血清6型流行性出血病病毒在我国云南的首次分离与鉴定

论文摘要

为对流行于我国云南省的流行性出血病病毒（EHDV）进行分离与鉴定,以掌握我国流行EHDV的遗传特征与感染特性,本研究将2012年8月采集于哨兵牛的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞以分离病毒;通过血清中和试验与分离病毒的Seg-2、Seg-3基因测序分析,确定病毒的血清型与遗传特征;采用C-ELISA和荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）方法对EHDV感染哨兵牛血清中的抗体水平与血液中病毒核酸进行动态监测。结果显示,经BHK-21细胞分离出一株EHDV （YNSZ/V003/2012）,血清中和试验显示分离病毒属于EHDV-6型。病毒Seg-2、Seg-3基因序列分析显示YNSZ/V003/2012血清型为EHDV-6型,地域型为东方型,与日本EHDV-6亲缘关系最近。哨兵牛感染该病毒后,血清中的特异性抗体迅速上升,感染3周后抗体达最高点并能够在该水平维持较长时间,而血液中病毒核酸含量则呈迅速下降趋势,感染7周后已经检测不到病毒核酸。本研究首次报道了EHDV-6型病毒株在我国云南的分离、序列特征以及在动物中的感染特性,为进一步开展EHDV-6型的流行病学调查和致病性等相关研究奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•   1.2 监控群的建立及血液样品的采集
•   1.3 引物设计与合成
•   1.4 EHDV抗体和核酸的检测
•   1.5 病毒的分离与鉴定
•   1.6 病毒粒子观察
•   1.7 哨兵动物血清中和抗体效价的测定
•   1.8 分离病毒S e g-2与S e g-3基因的P CR扩增与序列分析
•   1.9 哨兵牛的EHDV抗体水平和病毒核酸检测
• 2 结果
•   2.1 病毒分离鉴定结果
•   2.2 病毒形态的电镜观察结果
•   2.3 哨兵动物血清中和抗体效价的测定结果
•   2.4 分离病毒S e g-2与S e g-3基因的P CR扩增与序列分析结果
•   2.5 分离病毒S e g-2序列与系统发生树分析结果
•   2.6 分离病毒S e g-3序列与系统发生树分析结果
•   2.7 哨兵牛EHDV抗体和核酸检测结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨振兴,寇美玲,李占鸿,廖德芳,肖雷,朱建波,高林,李华春,杨恒

关键词: 流行性出血病病毒,病毒分离鉴定,血清型,序列分析

来源: 中国预防兽医学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0500908),国家重点研发计划(2017YFC1200505),国家公益性行业(农业)科研专项(201303035),云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目(2017HB055)

分类号: S852.65

页码: 1113-1119

总页数: 7

文件大小: 2138K

下载量: 38