时间分辨荧光免疫分析论文_吕梦雨,牛晓君,彭志芳,胡蹦,荣天悦

导读:本文包含了时间分辨荧光免疫分析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:荧光,时间,免疫,蛋白,口蹄疫,可溶性,毒素。

时间分辨荧光免疫分析论文文献综述

吕梦雨,牛晓君,彭志芳,胡蹦,荣天悦[1](2019)在《时间分辨荧光免疫分析在环境中的应用进展》一文中研究指出时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)作为一种新型的超微量分析技术,不断应用于环境痕量分析领域,在检测环境中的有机污染物、生物毒素等方面发挥了重大作用。该文论述了近年来开发的TRFIA新系统,阐述了TRFIA在检测环境中的药物残留、生物毒素及化工试剂等方面的研究进展,并在此基础上对其应用前景进行了分析,展望了其在检测新兴有机污染物方面的巨大潜力。(本文来源于《环境科学与技术》期刊2019年08期)

温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲[2](2019)在《I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立》一文中研究指出目的构建基于时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)的高灵敏性、高特异性的I型志贺毒素(StxI)双抗体夹心免疫检测法,用于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法采用两株针对StxI不同表位的单克隆抗体2F6-F8和8E7-E6,构建双抗体夹心TRFIA,并评价该方法的灵敏度、特异性以及稳定性;以PCR检测stxI基因结果为金标准,以TRFIA、ELISA、Duopath~?Verotoxins免疫胶体金检测试剂盒,检测54例StxI毒素粗提物,比较灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和与PCR法的一致性。结果建立的以StxI为靶向分子的TRFIA,可以在2h内完成对StxI检测,检测最大稀释倍数为1:1 000的StxI阳性菌株毒素粗提物样本,灵敏度比ELISA提高了约2个数量级。Stx I的TRFIA与StxII型无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。与PCR方法相比,TRFIA灵敏度(93.8%)高于ELISA(82.4%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(57.1%),差异有统计学意义(P<0.05);其特异性(100.0%)、阳性预测值(100.0%)、阴性预测值(97.4%)均大于等于ELISA(分别为97.2%、93.3%、92.1%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(分别为100.0%、100.0%、87.0%);TRFIA检测结果与PCR一致性(Kappa=0.955)高于ELISA(Kappa=0.809)法和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(Kappa=0.664)。结论成功构建StxI-TRFIA快速检测方法检测样品中StxI毒素,为TRFIA在毒素检测方面的推广应用提供了依据。(本文来源于《江苏预防医学》期刊2019年04期)

陈华鑫[3](2019)在《均相时间分辨荧光免疫分析检测降钙素原方法的建立》一文中研究指出本研究成功合成出两种稀土荧光螯合剂并对通过核磁氢谱与质谱对结构进行确认,对它们的荧光性质的研究结果显示两种稀土荧光螯合剂均保持有叁价铕离子的特征激发峰与发射峰,其中Eu~(3+)?bpy.bpy.py(CO_2H)_2的最大激发波长为312nm,最大发射波长为598nm和615nm,Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2的最大激发波长为311nm,最大发射波长为597nm和616nm。两种稀土螯合剂的荧光强度均与浓度呈线性相关,线性方程分别为Eu~(3+)?bpy.bpy.py(CO_2H)_2:y=310x-565.98,R~2=0.999;Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2:y=310x-1930,R~2=0.999。荧光寿命分别为1064μs与398μs;量子产率分别为10.1%与12.1%。两种稀土螯合剂的荧光性质满足时间分辨荧光免疫分析的需求。以Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2为基础进行修饰,合成并通过质谱确认得到Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NHCOCH_2OCH_2COOH_2]_2。最大激发波长为312nm,最大发射波长为598nm和615nm,荧光强度与浓度线性方程为y=310x-1041.4,R~2=0.999。利用DCC/NHS作为脱水剂,在DMAP的催化作用下使螯合剂与抗降钙素原检测抗体(anti-PCT detection antibody)相结合。优化标记条件后通过发现Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NHCOCH_2OCH_2COOH_2]_2与抗体最佳标记条件为:螯合剂与DCC/NHS的摩尔比为1:4:6,室温反应6h,与抗体蛋白以20:1的摩尔比反应10h,可以得到标记比为10的稀土荧光螯合剂标记抗体。ELISA检测结果确认标记后抗体蛋白效价为1:800。利用标记的抗降钙素原检测抗体(anti-PCT detection antibody)与抗降钙素原包被抗体(anti-PCT coating antibody)构建检测降钙素原的时间分辨免疫荧光分析方法,实验结果表明,anti-PCT coating antibody的最佳稀释比例为1:200,anti-PCT detection antibody的最佳稀释比例为1:400,最佳孵育时间为60min,在0.5~50ng/mL浓度范围内,检测荧光信号强度与抗原浓度呈线性相关,线性方程为y=2552.6x+4.8222,R~2=0.9928,灵敏度为0.5ng/mL,CV<10%,重复性良好,与常见临床标志物AFP,CEA,CRP无交叉反应。(本文来源于《长春理工大学》期刊2019-06-01)

王旭,孙雨,王睿男,肖颖,蒋菲[4](2019)在《牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立》一文中研究指出为研究快速定量检测牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,试验通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中表达可溶性的3A-3B融合蛋白,并基于纯化的可溶性融合蛋白建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒。结果表明:建立的方法能够检测牛血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的牛类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对300份临床牛血清样品进行检测,同Procheck公司的口蹄疫非结构蛋白抗体试剂盒进行比较,阳性样品符合率96%,阴性样品符合率93.3%,总的符合率95.7%。重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。文章首次建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法,同传统的ELISA方法相比,该检测方法特异性相当、敏感性更高,操作更简单、快速,具有较高的应用推广价值。(本文来源于《中国草食动物科学》期刊2019年03期)

赵颖,王瑶,肖盟,吴卫,杨启文[5](2019)在《一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原的性能评估》一文中研究指出目的评估一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原(PCT)的性能。方法采用第叁方质控品朗道PCT质控品两个水平(高值和低值)对其进行精密度检测。分别采用朗道高值质控品和患者混合高值血浆对其进行线性检测。选取103例患者的血液标本,与参考方法生物梅里埃VIDAS 30进行方法学比对。结果精密度方面,朗道两个水平的质控待评估方法变异系数均<10%。线性方面,采用朗道高值质控和患者混合高值血浆来检测线性范围,待考核方法检测值与理论值的r2均达到>0.99的要求。采用临床标本进行相关性分析时,测量结果的差值对均值的Bland-Altman分析及测量结果比值对均值的Bland-Altman分析显示二者的相关性较好。待考核方法与VIDAS 30的Spearman相关系数为0.98,P<0.000 1。结论待考核方法定量检测全血PCT,操作简便,具有较好的精密度,在检测临床标本时与生物梅里埃VIDAS 30检测PCT有较好的一致性,适用于急诊检查和床旁检测。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2019年10期)

孙雨,宋晓晖,肖颖,毕一鸣,王睿男[6](2019)在《口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立》一文中研究指出为建立快速定量检测羊血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,本研究通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中获得了可溶性的3A-3B1-3B2融合蛋白,基于纯化的可溶性融合蛋白建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒。该方法能够检测羊血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对300份临床血清样品进行检测,同Procheck公司的口蹄疫非结构蛋白抗体试剂盒进行比较,阳性样品符合率为98%,阴性样品符合率为92%,总符合率为95%。重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法同传统的ELISA方法相比,特异性相当、敏感性更高,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年07期)

黄睿,贾海英,王昌敏[7](2018)在《全自动时间分辨荧光免疫分析系统EASYCUTA分析方法性能验证》一文中研究指出目的建立时间分辨荧光免疫的方法学性能验证方案和实验方法。方法参考CNAS-CL02:《医学实验室质量和能力认可准则》(ISO 15189:2012)对医学实验室检测系统性能评价的相关要求,结合实际工作需求,设计实验验证方案,并对全自动时间分辨荧光检测仪EASYCUTA测定乙肝五项,TP-Ab,HCV-Ab,HIV-Ab的精密度、正确度、线性分析测量范围、可检测极限、参考区间、分析灵敏度,抗干扰能力,交叉污染,方法学对比等进行验证和评价,并将检测结果与厂商(苏州新波公司)提供的性能指标进行比较。结果 EASYCUTA全自动时间分辨荧光检测系统检测HBV-M,TP,HCV,HIV项目的精密度、正确度、分析测量范围、可报告范围、参考区间、分析灵敏度、抗干扰能力、交叉污染,等均符合国际公认质量要求。方法学比对中,乙肝五项与Rochee601的阴阳性符合率>95%、K值评级为"优"。术前四项(HBsAg、TP、HCV、HIV)与Abbott i2000的阴阳性符合率>95%、K值评级为"优"。方法学对比合格。结论 EASYCUTA全自动时间分辨荧光检测仪测定乙肝五项,TP-Ab,HCV-Ab,HIV-Ab的主要分析性能验证结果与厂商说明书提供的分析性能一致,能够满足临床要求。本研究对规范医学实验室建设以及提供仪器检测质量具有重要的意义。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2018年11期)

陆扬帆,黄飚,马鑫[8](2018)在《瞬时受体电位通道5时间分辨荧光免疫分析法的建立和验证》一文中研究指出目的以瞬时受体电位通道5(TRPC5)作为乳腺癌肿瘤耐药标志物,建立乳腺癌耐药体外诊断方法。方法采用时间分辨荧光技术建立TRPC5时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),以TRPC5-血蓝蛋白(KLH)为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗TRPC5抗体;黏蛋白(MUC1)抗体包被免疫磁珠处理样本;TRPC5多肽包被96孔板为固相抗原,与游离TRPC5共同竞争有限的抗TRPC5抗体;用Eu3+-羊抗兔抗体进行示踪。结果 TRPC5 TRFIA的敏感性为1 ng/m L,精确度测量范围为5~500 ng/m L,各孔计数值变异系数(CV)为5.5%,平均回收率为94.6%,运用TRFIA检测,3个效应点检测值ED80、ED50、ED20分别为(4.68±0.13)、(321.66±2.77)和(714.42±4.07)ng/m L,经过临床样本检测发现化疗耐药患者的样本检测结果与化疗耐受尚可患者相比,差异有统计学意义(P<0.000 1)。结论 TRPC5 TRFIA可对乳腺癌化疗耐药及化疗尚可患者进行区分,具有临床应用意义,值得进一步研究。(本文来源于《检验医学》期刊2018年05期)

梁荣良[9](2018)在《基于时间分辨荧光微球的免疫分析技术平台的建立及临床应用》一文中研究指出时间分辨荧光微球是一种性能优异的新兴免疫标记物,本研究将时间分辨荧光微球作为标记物应用于免疫层析平台与磁分离时间分辨免疫分析平台上,并对两平台进行全面而准确的试剂性能评价和临床可行性评估。本课题实验内容主要分为叁大部分:(1)研制基于铕螯合物荧光微球的免疫层析定量检测NGAL试纸条;(2)研制基于铕螯合物荧光微球的免疫层析定量检测Anti-HBc试纸条;(3)研制基于时间分辨荧光微球的AFP/Freeβ-HCG双标记磁分离时间分辨荧光免疫分析试剂。实验设计涵盖了建立和优化反应体系、在最优的反应体系下全面评价自制试剂的各项性能指标作,包括剂量-反应曲线、分析灵敏度、准确度、精密度、特异性、抗干扰性分析以及临床可行性。实验一结果:(1)基于铕螯合物荧光微球的免疫层析定量检测NGAL试纸条的分析灵敏度为0.30 ng/mL,线性范围达10~6000 ng/mL。回收率在96.80%~108.08%之间,准确度好;分析内和分析间变异系数分别在为5.23%~8.19%和7.02%~9.24%之间;未与高浓度的α1-MG、HGF、α1-AAG和MMP-2发生交叉反应,且不受高浓度血红蛋白、甘油叁酯、胆红素干扰,特异性良好。用ELISA法和本试剂测定114例尿液样本进行线性相关分析,r=0.9846(P<0.001),显着相关。实验二结果:(1)基于铕螯合物荧光微球的免疫层析定量检测Anti-HBc试纸条的分析灵敏度为0.31 IU/mL,线性范围为0.63~640 IU/mL。回收率在92.95%~97.12%之间,分析内和分析间变异系数分别在为5.63%~7.79%和6.93%~9.82%;测定与乙型肝炎相关病毒感染患者的抗体阳性血清样本,结果表明无明显交叉反应;高浓度血红蛋白、甘油叁酯、胆红素也不会对检测产生干扰,特异性良好。用雅培CMIA法和本试剂对231例血清样本进行检测,特异性符合率为95.90%,敏感性符合率为99.08%,经配对卡方检验,P=0.219,两种检测方法无显着差异,结合κ系数检验,κ=0.948(P<0.001),P=0.000,两种方法吻合度强;用TRFIA法和本试剂测定108例血清做线性相关分析,r=0.9605(P<0.001),显着相关。实验叁结果:(1)基于时间分辨荧光微球的AFP/Freeβ-HCG双标记磁分离时间分辨荧光免疫分析试剂AFP、Free β-HCG的分析灵敏度分别为0.10 IU/mL、0.35ng/mL,线性范围分别为2~480 IU/mL、3~200ng/mL。回收率结果分别在93.8%~100.36%之间(AFP)和 97.8%~106.47%之间(Free β-HCG),分析内和分析间变异系数均<10%;未与高浓度CEA、CA125、CA15-3、CA19-9、HCG、LH、FSH、TSH及HAS发生交叉反应,高浓度血红蛋白、甘油叁酯、胆红素也不会对检测产生干扰,特异性良好。TRFIA法和自制试剂测定134例血清样本做线性相关分析,r=0.9869和0.9904(P<0.001),显着相关。本课题成功建立两个基于时间分辨荧光微球的免疫分析技术平台,具有灵敏度高、线性范围宽及快速检测的优点,临床应用前景十分广阔。(本文来源于《南方医科大学》期刊2018-05-01)

邓岚兰,陈海霞,安军,张洪涛,刘静仪[10](2018)在《CFP10蛋白时间分辨荧光免疫分析法在结核性胸腔积液中的诊断价值》一文中研究指出目的 对基于时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)诊断结核性胸腔积液的新方法进行临床评价。方法 共收集191例疑似结核性胸腔积液标本。采用TRFIA检测胸腔积液标本中结核分枝杆菌培养滤液蛋白-10(CFP10),并与培养、涂片及T.SPOT.TB进行比较。结果 有效检测标本174例,其中100例临床综合诊断为结核性胸腔积液,74例诊断为非结核性胸腔积液。以临床综合诊断为金标准,CFP10蛋白时间分辨荧光免疫分析法(CFP10-TRFIA)检测结核性胸腔积液患者的敏感度为42%(42/100)高于细菌学方法(P<0.05),特异性为90.5%(67/74)优于T.SPOT.TB(P<0.05),阳性预测值为84%(42/50),阴性预测值为53.2%(66/124)。其中24例培养阳性患者中,CFP10-TRFIA共检测出24例。结论 CFP10-TRFIA可提高结核性胸腔积液的检出率,可作为结核性胸腔积液的快速诊断工具并为临床及时治疗提供参考。(本文来源于《医学研究杂志》期刊2018年04期)

时间分辨荧光免疫分析论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建基于时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)的高灵敏性、高特异性的I型志贺毒素(StxI)双抗体夹心免疫检测法,用于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法采用两株针对StxI不同表位的单克隆抗体2F6-F8和8E7-E6,构建双抗体夹心TRFIA,并评价该方法的灵敏度、特异性以及稳定性;以PCR检测stxI基因结果为金标准,以TRFIA、ELISA、Duopath~?Verotoxins免疫胶体金检测试剂盒,检测54例StxI毒素粗提物,比较灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和与PCR法的一致性。结果建立的以StxI为靶向分子的TRFIA,可以在2h内完成对StxI检测,检测最大稀释倍数为1:1 000的StxI阳性菌株毒素粗提物样本,灵敏度比ELISA提高了约2个数量级。Stx I的TRFIA与StxII型无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。与PCR方法相比,TRFIA灵敏度(93.8%)高于ELISA(82.4%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(57.1%),差异有统计学意义(P<0.05);其特异性(100.0%)、阳性预测值(100.0%)、阴性预测值(97.4%)均大于等于ELISA(分别为97.2%、93.3%、92.1%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(分别为100.0%、100.0%、87.0%);TRFIA检测结果与PCR一致性(Kappa=0.955)高于ELISA(Kappa=0.809)法和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(Kappa=0.664)。结论成功构建StxI-TRFIA快速检测方法检测样品中StxI毒素,为TRFIA在毒素检测方面的推广应用提供了依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

时间分辨荧光免疫分析论文参考文献

[1].吕梦雨,牛晓君,彭志芳,胡蹦,荣天悦.时间分辨荧光免疫分析在环境中的应用进展[J].环境科学与技术.2019

[2].温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲.I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立[J].江苏预防医学.2019

[3].陈华鑫.均相时间分辨荧光免疫分析检测降钙素原方法的建立[D].长春理工大学.2019

[4].王旭,孙雨,王睿男,肖颖,蒋菲.牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立[J].中国草食动物科学.2019

[5].赵颖,王瑶,肖盟,吴卫,杨启文.一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原的性能评估[J].检验医学与临床.2019

[6].孙雨,宋晓晖,肖颖,毕一鸣,王睿男.口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立[J].中国兽医科学.2019

[7].黄睿,贾海英,王昌敏.全自动时间分辨荧光免疫分析系统EASYCUTA分析方法性能验证[J].标记免疫分析与临床.2018

[8].陆扬帆,黄飚,马鑫.瞬时受体电位通道5时间分辨荧光免疫分析法的建立和验证[J].检验医学.2018

[9].梁荣良.基于时间分辨荧光微球的免疫分析技术平台的建立及临床应用[D].南方医科大学.2018

[10].邓岚兰,陈海霞,安军,张洪涛,刘静仪.CFP10蛋白时间分辨荧光免疫分析法在结核性胸腔积液中的诊断价值[J].医学研究杂志.2018

论文知识图

微囊藻毒素时间分辨荧光免疫分析全自动时间分辨荧光时间分辨荧光免疫分析仪原理示意...时间分辨荧光免疫分析原理示意...不同反应体系的TRFIA曲线几种免役分析方法检测灵敏度的比较

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