高密度和高表达论文-胡建恩,曹茜,杨帆,房耀维,王淑军

高密度和高表达论文-胡建恩,曹茜,杨帆,房耀维,王淑军

导读:本文包含了高密度和高表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:耐高温α-淀粉酶,大肠杆菌BL21,发酵培养基,发酵条件

高密度和高表达论文文献综述

胡建恩,曹茜,杨帆,房耀维,王淑军[1](2012)在《耐高温α-淀粉酶高密度高表达发酵条件的优化》一文中研究指出通过摇瓶实验对产耐高温α-淀粉酶的重组菌E.coli BL21的高密度高表达发酵条件进行研究。考察不同培养基和不同发酵条件对该菌株产耐高温α-淀粉酶的影响,并利用正交试验进行优化。结果表明:在葡萄糖0.5g/L,酵母粉15g/L,pH6.5,诱导时机为接种后发酵4h,诱导时间为6h,IPTG添加量为0.8mmol/L,接种量为体积分数3%的优化条件下,该重组菌发酵液菌体生物量为原来的1.29倍,酶活力达到8.754U/mL,是原来的1.55倍,目的蛋白的表达量也为原来的1.24倍。(本文来源于《食品科学》期刊2012年01期)

胡爽,蔡海波,蒋加庆,谭文松[2](2009)在《重组大肠杆菌HT02高密度高表达HT-1融合蛋白发酵过程优化》一文中研究指出发酵工艺放大是将实验室成果产业化的必要一环,随着发酵规模的扩大,工艺流程也会有相应的调整,导致微生物所处的生长环境以及生长代谢状态的改变,从而影响大体积发酵罐的发酵水平。本文以一株产HT-1融合蛋白的重组大肠杆菌HT02为研究对象,在200L发酵罐中研究了分批补料培养时菌体生长与HT-1融合蛋白表达的特性,通过采用提前诱导、增加接种量的手段,解决了因增加二级种子培养工艺而导致的200L发酵罐中HT-1融合蛋白表达水平下降的问题,最终使菌体密度、HT-1融合蛋白表达水平、融合蛋白细胞得率以及融合蛋白体积得率分别达到55.1g·L-1、27.4%、0.056g·(gcell)-1和3.103g·L-1,较工艺改进前发酵水平分别提高了9.8%、23.4%、14.3%和25.2%,实现了在200L发酵罐中高密度高表达发酵,为HT-1工业化生产提供了指导。(本文来源于《化工学报》期刊2009年12期)

温传彬,倪楠,田宁[3](2009)在《重组大肠杆菌高表达高密度发酵研究》一文中研究指出大肠杆菌是重组基因工程技术的重要载体,目前市场上很多重组蛋白产品采用大肠杆菌表达系统,如干扰素、胰岛素等产品.影响重组大肠杆菌高表达高密度发酵的主要因素有宿主菌的类型、培养基的组成、培养条件等.(本文来源于《Programme and Abstracts of the International Symposium on Medical and Pharmaceutical Biotechnology》期刊2009-04-27)

杨炜,王伟刚,田海英,许伟,温传彬[4](2006)在《重组大肠杆菌高表达高密度发酵研究》一文中研究指出大肠杆菌高密度高表达发酵技术是现代发酵工程的重要研究课题,此项技术可以有效地提高大肠杆菌的产量和外源重组蛋白的表达量,该文就影响大肠杆菌高密度发酵的主要因素如宿主菌类型、培养基组成、培养条件、生长抑制物质、补料调控等进行了阐述和讨论。(本文来源于《生物技术》期刊2006年03期)

马文峰,庄英萍,郭美锦,丁满生,储炬[5](2005)在《两次诱导实现重组大肠杆菌高密度、高表达研究》一文中研究指出通过不同温度诱导模式对大肠杆菌高密度,高表达的研究,确定两次升温诱导模式实现大肠杆菌高密度、高表达重组人载脂蛋白的目的。实验证实两次诱导成功的避免了乙酸对高密度、高表达的影响,最终发酵的细胞密度OD600达150,蛋白表达量4.8g·L-1,证明两次升温诱导的发酵方法在高密度、高表达外源蛋白上是成功的,从而为基因工程菌规模化生产奠定了基础。(本文来源于《微生物学通报》期刊2005年02期)

庄英萍,马文峰,丁满生,储炬,张嗣良[6](2004)在《重组大肠杆菌两次诱导高密度、高表达代谢通量分析》一文中研究指出微生物细胞代谢过程是分子尺度、细胞尺度及反应器介尺度等多尺度的,为了实现代谢过程的最优化,我们必须对代谢过程进行跨尺度的测量与控制;代谢过程的另一显着特点,即生命过程所特有的信息流、物质流、能量流是在不断的变化的,而且具有“变化着的结构”。利用基因工程菌表达活性蛋白是非常重要的应用性技术,而在工程菌的(本文来源于《第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)》期刊2004-11-01)

徐帆洪,吴腾捷,路煜,叶凡,王月红[7](2004)在《高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化》一文中研究指出目的在构建高表达INF-alb重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺。方法采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术。结果发酵密度A_(600)可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右。经破菌、离心、离子交换和分子筛凝胶过滤得到INF-alb 纯品,FPLC 测定纯度为100%,活性为4.99×10~7U/ml,比活为2.5×10~7U/mg,按2000版《中国生物制品规程》检测,均符合要求。结论发酵纯化工艺适用于规模化生产。(本文来源于《首届长叁角科技论坛——长叁角生物医药发展论坛论文集》期刊2004-10-01)

[8](2000)在《表达重组人红细胞生成素细胞株的高密度、高表达培养》一文中研究指出先将工程细胞在含有 5 %胎牛血清的DMEM -F12培养基中培养 ,待细胞总数达到 2× 10 8个以上时 ,接种到 5L生物反应器中。用含有血清的培养 7d后转为无血清CHO专用培养基 ,继续培养 30天。在整个培养过程中 ,采用流加的方式连续培养(本文来源于《药物生物技术》期刊2000年04期)

窦鸿,李民,毛积芳,陈常庆[9](2000)在《高密度培养大肠杆菌TG1/pGEX-hCT和高表达重组人降钙素》一文中研究指出目的 :高密度、高表达培养重组大肠杆菌 TG1/p GEX- h CT,生产重组人降钙素 (rh CT)。 方法和结果 :应用 NBSBio Flo30 0 0型 5 L 自控发酵罐 ,采用分批培养和补料分批培养相结合的培养技术 ,控制碳源和氮源的补加 ,控制溶解氧 ,使重组菌 E.coli TG1/p GEX- h CT发酵光密度 [D(6 0 0 ) ]达到 5 8.6 ,人降钙素和 GST融合蛋白 (GST- h CT)的含量达到 3.2 g/L。结论 :本研究为工业化生产重组 h CT奠定了基础。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2000年03期)

邹钟诚,胡明[10](1999)在《表达重组人红细胞生成素细胞株的高密度、高表达培养》一文中研究指出用生物反应器培养能表达重组人红细胞生成素的工程细胞,使其达到高密度高表达。方法:先将工程细胞在含有5%胎牛血清的 DMEM-F12培养基中培养,待细胞总数达到 2×10~8个以上时,接种到5 L生物反应器中。用含有血清的培养基培养 7d后转为无血清CHO专用培养基,继续培养 30 d。在整个培养过程中,采用流加的方式连续培养,根据情况随时测定培养基中葡萄糖浓度,使其保持高于0.5g/L,同时监测氨及乳酸盐浓度,避免浓度过高。每日采样测定收获液中红细胞生成素含量与活性,培养结束后,以0.25%胰酶消化载体,待细胞全部脱落后计数细胞总量。 结果:细胞密度达 6×10~6个/ml培养液,表达量约 30 000 IU/ml左右,且表达的红细胞生成素具有较高的生物比活性。结论:在较为适当的培养条件下,利用生物反应器可使工程细胞的培养达到高密度、高表达。(本文来源于《中国生化药物杂志》期刊1999年03期)

高密度和高表达论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

发酵工艺放大是将实验室成果产业化的必要一环,随着发酵规模的扩大,工艺流程也会有相应的调整,导致微生物所处的生长环境以及生长代谢状态的改变,从而影响大体积发酵罐的发酵水平。本文以一株产HT-1融合蛋白的重组大肠杆菌HT02为研究对象,在200L发酵罐中研究了分批补料培养时菌体生长与HT-1融合蛋白表达的特性,通过采用提前诱导、增加接种量的手段,解决了因增加二级种子培养工艺而导致的200L发酵罐中HT-1融合蛋白表达水平下降的问题,最终使菌体密度、HT-1融合蛋白表达水平、融合蛋白细胞得率以及融合蛋白体积得率分别达到55.1g·L-1、27.4%、0.056g·(gcell)-1和3.103g·L-1,较工艺改进前发酵水平分别提高了9.8%、23.4%、14.3%和25.2%,实现了在200L发酵罐中高密度高表达发酵,为HT-1工业化生产提供了指导。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

高密度和高表达论文参考文献

[1].胡建恩,曹茜,杨帆,房耀维,王淑军.耐高温α-淀粉酶高密度高表达发酵条件的优化[J].食品科学.2012

[2].胡爽,蔡海波,蒋加庆,谭文松.重组大肠杆菌HT02高密度高表达HT-1融合蛋白发酵过程优化[J].化工学报.2009

[3].温传彬,倪楠,田宁.重组大肠杆菌高表达高密度发酵研究[C].ProgrammeandAbstractsoftheInternationalSymposiumonMedicalandPharmaceuticalBiotechnology.2009

[4].杨炜,王伟刚,田海英,许伟,温传彬.重组大肠杆菌高表达高密度发酵研究[J].生物技术.2006

[5].马文峰,庄英萍,郭美锦,丁满生,储炬.两次诱导实现重组大肠杆菌高密度、高表达研究[J].微生物学通报.2005

[6].庄英萍,马文峰,丁满生,储炬,张嗣良.重组大肠杆菌两次诱导高密度、高表达代谢通量分析[C].第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下).2004

[7].徐帆洪,吴腾捷,路煜,叶凡,王月红.高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化[C].首届长叁角科技论坛——长叁角生物医药发展论坛论文集.2004

[8]..表达重组人红细胞生成素细胞株的高密度、高表达培养[J].药物生物技术.2000

[9].窦鸿,李民,毛积芳,陈常庆.高密度培养大肠杆菌TG1/pGEX-hCT和高表达重组人降钙素[J].第二军医大学学报.2000

[10].邹钟诚,胡明.表达重组人红细胞生成素细胞株的高密度、高表达培养[J].中国生化药物杂志.1999

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