红色荧光蛋白融合表达载体的构建和蛋白质细胞内定位研究

论文摘要

为进一步研究目的蛋白质在细胞内的定位,构建融合了红色荧光蛋白mCherry或mScarlet的表达载体。选取VTI12、RabD2a、ARA7以及SYP61等4个定位基因来构建红色荧光蛋白融合表达载体。根据TAIR数据库中相关蛋白质的基因序列设计引物,通过PCR技术扩增序列并将其分别连接到已制备好的红色荧光蛋白融合表达载体上,制备得到质粒后转化入原生质体进行瞬时表达。结果表明,成功构建了pUC18HE-NmCherry-VTI12、pUC18HE-NmCherry-RabD2a、pUC18-mScarlet NT-ARA7以及pUC18-mScarlet NT-SYP61等4个红色荧光蛋白融合表达载体,并且成功在拟南芥叶肉细胞原生质体中瞬时表达。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验时间与地点
•   1.2 材料
•     1.2.1 植株、细菌和载体
•     1.2.2 主要工具酶与试剂
•   1.3 方法
•     1.3.1 3种红色荧光蛋白的同源性比对
•     1.3.2 融合表达载体的选取和构建
•     1.3.3 原生质体的制备与瞬时转化
• 2 结果与分析
•   2.1 3种红色荧光蛋白的同源性比对及空间结构预测
•   2.2 融合表达载体的构建
•     2.2.1 PCR扩增结果与酶切
•     2.2.2 红色荧光蛋白融合表达载体的鉴定
•   2.3 原生质体细胞瞬时表达红色荧光蛋白的结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王文旭,郁飞

关键词: 红色荧光蛋白,融合表达载体,亚细胞定位,瞬时表达

来源: 江苏农业科学 2019年08期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 西北农林科技大学生命科学学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室

基金: 国家自然科学基金(编号:31570267)

分类号: Q78

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.08.011

页码: 52-55

总页数: 4

文件大小: 2162K

下载量: 640