硫酸盐转运蛋白论文-张晶晶

硫酸盐转运蛋白论文-张晶晶

导读:本文包含了硫酸盐转运蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:茶树,硒,硫酸盐转运蛋白,表达分析

硫酸盐转运蛋白论文文献综述

张晶晶[1](2018)在《茶树硫酸盐转运蛋白基因对硒的响应及CsSULTR3.5功能分析》一文中研究指出硒的丰缺与人体健康密切相关,硒缺乏或过量都会对机体产生不利影响。人类饮食中大部分的硒是直接或间接从植物中获得的,植物可食用部分硒含量的高低直接影响人体膳食的硒摄入水平。在世界范围内,缺硒现象十分普遍。茶树具有较强的富硒能力,是理想的补硒资源。深入研究茶树对硒的吸收和转运机制,对于茶树硒生物强化和遗传改良具有重要意义。本研究基于茶树基因组和转录组测序结果,从中筛选出硫酸盐转运蛋白基因家族的多条EST序列,利用RT-PCR克隆获得了8个茶树硫酸盐转运蛋白基因的cDNA序列。利用实时荧光定量PCR技术研究了CsSULTRs在不同硒/硫处理条件下的表达变化及其在茶树不同组织的表达情况,探讨了茶树CsSULTRs对硒的响应机理。并对CsSULTR3.5进行了功能初步分析。主要研究结果如下:1.生物信息学分析表明,CsSULTRs都含有硫酸盐转运蛋白典型的SLC26A/SulP transporter结构域和STAS结构域。根据与其他物种SULTR同源性远近,将克隆获得的CsSULTRs分别命名为CsSULTR1.1(GenBank登录号:KY963791)、CsSULTR1.2(GenBank登录号:KY963792)、CsSULTR2.1(GenBank登录号:KY977431)、CsSULTR3.1(GenBank登录号:KY963793)、CsSULTR3.2(GenBank登录号:KY977432)、CsSULTR3.3(GenBank登录号:MF596178)、CsSULTR3.5(GenBank登录号:MG792805)、CsSULTR4.1(GenBank登录号:KY963794)。2.qRT-PCR研究结果表明,茶树中的CsSULTRs对不同SeO_4~(2-)/SO_4~(2-)处理的响应模式不同。其中,根中的CsSULTR1.1受短时缺硫诱导显着上调表达,根中的CsSULTR1.2对加硒处理有特异性响应;而茎中的CsSULTR2.1及第3亚家族的4个成员均受缺硫处理及加硒处理诱导;CsSULTR4.1的表达则不受外界SO_4~(2-)/SeO_4~(2-)供应水平的影响。3.组织表达特异性分析结果表明,CsSULTRs在茶树的地上部和地下部、营养器官和生殖器官中均有表达。其中,在幼龄茶树中,CsSULTR1.1和CsSULTR1.2主要在根中表达;CsSULTR2.1以及第3亚家族的4个成员均在茎中高表达;CsSULTR4.1主要在茎和叶中表达。而成年茶树中,CsSULTR1.2在茎中高表达;CsSULTR2.1在花中的表达量最高;CsSULTR4.1主要在生殖器官(花和果)中的表达。此外,研究发现,CsSULTR3.5在各组织的表达丰度较其他基因高。4.构建CsSULTR3.5-GFP融合表达载体,瞬时转化水稻原生质体,通过激光扫描共聚焦观察发现CsSULTR3.5定位于细胞质膜。克隆获得CsSULTR3.5基因起始密码子(ATG)上游2 516 bp的启动子序列,顺式作用元件预测显示该区域存在多种激素响应元件、光响应元件、胁迫应答元件以及结合位点,表明该基因的表达受多种因素调控。对不同生长阶段的pCsSULTR3.5::GUS转基因拟南芥进行GUS染色,研究发现,除种子和子叶外,转基因株系各部位都有GUS活性,其中维管组织中的GUS活性最高。CsSULTR3.5过表达转基因拟南芥在不同硒/硫处理条件下的表型均与野生型拟南芥无显着差异。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2018-05-01)

张晶晶,钱文俊,郝心愿,王璐,丁长庆[2](2018)在《茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSULTR3.1的克隆及其对硫和硒的响应分析》一文中研究指出从茶树(Camellia sinensis)根系中克隆获得1条长度为1 999 bp的核酸序列,该序列包含1 980 bp的开放阅读框(ORF),编码659个氨基酸。BlastX同源性比对显示,该基因编码的氨基酸序列与葡萄VvSULTR3.1相似度最高(86%),将其命名为CsSULTR3.1(GenBank登录号:KY963793)。进一步分析显示,该基因编码的蛋白分子量为72.39 kD,理论等电点为7.61,属于非分泌性蛋白,包含10个跨膜结构域。以GFP作为标记进行亚细胞定位发现,该蛋白定位于细胞质中。qRT-PCR分析显示,CsSULTR3.1具有组织表达特异性,在茶树茎中表达量最高。CsSULTR3.1在茶树根系中的表达受Na_2SO_4和Na_2SeO_4诱导:60 mg·L~(-1) Na_2SO_4处理12 h后逐渐上调表达,在48 h时达到最大值,而240 mg·L-1Na_2SO_4处理12 h内显着下调表达,随后显着上调并维持相对稳定状态;在不同浓度Na_2SeO_4处理条件下表达量均呈现先降低后升高再降低的趋势,且均在48 h时达到最高。(本文来源于《园艺学报》期刊2018年02期)

胡玉荣,岳川,周超,黄玉婷,曹红利[3](2015)在《茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSUL3.5的克隆与表达分析》一文中研究指出采用电子克隆与RT-PCR相结合的方法获得茶树硫酸盐转运蛋白(CsSUL3.5)的cDNA序列,并进行了相关生物信息学分析。克隆到茶树CsSUL3.5 cDNA序列2 017 bp(GenBank登录号KP984500),包含完整的开放阅读框(ORF)1914 bp,编码637个氨基酸。生物信息学分析显示,CsSUL3.5编码的蛋白分子量为70.38 kD,无信号肽,是疏水性的非分泌蛋白,有11个跨膜区;与其他物种相似性均在60%以上,与烟草的相似性最高(74%),具有硫酸盐转运蛋白家族典型的保守结构域和空间结构,属于硫酸盐转运蛋白家族。系统进化分析表明茶树的CsSUL3.5属于第3亚家族,与芝麻的关系比较近。荧光定量PCR表明该基因在茶树幼苗根与成熟叶中均有表达;Na_2SO_4与Na_2SeO_4处理均能显着诱导CsSUL3.5的表达。(本文来源于《园艺学报》期刊2015年11期)

董婷[4](2010)在《水稻硫酸盐转运蛋白OsSultr1;1基因功能的研究》一文中研究指出硫是植物生长必需的中量营养元素,主要以SO42-形式被植物根系从土壤中吸收,参与含硫氨基酸、蛋白质、维生素和多种次级代谢产物的合成,并对植物的生长、解毒、防卫和应对各种生物及非生物胁迫方面起重要调节作用。植物依靠根细胞质膜上的质子/硫酸盐协同运输体来吸收土壤中的硫酸盐,这是硫酸盐吸收的第一步,是由第一亚族的高亲和性硫转运体介导完成的。水稻是全世界最重要的粮食作物之一,也是我国的主要粮食作物。随着分子生物学技术的飞速发展和水稻基因组测序的完成,水稻成了单子叶植物基因组研究的模式植物。研究水稻硫酸盐转运蛋白在硫酸盐运输过程中的功能及调控机制对深入认识硫在作物生长发育、产量及品质等方面的作用,进而改良作物的硫缺乏,降低土壤缺硫对作物的危害具有重要意义。本研究克隆了水稻硫酸盐转运蛋白基因OsSultr1;1的全长cDNA序列,全长为1989bp。半定量RT-PCR分析表明,硫缺乏条件下OsSultr1;1在根部特异性表达,而且其表达受到硫缺乏的诱导,表达量随着缺硫胁迫时间的延长而逐渐增加;低硫限制条件下,OsSultr1;1在根部的表达与环境中硫酸盐浓度负相关,其表达量随着应答培养液中硫酸盐浓度的降低而逐渐上升。利用基因枪技术,将Ubi:OsSultr1;1-GFP重组表达载体转化到洋葱表皮细胞进行瞬时表达分析,发现GFP信号集中在细胞质膜上,说明OsSultr1;1是一种定位于细胞质膜的转运蛋白。将OsSultr1;1的开放阅读框序列(ORF)连接到酵母表达载体pYE22m中,获得重组表达载体OsSultr1;1-pYE22m,并转化自身硫酸盐转运系统缺失的酵母突变菌株CP154-7A进行酵母功能互补验证,结果发现OsSultr1;1在低浓度硫酸盐营养条件下能够拯救突变体的缺陷表型,说明OsSultr1;1具有硫酸盐转运的功能,暗示OsSultr1;1是一种高亲和性水稻硫酸盐转运蛋白。同时,构建了OsSultr1;1 promoter-Gus表达载体,可用于后续的OsSultr1;1组织器官表达定位分析。(本文来源于《山东大学》期刊2010-05-27)

刘俊超[5](2009)在《水稻硫酸盐转运蛋白OsSultr2;1的表达与功能研究》一文中研究指出硫是植物生长必需的营养元素之一,参与合成含硫氨基酸、低聚肽、蛋白、维生素、辅因子和多种次生代谢物。植物主要以无机硫酸盐的形式从土壤中吸收硫营养。植物根部对硫酸盐的吸收以及不同器官和细胞器之间硫酸盐的运输都存在硫酸盐跨膜运输的过程,该过程是由硫酸盐转运蛋白介导完成的。水稻是重要的粮食作物,研究水稻硫酸盐转运蛋白在硫酸盐运输过程中的功能及调控机制对深入认识硫在作物生长发育、产量及品质等方面的作用,进而通过遗传操作降低土壤缺硫对作物的危害具有重要意义。序列比对结果显示水稻Loc_Os03g09930与拟南芥硫酸盐转运蛋白家族第2亚族成员之间存在较高的序列相似性,系统进化分析表明该基因与拟南芥AtSultr2;1、AtSultr2;2的亲缘关系较近,推测该基因的编码产物是水稻的硫酸盐转运蛋白,将其定名为OsSultr2;1。半定量RT-PCR分析表明,缺硫条件下OsSultr2;1在根部和地上部分中被诱导表达,且表达量随缺硫胁迫时间的延长而逐渐增加;低硫条件下,OsSultr2;1在根部和地上部分的表达量与培养液中硫酸盐浓度呈负相关。即OsSultr2;1的mRNA表达量随着硫酸盐浓度的降低而逐渐增加,说明OsSultr2;1的表达受外界硫酸盐条件的负调控。利用基因枪技术,将35S:OsSultr2;1-GFP重组表达载体转化到洋葱表皮细胞中进行瞬时表达分析,发现GFP信号只出现于细胞质膜上,说明OsSultr2;1是一种定位于细胞质膜的转运蛋白。将OsSultr2;1的开放阅读框序列(ORF)连接到酵母表达载体pYE22m中,获得重组表达载体,经自身硫酸盐转运系统缺失的酵母突变菌株CP154-7A进行功能互补验证,结果OsSultr2;1在低浓度硫酸盐营养条件下不能拯救突变体的缺陷表型,推测OsSultr2;1是水稻的低亲和性硫酸盐转运蛋白;当无机硫酸盐浓度较高时,CP154-7A及OsSultr2;1转化菌株均能恢复生长,无法判断OsSultr2;1是否具有硫酸盐转运功能,需要寻找新方法做进一步的OsSultr2;1硫酸盐转运功能研究。(本文来源于《山东大学》期刊2009-05-25)

朱超[6](2007)在《干旱条件下硫营养对玉米硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因表达的影响》一文中研究指出干旱是限制农业生产的重要因素之一,解决干旱问题的重要途径之一就是提高作物自身的抗旱性。硫作为作物所必需的营养元素,在作物的生长代谢过程中起着许多重要的作用。已有研究表明,硫素不仅对植物有直接的营养作用,还可以提高植物的水分利用率,降低与干旱相关的伤害指数,有利于植物对干旱逆境的适应。然而,人们目前对硫营养与提高作物抗旱性的分子机理的认识还十分有限,有待开展系统深入的研究。硫在被植物吸收同化利用的途径中,硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶是最初也是最基础的两个调节部位,研究它们在干旱胁迫条件下的表达情况是了解硫营养对作物抗旱性影响的分子机理的基础。本实验选用水硫敏感型玉米农大108作为试验材料,采用室内水培的方法,通过控制不同的硫水平,探讨了在干旱胁迫条件下硫对玉米硫酸盐转运蛋白基因和ATP硫酸化酶基因表达的调节,取得了以下结果:1.提取玉米根系总RNA,自行设计引物,应用RT-PCR的方法分别克隆了玉米硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因片段,将其连入克隆载体pGEM-T easy后测序,测序结果比对发现二者分别属于高亲和型硫酸盐转运蛋白基因片段和一类质体的ATP硫酸化酶基因片段。2.用地高辛随机引物标记试剂盒分别对玉米硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因片段进行标记后,对不同水分和硫营养条件下提取的玉米根系总RNA进行斑点杂交。结果显示,硫酸盐转运蛋白基因和ATP硫酸化酶基因的表达受到硫营养的负调控,同时,硫养分胁迫下干旱处理较之正常供水二者的表达有所增加。3.对不同硫水平和水分处理的玉米进行了叶片游离脯氨酸、谷胱甘肽、MDA含量和ATP硫酸化酶活性等生理指标的测定。结果显示,干旱胁迫下有硫处理比无硫处理明显对干旱伤害有更强的适应能力,而且干旱加剧了植株对硫的需求。本文对玉米利用硫养分生理抗旱的分子机理做了初步探讨,同时克隆出了玉米硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因片段,并进行了序列分析,为制备相关分子探针从分子水平阐明不同环境下中作物硫营养的代谢机理和作物硫营养水平的快速鉴定提供依据。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2007-06-01)

硫酸盐转运蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

从茶树(Camellia sinensis)根系中克隆获得1条长度为1 999 bp的核酸序列,该序列包含1 980 bp的开放阅读框(ORF),编码659个氨基酸。BlastX同源性比对显示,该基因编码的氨基酸序列与葡萄VvSULTR3.1相似度最高(86%),将其命名为CsSULTR3.1(GenBank登录号:KY963793)。进一步分析显示,该基因编码的蛋白分子量为72.39 kD,理论等电点为7.61,属于非分泌性蛋白,包含10个跨膜结构域。以GFP作为标记进行亚细胞定位发现,该蛋白定位于细胞质中。qRT-PCR分析显示,CsSULTR3.1具有组织表达特异性,在茶树茎中表达量最高。CsSULTR3.1在茶树根系中的表达受Na_2SO_4和Na_2SeO_4诱导:60 mg·L~(-1) Na_2SO_4处理12 h后逐渐上调表达,在48 h时达到最大值,而240 mg·L-1Na_2SO_4处理12 h内显着下调表达,随后显着上调并维持相对稳定状态;在不同浓度Na_2SeO_4处理条件下表达量均呈现先降低后升高再降低的趋势,且均在48 h时达到最高。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

硫酸盐转运蛋白论文参考文献

[1].张晶晶.茶树硫酸盐转运蛋白基因对硒的响应及CsSULTR3.5功能分析[D].中国农业科学院.2018

[2].张晶晶,钱文俊,郝心愿,王璐,丁长庆.茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSULTR3.1的克隆及其对硫和硒的响应分析[J].园艺学报.2018

[3].胡玉荣,岳川,周超,黄玉婷,曹红利.茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSUL3.5的克隆与表达分析[J].园艺学报.2015

[4].董婷.水稻硫酸盐转运蛋白OsSultr1;1基因功能的研究[D].山东大学.2010

[5].刘俊超.水稻硫酸盐转运蛋白OsSultr2;1的表达与功能研究[D].山东大学.2009

[6].朱超.干旱条件下硫营养对玉米硫酸盐转运蛋白和ATP硫酸化酶基因表达的影响[D].西北农林科技大学.2007

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