导读:本文包含了启动子表达载体构建论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:甘蓝型油菜,BnGPAT9基因,GUS基因,启动子克隆
启动子表达载体构建论文文献综述
洪波,邢蔓,岳宁燕,周雪晴,何婷[1](2019)在《甘蓝型油菜BnGPAT9基因启动子克隆与表达载体构建》一文中研究指出甘油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferase, GPAT)在植物叁酰甘油脂(TAGs)等油脂合成中起着重要作用,而GPAT9基因是GPAT基因家族中参与油脂合成的重要基因。本研究采用电子克隆技术,以甘蓝型油菜湘油15为模板克隆了BnGPAT9基因的启动子序列pBnGPAT9,长度为900 bp。经过PlantCARE在线分析表明:该序列含有CAAT-box和TATA-box等区域特征元件,和多个参与光应答、激素诱导响应、逆境胁迫响应的元件,以及分生组织表达相关元件CAT-box与胚乳表达所需的顺式作用元件Skn-1_motif等,推测其可能在种子中表达较强烈,且在油菜生殖生长中有重要作用。通过双酶切,将pBnGPAT9启动子序列替换p BI121植物表达载体上的CaMV35S,使该启动子与GUS基因融合,构建了pBnGPAT9:GUS植物表达载体。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年11期)
杨潮,何小杨,莫淑芳,戴京,张欣宇[2](2019)在《人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定》一文中研究指出人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。(本文来源于《井冈山大学学报(自然科学版)》期刊2019年03期)
毛杨柳,常振宇,丁丽华,刘婕,叶棋浓[3](2018)在《CD31启动子表达载体的构建与功能鉴定》一文中研究指出目的:构建CD31启动子的绿色荧光蛋白和萤光素酶真核表达载体,转染至内皮细胞系HUVEC和BEND3细胞中,对其生物学功能和活性进行初步检测,作为鉴定内皮细胞的新方法。方法:从基因组中钓取CD31启动子的核酸序列,将其插入pGL4.0萤光素酶载体和慢病毒表达载体pCDH-copGFP,经限制性内切酶酶切和测序验证后瞬时转染HUVEC和BEND3内皮细胞系及对照MCF7乳腺癌细胞,通过双萤光素酶实验检测其启动子活性,荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果:双酶切与测序结果表明表达载体中正确插入了CD31启动子序列;双萤光素酶实验和荧光显微镜检测发现CD31启动子特异性在内皮细胞中表达。结论:CD31启动子的萤光素酶和绿色荧光表达载体构建成功,可作为鉴定内皮细胞的新型技术手段。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2018年06期)
任燕萍,王益虹,朱少青,王萍[4](2018)在《逆境诱导型启动子Mvnhx1缺失片段植物表达载体构建》一文中研究指出Mvnhx1启动子是一种与盐胁迫和干旱胁迫相关的逆境诱导型启动子。为了更好地研究顺式作用元件对Mvnhx1启动子功能特点的影响,研究根据启动子序列上与耐盐和耐旱相关的顺式作用元件分布位置不同设计引物,利用5'端缺失技术获得11个不同长度的Mvnhx1启动子缺失片段,分别构建不同缺失片段与报告基因GUS融合的植物表达载体。PCR扩增结果显示,成功克隆获得11个长度分别为1 135、1 027、974、967、858、727、726、564、366、352和210 bp的片段。酶切鉴定显示,成功构建了由Mvnhx1启动子11个不同长度缺失片段调控的带GUS基因的植物表达载体。(本文来源于《湖南农业科学》期刊2018年06期)
张承琪,王怡,夏成林,于月华,倪志勇[5](2018)在《大豆F-box基因Glyma08g11030启动子克隆及植物表达载体构建》一文中研究指出本研究以大豆Williams 82的基因组DNA为原始材料,根据前期预测的Glyma08g11030启动子序列用DNAMAN8.0设计引物,通过常规PCR方法克隆获得了Glyma08g11030基因上游长度为3 000 bp的启动子序列。在PlantCARE植物启动子区域在线预测网站上查询,预测的结果显示Glyma08g11030启动子序列里含有数量众多、功能各异的顺式作用元件。其中以TATA-box和CAAT-box这两个基本的顺式作用元件最多,此外还有许多与应答相关的顺式作用元件,如干旱、热、光、激素等。根据这些顺式作用元件在Glyma08g11030启动子序列中的位置对启动子序列进行截短并分别设计引物,采用PCR方法成功截出了3段长度分别为2 492,1 185和342bp的启动子序列,将3段序列替换pCAMBIA3301载体双酶切出的CaMV35S启动子序列,并构建了3个启动子序列驱动GUS植物融合表达载体,从而得到含不同顺式作用元件的启动子序列。研究结果将为以后分析Glyma08g11030启动子的功能和作用机理提供前期准备。(本文来源于《大豆科学》期刊2018年02期)
蔡薇[6](2017)在《AtHGO/OsHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建转化及表达分析》一文中研究指出HGO是编码酪氨酸降解途径中尿黑酸1,2双加氧酶的基因。在前期研究中发现若酪氨酸降解途径中编码延胡索酰乙酰乙酸酶(fumarylacetoacetate hydrolase,FAH)的基因突变会导致拟南芥sscd1(short-day sensitive cell death1)突变体在短日照下发生细胞死亡,若将hgo突变体和sscd1突变体进行杂交,得到的拟南芥sscd1hgo双突变体在短日照下细胞死亡的表型会被抑制。通过外源添加酪氨酸发现低浓度酪氨酸对拟南芥幼苗的生长具有促进作用,而高浓度酪氨酸将会抑制其幼苗的生长。水稻和拟南芥分别为单子叶和双子叶的模式植物,且水稻OsHGO基因与拟南芥At HGO基因具有类似的功能。为了探讨HGO基因在植物组织中的表达特征,本论文做了以下研究:1、AtHGO和OsHGO基因启动子序列的克隆。通过PCR和测序检测,这两个基因的启动子序列被完整且正确的克隆。2、分别构建AtHGO和OsHGO基因启动子的GUS融合表达载体。分别用克隆的AtHGO和OsHGO基因启动子序列与含GUS基因的pC1301载体进行重组来实现其与GUS基因的融合。3、将重组载体通过采用农杆菌介导的浸花法转入拟南芥野生型Col-0、sscd1和hgo突变体,并对其进行GUS染色分析。结果显示,启动子成功启动GUS基因的表达,且AtHGO和OsHGO在拟南芥野生型Col-0、sscd1和hgo突变体中表达程度或表达部位有所不同。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2017-06-01)
申丽婕,于月华,刘娜,梁承娟,汪晓东[7](2016)在《拟南芥rd29A启动子的克隆及植物表达载体构建》一文中研究指出以拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组DNA为材料,根据Gen Bank中拟南芥rd29A启动子序列设计引物,采用PCR克隆一段长度为951 bp的rd29A启动子序列。采用Plant CARE启动子在线预测工具分析表明,rd29A启动子序列具有TATA-box、CAAT-box基本的顺式作用元件和1个脱落酸应答元件(ABRE)和2个脱水应答调控元件(DRE)。将rd29A启动子序列亚克隆到pcambia3301载体的多克隆位点,构建了由rd29A启动子驱动的植物表达载体。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2016年18期)
田翠霞,魏强,李宪彬[8](2016)在《水稻BRI1启动子克隆与表达载体构建》一文中研究指出为探究拟南芥和水稻BRI1基因差异表达的原因,本研究克隆了Os BRI1启动子,并将其构建在植物表达载体p Cambia2300-GUS上,为进一步转化拟南芥或其他植物并研究其表达模式奠定了基础。(本文来源于《山东农业科学》期刊2016年08期)
刘雷,黄星华,李坚伟,周建华,陈统权[9](2016)在《DD3启动子调控TRAIL过表达载体的构建及腺病毒包装》一文中研究指出目的:构建DD3(PCA3)启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL过表达腺病毒载体,并对其进行病毒包装及滴度测定。方法:将DD3启动子用分子克隆技术替换掉穿梭质粒p HBAd-U6-GFP原有启动子U6,再用Age I单酶切将制备的重组质粒p HBAd-DD3-GFP线性化,将TRAIL基因片段克隆至线性化p HBAd-DD3-GFP上,经抗性筛选后PCR及测序鉴定为p HBAd-DD3-TRAIL载体。将其连同病毒骨架质粒p HBAd-BHG共同转染至HEK293细胞包装成病毒并扩增,测定病毒感染性滴度。结果:经PCR及测序验证证实成功构建DD3启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL过表达腺病毒载体p HBAd-DD3-TRAIL并包装扩增,病毒滴度为1.58×1010PFU/ml。结论:构建DD3启动子调控的凋亡配体TRAIL过表达重组腺病毒,可用于下一步在前列腺癌细胞中特异性地表达及诱导细胞凋亡杀伤靶细胞效应研究中。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2016年17期)
程姣,黄弈,任春梅[10](2016)在《拟南芥CWINV1启动子GUS表达载体构建及转基因植株的鉴定》一文中研究指出CWINV是编码细胞壁蔗糖转化酶的基因。为深入探讨CWINV基因的表达调控机理,构建了拟南芥CWINV1基因启动子的GUS融合表达载体并转入拟南芥,获得了转基因植株。GUS染色的结果进一步验证了重组表达载体的正确性和实用性。(本文来源于《作物研究》期刊2016年03期)
启动子表达载体构建论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
启动子表达载体构建论文参考文献
[1].洪波,邢蔓,岳宁燕,周雪晴,何婷.甘蓝型油菜BnGPAT9基因启动子克隆与表达载体构建[J].分子植物育种.2019
[2].杨潮,何小杨,莫淑芳,戴京,张欣宇.人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定[J].井冈山大学学报(自然科学版).2019
[3].毛杨柳,常振宇,丁丽华,刘婕,叶棋浓.CD31启动子表达载体的构建与功能鉴定[J].生物技术通讯.2018
[4].任燕萍,王益虹,朱少青,王萍.逆境诱导型启动子Mvnhx1缺失片段植物表达载体构建[J].湖南农业科学.2018
[5].张承琪,王怡,夏成林,于月华,倪志勇.大豆F-box基因Glyma08g11030启动子克隆及植物表达载体构建[J].大豆科学.2018
[6].蔡薇.AtHGO/OsHGO基因启动子与GUS融合表达载体的构建转化及表达分析[D].湖南农业大学.2017
[7].申丽婕,于月华,刘娜,梁承娟,汪晓东.拟南芥rd29A启动子的克隆及植物表达载体构建[J].湖北农业科学.2016
[8].田翠霞,魏强,李宪彬.水稻BRI1启动子克隆与表达载体构建[J].山东农业科学.2016
[9].刘雷,黄星华,李坚伟,周建华,陈统权.DD3启动子调控TRAIL过表达载体的构建及腺病毒包装[J].现代肿瘤医学.2016
[10].程姣,黄弈,任春梅.拟南芥CWINV1启动子GUS表达载体构建及转基因植株的鉴定[J].作物研究.2016