非生物胁迫下小麦TaGAPCp1基因启动子的功能分析

论文摘要

探究质体形式的GAPCp （Plastidial glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）基因启动子响应干旱、盐和外源ABA等非生物胁迫的机理.首先从中国春小麦中克隆得到TaGAPCp1基因上游1 985 bp的核苷酸序列,经Plant CARE数据库分析表明,该启动子含有众多防御和逆境响应元件（defense and stress-responsive ele-ments,DSREs）,激素响应元件（hormone-responsive elements,HREs）和光响应元件（light-responsive ele-ments,LREs）.从小麦数据库下载Ta GAPCp亚家族基因启动子序列,序列对比分析表明,该亚家族成员启动子上功能元件种类相近但数量相差较大.构建含TaGAPCp1基因启动子的表达载体,通过农杆菌介导法转化烟草并进行ABA (100μmol·L-1)、PEG8000 （20%）、Na Cl (250 mmol·L-1)和4℃低温处理,组织化学染色显示TaGAPCp1基因启动子能驱动GUS基因的表达但活性明显低于Ca MV35S,GUS活性分析显示TaGAPCp1基因启动子能响应非生物胁迫.通过农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,经潮霉素和羧苄青霉素筛选及叶片PCR检测,最终获得稳定遗传的转基因拟南芥20株,并得知转基因拟南芥中的GUS基因能被干旱胁迫显著诱导表达.

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 启动子克隆
•     1.2.2 扩增片段生物信息学分析
•     1.2.3 植物表达载体构建
•     1.2.4 农杆菌介导转化烟草叶片
•     1.2.5 组织化学染色与GUS活性检测
•     1.2.6 拟南芥遗传转化 （花序侵染法）
•     1.2.7 转基因植株的筛选
•     1.2.8 逆境下转基因拟南芥GUS基因的表达分析
• 2 结果与分析
•   2.1 启动子克隆及序列分析
•   2.2 启动子的同源性比对
•   2.3 组织化学染色
•   2.4 GUS活性检测
•   2.5 拟南芥转化与阳性植株的鉴定
•   2.6 非生物胁迫下转TaGAPCp1启动子拟南芥GUS基因的表达分析
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 魏文杰,邓霞,杨淑慎

关键词: 小麦,基因启动子,逆境胁迫,稳定表达

来源: 福建师范大学学报(自然科学版) 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,农作物

单位: 西北农林科技大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金资助项目(31271625,31271609),黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室专项(10502)

分类号: Q943.2;S512.1

页码: 76-84

总页数: 9

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