猪链球菌4型分离株生物学特性研究

论文摘要

为分析猪链球菌4型（Streptococcus suis type 4,SS4）分离株的病原生物学特性,试验对来自中国不同地区的10株猪链球菌4型进行了多位点序列分型,通过PCR方法对猪链球菌7个保守管家基因aroA、gki、dpr、mutS、recA、thrA、cpn60进行扩增,测序后将结果上传至MLST数据库查找序列型,然后制作聚类分析图来阐明菌株之间的亲缘关系;采用PCR方法对7种主要的毒力基因gdh、mrp、epf、sly、fbps、gapdh与orf2进行鉴定,通过毒力因子谱来分析猪链球菌4型毒力因子的分布;以纯化的10株细菌对BALB/c小鼠进行动物致病性试验,根据小鼠致死数量筛选出最强毒株,并进行新西兰兔致病性试验。结果显示,10株猪链球菌4型经多位点序列分型,6株为ST850型,3株为ST1006型,1株为ST94型;结合菌株分离地区分析发现,广东和江苏地区菌株有较高的同源性,江沪地区菌株出现分化现象,表现为遗传多样性;10株菌株均检测到了gdh、gapdh和orf2毒力基因,7株检测到sly基因,4株检测到fbps基因,根据毒力因子谱发现共有3个毒力基因型,gdh+sly+gapdh+orf2+型有6株,gdh+fbps+gapdh+orf2+型有3株,gdh+sly+fbps+gapdh+orf2+型仅有1株。动物致病性试验表明,10株细菌均能使BALB/c小鼠死亡,其中SH1510的半数致死量低至1×108 CFU,对小鼠的致病性最强,将纯化的SH1510菌液接种新西兰兔,可使新西兰兔出现典型的神经症状并死亡。以上结果为猪链球菌的遗传进化、毒力研究提供了新的数据,丰富了猪链球菌病的研究。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 菌种来源
•     1.1.2 试验动物
•     1.1.3 培养基
•     1.1.4 主要试剂
•   1.2 细菌的复苏与培养
•   1.3 细菌DNA模板提取
•   1.4 多位点序列分型 （MLST） 及其结果分析
•   1.5 毒力因子检测
•   1.6 动物致病性试验
•     1.6.1 对BALB/c小鼠的致病性试验
•     1.6.2 对新西兰兔的致病性试验
• 2 结果
•   2.1 多位点序列分型及其结果分析
•   2.2 毒力因子检测
•   2.3 动物致病性试验
•     2.3.1 对BALB/c小鼠的致病性
•     2.3.2 对新西兰兔的致病性
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孙珂,倪艳秀,祝昊丹,王丹丹,关琳,俞正玉,周俊明,吕立新,王春凤,何孔旺

关键词: 猪链球菌型,多位点序列分型,毒力因子,致病性

来源: 中国畜牧兽医 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林农业大学动物科学技术学院,江苏省农业科学院兽医研究所

基金: 公益性行业(农业)科研专项经费(201303041),江苏省生猪产业技术体系生物安全创新团队(SXGC(2017)263)

分类号: S852.61

DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.01.010

页码: 80-88

总页数: 9

文件大小: 1936K

下载量: 232