生松素对AngⅡ诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成的影响及其机制研究

生松素对AngⅡ诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成的影响及其机制研究

论文摘要

目的探讨生松素(Pb)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质(ECM)合成的影响及其机制。方法以大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将实验分为以下5组:正常对照(NC)组、1×10-6mol/L AngⅡ(Ng)组、1×10-6mol/L AngⅡ+1‰DMSO(Ng-D)组、1×10-6mol/L AngⅡ+30μmol/L Pb(Ng-Pb)组、1×10-6mol/L AngⅡ+10μmol/L缬沙坦(Ng-Val)组。分别在干预12、24、48 h搜集细胞和上清液,采用Western blot检测Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(pNF-κB)的蛋白水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ColⅣ、FN、TGF-β1、TNF-α、IL-6的mRNA水平。结果 (1)Pb对AngⅡ诱导的系膜细胞合成ECM的影响:与NC组相比,Ng组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA水平升高(P<0.05),而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低(P<0.05)。(2)Pb对TGF-β1/Smad3通路的影响:与NC组相比,Ng组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平增加,p-Smad3/Smad3水平增加(P<0.05),而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平以及p-Smad3/Smad3水平均较Ng组降低(P<0.05)。(3)Pb对NF-κb介导的促炎症因子产生的影响:与NC组相比,Ng组p-NF-κb/NF-κb水平增加,IL-6和TNF-α的蛋白质和mRNA水平增加(P<0.05),而Ng-Pb组和Ng-Val组p-NF-κb/NF-κb水平以及IL-6和TNF-α的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低(P<0.05)。结论 Pb可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路和NF-κb介导的促炎症因子的产生,从而抑制AngⅡ诱导的大鼠系膜细胞合成ECM。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养与分组
  •     1.2.2 Western blot检测细胞内蛋白水平
  •     1.2.3 qPCR检测细胞内mRNA水平
  •     1.2.4 ELISA法检测细胞上清液TNF-α、IL-6水平
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1Pb对AngⅡ诱导的系膜细胞合成ColⅣ、FN的影响
  •   2.2Pb对AngⅡ诱导的系膜细胞TGF-β1/Smad3通路的影响
  •   2.3Pb对AngⅡ诱导的系膜细胞中NF-κb介导的促炎症因子产生的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王梦平,王丽,高利超,肖文,甘林望,吴蔚桦,刘建

    关键词: 生松素,血管紧张素,细胞外基质,转化生长因子,核因子,肾小球系膜细胞

    来源: 天津医药 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 内分泌腺及全身性疾病,泌尿科学

    单位: 西南医科大学附属医院肾病内科,西南医科大学中西医结合研究中心,西南医科大学附属中医医院肾病科

    基金: 四川省科学技术厅-泸州市人民政府-泸州医学院联合科研专项资金应用基础研究计划(14JC0112),四川省卫生与计划生育委员会科研课题(普及应用项目)(17PJ054)

    分类号: R587.2;R692.9

    页码: 1205-1209

    总页数: 5

    文件大小: 957K

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