dlt操纵子赋予苏云金芽胞杆菌对阳离子抗菌肽的抗性和对昆虫的毒力（英文）

论文摘要

【目的】革兰氏阳性菌中的dlt操纵子编码细胞壁中磷壁酸发生D-丙氨酰化修饰所必需的酶。D-丙氨酰化使细胞表面产生正电荷,并因此排斥带正电的分子,例如阳离子抗菌肽,从而赋予对宿主的抗性。本文中,我们研究了dlt操纵子对苏云金芽胞杆菌表型性状的影响及在对昆虫毒力中发挥的作用。【方法】通过同源重组构建了Δdlt ABt基因缺失突变株,并对其进行形态学观察、表面电荷差异分析、抗逆性分析和毒力测定。【结果】结果表明,dlt A的失活显著降低了细胞表面的净负电荷,对阳离子抗菌肽（多粘菌素B和溶菌酶）的抗性和碱耐受性显著下降。同时,Δdlt ABt的生长曲线发生明显改变,细胞表面粗糙且形状不规则,生物膜形成减少和群游运动能力增强。此外,dlt A的失活降低了对昆虫中肠上皮细胞的粘附能力,并减弱了对家蚕的毒力。【结论】研究结果表明,dlt操纵子介导的磷壁酸发生D-丙氨酰化修饰与苏云金芽胞杆菌的许多表型性状密切相关,并且在苏云金芽胞杆菌对昆虫的致病性及抵抗昆虫体液免疫保护中具有重要作用。

论文目录

• 1 Materials and Methods
•   1.1 Bacterial strains,plasmids,and growth conditions
•   1.2 Construction of dlt A mutant in Bt BMB171strain
•   1.3 Construction of complementation strain forΔdlt ABt
•   1.4 Growth curve
•   1.5 Scanning electron microscopy（SEM）
•   1.6 Alcian blue binding assay
•   1.7 Susceptibility to CAMPs
•   1.8 Autolysis assay
•   1.9 p H sensitivity assay
•   1.1 0 Biofilm microtiter plate assay
•   1.1 1 Swarming assay
•   1.1 2 Cell binding assay
•   1.1 3 In vivo pathogenicity assay
•   1.1 4 Statistical analysis
• 2 Results
•   2.1 Analysis of dlt operon in Bt BMB171 and construction of dlt A mutant
•   2.2 Inactivation of dlt A alters the surface charge of Bt cell
•   2.3 Effects of dlt operon on growth kinetics,lysis,and cell morphology
•   2.4 dlt operon is required for resistance to CAMPs
•   2.5 Inactivation of dlt A impairs the tolerance of Bt to alkaline
•   2.6 D-alanylation of TAs is involved in biofilm formation
•   2.7 D-alanylation of LTAs has a negative impact on swarming motility
•   2.8 dlt operon is crucial for special binding to mid-gut epithelial cell of insect
•   2.9 Inactivation of dlt A greatly attenuates virulence to insect
• 3 Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 邬欢,王海文,朱丽,魏旭艳,王兵,宋春旭,余子全

关键词: 苏云金芽胞杆菌,操纵子,阳离子抗菌肽,昆虫,抗性,毒力

来源: 微生物学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 湖南师范大学生命科学学院,淡水鱼类发育生物学国家重点实验室,格罗宁根大学分子遗传学系,格罗宁根生物分子科学与生物技术研究所

基金: Supported by the National Basic Research Program of China(2013CB127504),the Natural Science Foundation of Hunan Province(2015JJ2098),the Scientific Research Fund of Hunan Provincial Education Department(17A132)~~

分类号: Q93

DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180457

页码: 1897-1914

总页数: 18

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