鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白的制备及其免疫原性研究

论文摘要

为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白（OMPs）免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1026.632μg/mL～1715.589μg/m L;电镜结果显示其超微结构呈双层泡状的C形或O形;SDS-PAGE分析显示其大小集中在25 ku～55 ku;动物免疫结果显示其具有一定的免疫原性。用提取的OMPs免疫小鼠和雏鸡后,以鸡源致病性大肠杆菌强毒株EC-9攻毒,结果显示:OMPs对小鼠和雏鸡均具有较好保护力,对小鼠保护率为70%,对鸡的保护率为80%;间接EILSA法检测免疫小鼠后的抗体效价最高为1:400,免疫雏鸡后抗体效价最高为1∶800;MTT法检测免疫小鼠后的T淋巴细胞转化率最高为1.582,免疫雏鸡后的T淋巴细胞转化率最高为2.215;常规法分析免疫小鼠脾脏指数为5.334,雏鸡脾脏指数为3.981,表明OMPs可以诱导小鼠和雏鸡产生良好的体液免疫应答和细胞免疫应答。本研究提取的鸡源致病性大肠杆菌地方流行株Omps对小鼠和雏鸡均具有一定的免疫保护性,为致病性大肠杆菌的亚单位疫苗的研制奠定基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株与实验动物
•   1.2 主要试剂
•   1.3鸡致病性大肠杆菌OMP s提取及超微结构观察
•   1.4 OMP s S DS-P AGE检测和we s te rn blot鉴定
•   1.5 OMP s对小鼠的免疫效果评价
•   1.6 OMP s对鸡的免疫效果评价
• 2 结果
•   2.1 OMP s浓度测定及超微结构观察结果
•   2.2 OMP s S DS-P AGE和we s te rn blot鉴定
•   2.3 OMP s免疫小鼠的效果评价
•   2.4 OMP s免疫雏鸡的效果评价
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张艳英,张召兴,郭家媚,李蕴玉,李佩国,索勋

关键词: 致病性大肠杆菌,外膜蛋白制备,免疫原性

来源: 中国预防兽医学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业大学动物医学学院,河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室,河北旅游职业学院畜牧兽医系

基金: 河北省现代农业产业技术体系蛋鸡产业创新团队岗位资助项目(HBCT2018150206),河北省高等院校科学技术研究项目(QN20131123,ZD2019092)

分类号: S852.61

页码: 1141-1146

总页数: 6

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