序列改造论文_于荣荣

导读:本文包含了序列改造论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:序列,基因,大肠杆菌,电网,电压,家蚕,热稳定性。

序列改造论文文献综述

于荣荣[1](2019)在《改造和优化人干扰素α-2b基因序列并在大肠杆菌中做表达验证》一文中研究指出提高外源基因的表达水平一直是生物技术探讨的热点问题。在理论上,探讨更有效的基因序列改造和优化方案,对于提高外源基因的表达水平具有重要意义和实用价值。本研究提出了针对人干扰素α-2b基因的改造和优化方案,期望在大肠杆菌中获得高效表达。研究两个部分,第一部分在理论上将人干扰素α-2b基因(IFNα-2b)编码序列(CDS)改造成大肠杆菌高表达基因的偏好模式,然后配置选定的启动子区和终止子区序列以便构成完整基因。第二部分是为了检验我们的理论方法的可靠性,将改造和优化的人IFNα-2b基因在大肠杆菌中表达。(一)人干扰素α-2b基因改造和优化方案。对编码序列改造分为两步,首先将编码序列中的密码子置换成大肠杆菌高表达基因的最适同义密码子。其次将编码序列中紧邻密码子第叁位点的碱基关联置换成大肠杆菌高表达基因的强关联模式。在此过程中,在强关联模式和最适或次最适同义密码子的置换上做出最佳选择。以大肠杆菌中高表达基因lpp的启动区和终止区序列作为改造基因的启动区和终止区序列。以lpp启动区中的SD序列作为高表达启动区的SD序列,将低表达基因的SD序列替换lpp启动区中的SD序列作为对照序列。构造叁条完整的人干扰素α-2b基因,它们是“高表达SD+改造前CDS”基因(GWGB),“高表达SD+改造后CDS”基因(GGB)和“低表达SD+改造后CDS”基因(DGB)。(二)GWGB基因和GGB基因作为第一对照组,检验编码序列改造前和改造后的表达差异。GGB基因和DGB基因作为第二对照组,检验的是高表达SD序列和低表达SD序列对基因表达水平的影响。在大肠杆菌中做表达对比实验,我们采用了两种方式完成表达实验,(1)由于我们设计的序列是一条完整的基因序列,将重组克隆载体p GM-T-IFNα-2b转化至大肠杆菌中进行表达。(2)将重组表达载体p ET-28a(+)-IFNα-2b转化至大肠杆菌进行表达(表达载体中的T7启动子被抑制)。(3)最后通过ELISA检测两个载体中人干扰素α-2b基因的表达量。结果显示:在克隆载体中,编码序列改造后的基因(GGB基因)的表达量显着高于编码序列改造前的基因(GWGB基因)的表达量,表达量提高了55.1%;高表达SD基因的表达量显着高于低表达SD基因的表达量,表达量提高了52.8%。在表达载体中,编码序列改造后的基因的表达量显着高于编码序列改造前的基因的表达量,表达量提高了9.1%;高表达SD基因的表达量显着高于低表达SD基因的表达量,表达量提高了18.2%。结果表明,基因改造和优化的理论方案得到了实验验证。我们的理论方案对于提高外源基因的表达效率具有重要的参考价值。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-04-19)

李瑞瑞[2](2019)在《改造人白细胞介素2基因序列并在大肠杆菌中做表达验证》一文中研究指出论文主要研究了两个方面的内容。一是对人白细胞介素2基因序列进行了改造和优化。首先将人白细胞介素2基因编码序列(CDS)改造成大肠杆菌的高表达模式,选用了大肠杆菌高表达基因的核糖体结合位点(Shine-Dalgarno sequence,简称SD)序列,作为对比还选用了大肠杆菌低表达基因的SD序列。然后组装成“高表达SD+改造后CDS”和“高表达SD+改造前CDS”基因对照组;“高表达SD+改造后CDS”和“低表达SD+改造后CDS”基因对照组。前者主要考察改造CDS对基因表达的影响,后者主要检验SD序列的优化选择对基因表达的影响。二是将组装的两组基因序列在大肠杆菌TOP10中克隆及表达,通过实验来验证改造和优化后人白细胞介素2基因(hIL-2)表达水平的理论预测。理论推测改造后的hIL-2基因编码序列在大肠杆菌中的表达水平为CAI=0.884,原hIL-2基因编码序列在大肠杆菌中的表达水平为CAI=0.267。为了保证编码基因表达的正常启动,选取大肠杆菌rplL高表达基因的启动子区和终止子区来代替hIL-2基因的启动子区和终止子区。其中高表达SD序列选用该基因的SD序列,低表达SD序列选用了前期研究给出的低表达基因的SD序列来替代rplL基因的SD序列。通过重组表达载体pBV220/hIL-2进行基因表达。实验上首先通过SDS-PAGE跑胶定性,之后利用ELISA分别对经过3h、4h、5h 42℃诱导后的表达蛋白定量检测。结果显示:(1)在“高表达SD+改造后CDS”和“高表达SD+改造前CDS”基因对照组中,CDS改造后的蛋白表达量极显着的高于CDS改造前的蛋白表达量,且蛋白表达量提高了131.41%,实验结果与理论预测吻合,这说明基因经过改造编码区后的蛋白表达量比原基因的蛋白表达量有明显的提高。(2)在“高表达SD+改造后CDS”和“低表达SD+改造后CDS”基因对照组中,高表达SD序列所对应基因的蛋白表达量显着高于低表达SD序列所对应基因的蛋白表达量,蛋白表达量提高了36.55%,表明高表达SD序列本身会提高基因的表达水平。实验结果验证了我们的理论预测。总之,通过改造基因编码序列和优化基因启动区域中的SD序列均会显着提高外源基因在宿主细胞中的蛋白表达水平。本文的研究方法对于提高转基因效率具有重要的参考价值。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-04-16)

徐五,周倩,胡朝阳,李国辉,姚勤[3](2017)在《家蚕二分浓核病毒ns1基因序列的改造、表达和鉴定》一文中研究指出探讨翻译起始区(TIR)部分密码子发生同义突变后,对家蚕二分浓核病毒(BmBDV)ns1基因表达的影响,以及对BmBDV NS1蛋白毒性进行鉴定,设计特异性上游引物,对BmBDV ns1基因中第3、4、9和10个密码子进行同义突变,利用原核表达系统对野生型和改造后的ns1序列进行表达,通过SDS-PAGE电泳对这两种序列的表达产量进行分析。利用Protein Iso~(TM)GST Resin从超声破碎的菌液上清中纯化融合有GST的NS1蛋白,进而对纯化的靶蛋白在细胞水平和家蚕体内进行毒性分析。结果表明:TIR突变后的BmBDV ns1序列,其与野生型序列的表达产量之间没有明显差异;BmBDV NS1蛋白具有抑制细胞增殖和诱导家蚕致死的生化活性。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2017年01期)

杨宇[4](2016)在《序列场景 中央美术学院#501教室改造》一文中研究指出中央美术学院#501教室位于教学楼顶层,长期作为天光画室使用。屋顶天花呈倒锥形,与四面侧天窗形成室内均匀的天光漫反射,具有典型的天光画室特点。其最大问题是室内严重缺少人工照明,使用功能单一。而这次的设计任务就是用最少的花费将#501教室改造成具备画室、展厅、会议、工作室等多种功能使用的教学空间。基于对建筑空间的尊重,改造的原则就是让新的结构自然"生长"在空间中,与原有空间形成并置关系。设计师将移动隔墙系统和照明系统通过一组构架"置入"原建筑框架中。构架的设计概念来源于儿时(本文来源于《室内设计与装修》期刊2016年12期)

汪晓东,朱晓峰,李杰[5](2014)在《20kV配电网电压序列优化改造及应用》一文中研究指出根据我国社会用电负荷快速增长和配电网现状,阐述了目前10 k V供电存在的问题和困难,分析了选择20k V供电的合理性和可行性,从企业经济效益和社会效益两个方面阐述了20k V配电网电压序列优化改造的意义。通过桐乡公司20k V配电网改造的实践经验,验证了改造方案在具体实施中的可行性和经济性。(本文来源于《电子制作》期刊2014年24期)

姜紫莹,张翔,徐建刚[6](2014)在《改革开放以来我国城市旧城改造的进化序列与相关探讨——基于城市政体动态演进的视角》一文中研究指出城市政体理论认为影响城市发展的资源性要素分别由政府、市场、社会叁大主体掌控,叁大主体共同促进城市的健康发展。然而主体话语权的差异使得其对城市发展政策的影响力是不同的。本文结合改革开放以来中国社会经济发展的宏观背景,从城市政体动态视角,对旧城改造中叁大主体在改造效益侧重上的特征进行模拟分析,发现其博弈关系在效益偏向上显示出较大波动并逐渐趋向均衡的时空特征。文章最后就主体角色作用进行了概要探讨。(本文来源于《现代城市研究》期刊2014年04期)

殷德聪,许跃进,刘学会,杜鹤夷,倪文峰[7](2013)在《计及负荷增长的农网电压序列改造时机研究》一文中研究指出为合理确定农网电压序列改造时机,在科学构建农网结构模型的基础上,建立并推导了农网电压序列改造方案建设投资、运行维护费用、网络损耗费用以及原有设备残值等计算模型。计及规划期负荷动态增长特性,在改造方案年费用计算中,采用了电网设备与负荷增长比例相同步的逐年建设投运方式,给出了与之相对应的改造方案投资分配方法。同时,因现有改造决策对后续寿命周期电网建设投资的影响,导致后续改造周期的年费用难以计算,为此提出了设备建设投资的分摊处理思路和方法,有效解决了计及后续寿命周期改造方案经济性的方案优化比选难题。在此基础上,以单位面积年费用作为改造决策的经济性评价指标,建立了农网电压序列改造的经济比较模型。经算例分析,得出了220/110/35/10 kV电压序列农网改造为220/110/10 kV电压序列的合理时机及其改造后的经济效益,该结果验证了文中模型及方法的合理性。(本文来源于《电网技术》期刊2013年12期)

付新华,孙凤祥[8](2012)在《蛋白环形序列重组技术在脂肪酶分子改造中的应用》一文中研究指出脂肪酶的底物特异性与酶的催化效率是限制其规模化应用的瓶颈,传统的分子改造技术在对脂肪酶的空间结构改变及大分子底物的催化效率提升方面效果并不明显。在介绍现有的脂肪酶改造技术的基础上,重点介绍了新型蛋白分子改造手段-蛋白环形序列重组(CP)技术的原理及在脂肪酶基因工程改造方面的应用。(本文来源于《广东农业科学》期刊2012年16期)

冯欣欣[9](2012)在《施托克豪森钢琴曲Ⅴ-Ⅺ对序列理念的坚持与改造》一文中研究指出德国着名现代音乐作曲家卡尔海因茨·施托克豪森的《钢琴曲Ⅴ-Ⅺ》创作于20世纪50-60年代,文章围绕作品的创作形成、偶然手法表现以及序列理念的坚持叁个方面进行论述,探究了作曲家如何对序列创作进行试验与改造,也反映出当时的序列创作已经面临着巨大的发展阻力,施托克豪森通过对钢琴曲的实践,努力地为序列音乐探寻新的创作变化。(本文来源于《黄钟(中国.武汉音乐学院学报)》期刊2012年03期)

许伟,严明,欧阳平凯[10](2011)在《木糖异构酶序列结构特点、耐热机理及分子改造研究进展》一文中研究指出近年来,随着发展低碳经济的迫切需要,可再生资源利用研究方兴未艾,其中,构建充分利用木质纤维素水解产物木糖生产乙醇的重组菌成为研究热点。木糖异构酶由于不需要辅酶,成为构建利用木糖重组酵母的首选途径。文中对近年来木糖异构酶的研究进展进行了综述。首先介绍了木糖异构酶的基本性质、序列、结构和功能特性,然后对其耐热机理进行了总结归纳;重点阐述了基于序列及结构进行的酶分子改造研究,包括底物特异性改造、热稳定性改造等;同时,结合作者的研究经历,对如何提高嗜热木糖异构酶在常温下的活性进行了探讨。最后,对木糖异构酶的研究进展进行了总结和展望,对基于结构改善木糖异构酶催化活性及构建新型高效利用木糖生产乙醇的重组菌具有重要的指导意义。(本文来源于《生物工程学报》期刊2011年12期)

序列改造论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

论文主要研究了两个方面的内容。一是对人白细胞介素2基因序列进行了改造和优化。首先将人白细胞介素2基因编码序列(CDS)改造成大肠杆菌的高表达模式,选用了大肠杆菌高表达基因的核糖体结合位点(Shine-Dalgarno sequence,简称SD)序列,作为对比还选用了大肠杆菌低表达基因的SD序列。然后组装成“高表达SD+改造后CDS”和“高表达SD+改造前CDS”基因对照组;“高表达SD+改造后CDS”和“低表达SD+改造后CDS”基因对照组。前者主要考察改造CDS对基因表达的影响,后者主要检验SD序列的优化选择对基因表达的影响。二是将组装的两组基因序列在大肠杆菌TOP10中克隆及表达,通过实验来验证改造和优化后人白细胞介素2基因(hIL-2)表达水平的理论预测。理论推测改造后的hIL-2基因编码序列在大肠杆菌中的表达水平为CAI=0.884,原hIL-2基因编码序列在大肠杆菌中的表达水平为CAI=0.267。为了保证编码基因表达的正常启动,选取大肠杆菌rplL高表达基因的启动子区和终止子区来代替hIL-2基因的启动子区和终止子区。其中高表达SD序列选用该基因的SD序列,低表达SD序列选用了前期研究给出的低表达基因的SD序列来替代rplL基因的SD序列。通过重组表达载体pBV220/hIL-2进行基因表达。实验上首先通过SDS-PAGE跑胶定性,之后利用ELISA分别对经过3h、4h、5h 42℃诱导后的表达蛋白定量检测。结果显示:(1)在“高表达SD+改造后CDS”和“高表达SD+改造前CDS”基因对照组中,CDS改造后的蛋白表达量极显着的高于CDS改造前的蛋白表达量,且蛋白表达量提高了131.41%,实验结果与理论预测吻合,这说明基因经过改造编码区后的蛋白表达量比原基因的蛋白表达量有明显的提高。(2)在“高表达SD+改造后CDS”和“低表达SD+改造后CDS”基因对照组中,高表达SD序列所对应基因的蛋白表达量显着高于低表达SD序列所对应基因的蛋白表达量,蛋白表达量提高了36.55%,表明高表达SD序列本身会提高基因的表达水平。实验结果验证了我们的理论预测。总之,通过改造基因编码序列和优化基因启动区域中的SD序列均会显着提高外源基因在宿主细胞中的蛋白表达水平。本文的研究方法对于提高转基因效率具有重要的参考价值。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

序列改造论文参考文献

[1].于荣荣.改造和优化人干扰素α-2b基因序列并在大肠杆菌中做表达验证[D].内蒙古大学.2019

[2].李瑞瑞.改造人白细胞介素2基因序列并在大肠杆菌中做表达验证[D].内蒙古大学.2019

[3].徐五,周倩,胡朝阳,李国辉,姚勤.家蚕二分浓核病毒ns1基因序列的改造、表达和鉴定[J].微生物学杂志.2017

[4].杨宇.序列场景中央美术学院#501教室改造[J].室内设计与装修.2016

[5].汪晓东,朱晓峰,李杰.20kV配电网电压序列优化改造及应用[J].电子制作.2014

[6].姜紫莹,张翔,徐建刚.改革开放以来我国城市旧城改造的进化序列与相关探讨——基于城市政体动态演进的视角[J].现代城市研究.2014

[7].殷德聪,许跃进,刘学会,杜鹤夷,倪文峰.计及负荷增长的农网电压序列改造时机研究[J].电网技术.2013

[8].付新华,孙凤祥.蛋白环形序列重组技术在脂肪酶分子改造中的应用[J].广东农业科学.2012

[9].冯欣欣.施托克豪森钢琴曲Ⅴ-Ⅺ对序列理念的坚持与改造[J].黄钟(中国.武汉音乐学院学报).2012

[10].许伟,严明,欧阳平凯.木糖异构酶序列结构特点、耐热机理及分子改造研究进展[J].生物工程学报.2011

论文知识图

5 基于核酸适体序列改造与纳米金...测序确证DNA序列改造正确。测序比对结果基因改造序列分析图谱接受朝鲜文字序列的状态转移图(KCS-A...

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