等微生物活力的影响，本发明生物有机肥制备方法简单，易于规模化生产。
本发明第六个方面，提供以上所述保水抗旱生物有机肥在植树造林中的应用。沙漠化、干旱环境，是植树造林面临的主要难题；而本发明保水抗旱生物有机肥可极大促进林木在干旱环境中的生长，提高了林木抗干旱胁迫能力，提高了林木在干旱环境中的成活率。
本发明取得的有益效果：
本发明提供了一株极具抗干旱能力的枯草芽孢杆菌GE3，该菌株在干旱环境中不但具有较强的定殖能力，而且还能显著提高林木在干旱环境中的成率，促进林木的生长。
本发明方法制备得到的活化腐殖酸作为枯草芽孢杆菌GE3的吸附载体，不但可有效吸附菌体，有利于菌体与其它成分的混合均匀，而且还可保护枯草芽孢杆菌GE3的活力，防止造粒对菌体活力的损害，并且可在干旱的土壤环境中，可更好地促进枯草芽孢杆菌GE3的定殖和繁殖。
本发明保水抗旱生物有机肥以含有枯草芽孢杆菌GE3的固体抗旱菌剂、发酵水洗牛粪为主要成分，添加少量的保水剂，各成分相互作用，可极大促进林木在干旱环境中的生长，提高了林木抗干旱胁迫能力，提高了林木在干旱环境中的成活率。本发明生物有机肥不但有效利用了牛粪资源，提高了农业废弃物的利用率；而且对于林木造林意义重大。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3菌落特征图。
本发明筛选得到的菌株分类命名为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)GE3，已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.11966，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和\/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和\/或它们的组合。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3鉴定
本公开枯草芽孢杆菌为本申请人筛选所得。
所述植物根际促生细菌的菌落特征为：GE3菌株在LB培养基上菌落呈圆形不规则，培养24h菌落大小约为5mm，表面干燥无光泽边缘不整齐，菌落呈棕黄色且中间颜色较深，不透明，有芽孢。
将GE3的16S rRNA基因序列与数Genbank据库中的序列进行BLAST比对分析，结果表明：GE3与Bacillus subtilis同处于一个最小的分支，进化距离最近DZ1的16SrRNA基因序列与Bacillus subtilis(AJ276351)的相似性达98.92％。综合生理生化特征和菌落形态特征，将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3用灭菌牙签接种于脱脂奶粉培养基平板上，37℃培养2d后，可产生透明圈。经测量与计算，透明圈直径为9.73mm，菌落直径为17.08mm，透明圈与菌落比达1.76。
枯草芽孢杆菌GE3具体的16S rDNA序列如下：
gcggctggctcctaaaaggttacctcaccgacttcgggtgttacaaactctcgtggtgtgacgggcggtgtgtacaaggcccgggaacgtattcaccgcggcatgctgatccgcgattactagcgattccagcttcacgcagtcgagttgcagactgcgatccgaactgagaacagatttgtgggattggcttaacctcgcggtttcgctgccctttgttctgtccattgtagcacgtgtgtagcccaggtcataaggggcatgatgatttgacgtcatccccaccttcctccggtttgtcaccggcagtcaccttagagtgcccaactgaatgctggcaactaagatcaagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtcactctgcccccgaaggggacgtcctatctctaggattgtcagaggatgtcaagacctggtaaggttcttcgcgttgcttcgaattaaaccacatgctccaccgcttgtgcgggcccccgtcaattcctttgagtttcagtcttgcgaccgtactccccaggcggagtgcttaatgcgttagctgcagcactaaggggcggaaaccccctaacacttagcactcatcgtttacgg cgtggactaccagggtatctaatcctgttcgctccccacgctttcgctcctcagcgtcagttacagaccagagagtcgccttcgccactggtgttcctccacatctctacgcatttcaccgctacacgtggaattccactctcctcttctgcactcaagttccccagtttccaatgaccctccccggttgagccgggggctttcacatcagacttaagaaaccgcctgcgagccctttacgcccaataattccggacaacgcttgccacctacgtattaccgcggctgctggcacgtagttagccgtggctttctggttaggtaccgtcaaggtaccgccctattcgaacggtacttgttcttccctaacaacagagctttacgatccgaaaaccttcatcactcacgcggcgttgctccgtcagactttcgtccattgcggaagattccctactgctgcctcccgtaggagtctgggccgtgtctcagtcccagtgtggccgatcaccctctcaggtcggctacgcatcgttgccttggtgagccgttacctcaccaactagctaatgcgccgcgggtccatctgtaagtggtagccgaagccaccttttatgtttgaaccatgcggttcaaacaaccatccggtattagccccggtttcccggagttatcccagtcttacaggcaggttacccacgtgttactcacccgtccgccgctaacatcagggagcaagctcccatctgtccgctcgactgca。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3生理生化特征如下表1所示。
表1 GE3菌株生理生化特征
所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3产蛋白酶测定结果如下表2所示。
表2 GE3菌株蛋白酶活力测定
实施例2一种抗旱固体菌剂
所述抗旱固体菌剂的制备方法为：
(1)活化腐殖酸的制备方法为将褐煤腐殖酸原料和20～25％的硝酸按照2:1的比例混合反应40min，离心掉硝酸溶液，然后加入自来水，离心，反复操作，至离心液pH>5.5，烘干。
(2)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3发酵液的制备：
①试管种子培养
种子培养基：牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，氯化钠0.5％，pH7.0～7.2。
将枯草芽孢杆菌G3接种到培养基上，30～35℃恒温培养，获得试管种。
②液体发酵培养
液体发酵培养基配方为：蔗糖3％，酵母膏2％，K2<\/sub>HPO4<\/sub>0.10％，MgSO4<\/sub>·7H2<\/sub>O0.01％，CaCl2<\/sub> 0.01％，pH 6.5-7.0，余量为水。
将枯草芽孢杆菌G3试管种子分别接种到液体培养基中，接种量分别为液体培养基体积的8％，于30～35℃摇床培养，培养后得枯草芽孢杆菌G3发酵液。
(3)将制备得到的活化腐殖酸和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3发酵液按料液比5：1kg\/L混合即得。
所述抗旱固体菌剂有效活菌数≥1×109<\/sup>cfu\/g。
将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3发酵液按照5：1kg\/L的比例分别接种到灭菌后的活化腐殖酸、褐煤腐殖酸原料、草炭和鸡粪中。自然条件下风干，30d后测定不同有机材料中的有效活菌数，具体结果如下表3所示。
表3枯草芽孢杆菌GE3在不同载体中活菌数的测定
由上述表3可以看出，自然风干条件下，活化腐殖酸中的枯草芽孢杆菌GE3有效活菌数最高，适宜GE3的生长。
实施例3一种保水抗旱生物有机肥
所述保水抗旱生物有机肥由固体抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1：20组成；所述固体抗旱菌剂由活化腐殖酸和包含枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)GE3的微生物发酵液按料液比5:1kg\/L混合而成。
所述抗旱生物有机肥含总有效活菌数≥0.3×108<\/sup>cfu\/g。
所述保水抗旱生物有机肥的制备方法：
(1)述发酵水洗牛粪的制作方法为：采用条垛发酵的方式将水洗牛粪原料进行腐熟，条垛堆高>1m，宽大于3m，长度>20m，待堆体温度升高后进行翻堆，发酵时间为7～15d，腐熟风干后粉碎过1～2mm筛，即得。
(2)固体抗旱菌剂的制备：制备方法同实施例2。
(3)将固体抗旱菌剂、保水剂和发酵水洗牛粪按照质量比1：0.1：20的比例投入混合机中充分混合，得到混合物，将混合物粉碎；将粉碎好的物料投入挤压造粒机中制粒，将柱状颗粒投入烘干机中，烘干温度控制在50℃以下，烘干至含水量≤15％，再冷却后筛分包装，即得。
试验例1枯草芽孢杆菌GE3菌对林木生长及抗旱性能的影响
将枯草芽孢杆菌GE3、蜡样芽孢杆菌Z77、阿氏芽孢杆菌BPR078、纺锤芽孢杆菌L13、枯草芽孢杆菌DZ1分别接入牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，氯化钠0.5％，琼脂2％，pH 7.0-7.2，以上均为质量百分比)，于37℃，180rpm条件下振荡培养2d。发酵液6000r min -1<\/sup>下离心5min，用无菌生理盐水润洗菌体3次后，无菌生理盐水调节菌悬液(5×108<\/sup>cfu\/ml)制成接种剂。盆栽用盆高25cm，宽30cm，每盆装土12kg，选择基本一致的接骨木容器苗，定殖。30d后，取配置好的5种不同菌液10ml，稀释至100ml，分别均匀浇灌于接骨木苗根系周围，同时设置浇灌等量无菌生理盐水试验。接骨木浇透水后不再浇水，干旱30天后测定接骨木生长状况、叶片相对电导率及叶片相对含水量。以不接种任何菌剂的盆栽作为空白对照(CK)。
所述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)Z77，为本申请人前期筛选所得，已于2012年12月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.7070，记载在中国专利“一株蜡样芽孢杆菌及其在提高植物抗旱能力中的应用”(CN103667132A)中。
阿氏芽孢杆菌BPR078为本申请人前期筛选所得，已于2012年12月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.11971。
所述纺锤芽孢杆菌L13，为本申请前期筛选所得，保藏编号为CGMCCNo.7068，该菌株及其应用已获国家发明专利授权，专利授权号：2013100166040。
枯草芽孢杆菌DZ1保藏编号为CGMCC No.5318，2011年10月14日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏。枯草芽孢杆菌DZ1为前期本申请人从冬枣根际土壤中筛选出的根际促生菌，该菌株相关专利已获得授权(专利号为：201110376966.1)
试验结果如下表4所示。
表4 GE3菌液对林木生长及抗旱性能的影响
由上述表4可知，本发明枯草芽孢杆菌GE3对促进林木生长、提高林木的抗旱性能显著高于现有根际促生菌，并且显著高于同菌种的枯草芽孢杆菌DZ1菌株。
试验例2抗旱生物有机肥对造林效果的影响
抗旱生物有机肥造林试验安排在莱芜市莱城区苗山镇北苗山村的牛旺泉北山。造林苗木选用金银花苗。施用抗旱生物有机肥(实验组，实施例3保水抗旱生物有机肥)，鸡粪有机肥作为对照(对照组)，不施用任何肥料作为空白(空白组)。批量挖好树穴后，将抗旱生物有机肥与回填土按照1:1比例混匀，回填到造林树穴中。造林当天浇水一次，后期不在浇水。调查造林当年调查成活率，并于翌年调查存活率和干重，结果如表5所示。
表5不同处理侧柏的生长、成活率及保存率
由上述表5可以看出，同对照组和空白相比，抗旱生物有机肥处理金银花的干重显著增加17.38％和20.68％，且金银花的造林成活率和保存率均有不同程度的提高。因此，在干旱环境中，抗旱生物有机肥在提高造林成活率方面具有积极作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东省林业科学研究院
<120> 一种具有保水抗旱功能的生物有机肥及其制备方法
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1417
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
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设计图
相关信息详情
申请码:申请号:CN201910011668.9
申请日:2019-01-07
公开号:CN109679870A
公开日:2019-04-26
国家:CN
国家/省市:88(济南)
授权编号:CN109679870B
授权时间:20191029
主分类号:C12N 1/20
专利分类号:C12N1/20;C05G3/04;C05F11/08;C12R1/125
范畴分类:18H;
申请人:山东省林业科学研究院
第一申请人:山东省林业科学研究院
申请人地址:250014 山东省济南市文化东路42号
发明人:刘幸红;马海林;刘方春;丁延芹;杜秉海;刘丙花;马丙尧;杜振宇;彭琳;李丽;井大炜;吕雷昌;张文馨
第一发明人:刘幸红
当前权利人:山东省林业科学研究院
代理人:王志坤
代理机构:37221
代理机构编号:济南圣达知识产权代理有限公司
优先权:关键词:当前状态:审核中
类型名称:外观设计