导读:本文包含了脱落酸结合蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:脱落酸,蛋白,层析,亲和,受体,果实,引物。
脱落酸结合蛋白论文文献综述
沈元月[1]（2003）在《脱落酸（ABA）结合蛋白基因克隆、表达及其产物对ABA的特异结合》一文中研究指出脱落酸(abscisic acid，ABA)作为一种植物激素，已证实不仅在调控植物休眠、衰老和果实发育等诸多过程中起着重要的调节作用，而且，在植物对干旱、低温、盐碱等逆境胁迫的反应中起着共同凋节因子的作用。在ABA到达作用位点后，ABA应答反应的第一步是一系列的细胞信号感知和识别，其中，ABA受体对原初信号的识别起着关键的作用。利用ABA类似物能够激活不同的应答途径，推测在植物不同的组织结构中存在多种的ABA受体。尽管，通过遗传学、生物化学、细胞生物学方法，ABA结合蛋白的研究取得了巨大的进展。但是，遗憾的是至今仍然还未鉴定出任何可能的ABA受体。因此，真正意义上的ABA受体确定仍待做大量的工作。 近年来，我室利用亲和层析从蚕豆下表皮中分离出一种高亲合、高度特异性的ABA结合蛋白，并完成了对其生化特性深入分析及部分测序，且在一定程度上揭示了该蛋白与ABA的生理功能效应存在着内在的联系，这为进一步克隆ABA结合蛋白基因奠定了坚实的工作基础。本研究是在此基础上以基于测序的部分氨基酸序列设计的简并寡核苷酸为扩增引物，结合RT-PCR和RACE技术从蚕豆幼叶中克隆得到了两个全长cDNA序列，并建立了该基因甲醇酵母高效表达体系，通过ProBond resin镍亲和层析一次可纯化出毫克级表达蛋白，为ABA结合蛋白生理功能的进一步鉴定迈出了坚实的一步。 3′-／5′-RACE扩增片段序列分析结果表明，ABP370扩增片段的全长cDNA为3449核苷酸，其中5′非翻译区为876个核苷酸，3′非翻译区为369个核苷酸并末端带Poly(A)尾巴，从起始密码子ATG至终止密码子TGA，含有一个编码768个氨基酸残基的开放阅读框架(2304bp)；ABP640扩增片段的全长cDNA为1012核苷酸，其中5′非翻译区为88个核苷酸，3′非翻译区为144个核苷酸并末端带Poly(A)尾巴，从起始密码子ATG至终止密码子TAA，含有一个编码260个氨基酸残基的开放阅读框架(780bp)。 利用PCR技术将上述两个全长cDNA的编码区克隆到表达载体pMETα上，使之位于α因子信号肽序列的下游，6个组氨酸残基序列的上游，且与之同框，分别构建成融合蛋白分泌表达载体pMETαB／ABP2304和pMETαA／ABP780。通过LiCI化学转化法将构建的重组质粒插入到甲醇酵母PMAD16菌株的染色体上。筛选Ade+表型转化子，20ml BMMY摇瓶培养，用0.5％甲醇诱导表达5天后，SDS-PAGE检测结果表明：选出的重组高效表达菌株PMAD16／pMETαB／ABP2304和PMAD16／pMETαA／ABP780都存在明显的表达特异条带，分子量分别为75kD和55kD，分别占其总蛋白的30％和10％，经过ProBond Resin镍亲和层析柱都得到了纯化，其纯度都在90％以上，一次纯化分别可得到大约15mg和7mg表达蛋白，推知表达量分别高达0.75g／L和0.35g／L以上。~3H-ABA微量放射配基结合法实验结果表明，75kD纯化蛋白显示出较高的特异结合活性，55kD纯化蛋白无显着的特异结合活性。(本文来源于《中国农业大学》期刊2003-05-01）
郑志富,金振华,周燮,夏凯,马诚[2]（1998）在《一种与核酸复合的脱落酸结合蛋白》一文中研究指出用抗脱落酸 (Abscisicacid ,ABA)结合蛋白 (ABBP)血清作为探针筛选玉米cDNA表达文库 ,从 2 0 0 0 0 0个独立噬斑中 ,仅获得 1个编码多肽的cDNA克隆 ,它与动物的某些核酸结合蛋白基因的同源性高达 6 0 %～ 6 5 % .此外 ,获得 1 2 0个编码玉米 1 7SrRNA的cDNA克隆 .鉴于此 ,对经ABA亲和纯化所得的ABBP及其抗血清进行了复查 .发现rRNA伴随ABBP而存在 ;该抗血清除能识别ABBP外 ,还能识别rRNA ,推断某些ABBP具有与核糖核酸结合的性质 ,即能与rRNA形成复合物(本文来源于《中国科学C辑:生命科学》期刊1998年01期）
张大鹏,张子连,陈珈[3]（1996）在《葡萄果实发育过程中脱落酸结合蛋白动力学特性的变化》一文中研究指出联系葡萄果实发育不同阶段生长动态、果肉组织中糖、酸和ＡＢＡ 含量变化的测定， 利用微量放射配基结合法，通过Ｓｃａｔｃｈａｒｄ 作图，分析了巨峰葡萄（Ｖｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａ×Ｖ． ｌａｂｒｕｓｃａ）果实生长发育第Ⅰ期、第Ⅱ期、始熟期和第Ⅲ期膜联系的ＡＢＡ 结合蛋白的动力学特性参数，其解离常数（Ｋｄ） 依次分别为１７．５、５０．０、６．３、１３．３ ｎｍ ｏｌ／Ｌ；最大结合容量依次分别为９８．６、５２３．０、４１．６、８５．４ ｐｍ ｏｌ／ｇ 蛋白。这４ 个时期的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ 图都是一条直线， 说明在同一发育时期，果实微粒体上可能存在一种相同的或若干种不同的但动力学特性相同或相似的高亲和力的ＡＢＡ 结合位点。ＡＢＡ 结合蛋白与ＡＢＡ 的亲和力在始熟期高于其它时期，特别是从第Ⅱ期到始熟期，亲和力提高了将近１０ 倍，而其浓度却在始熟期降到最低。始熟期果实组织中低浓度的ＡＢＡ 启动成熟的原因可能是由于ＡＢＡ 结合蛋白与ＡＢＡ 亲和力的提高。讨论了ＡＢＡ 结合蛋白在果实发育不同时期的功能，推测这种（些）蛋白可能是ＡＢＡ 作用的受体或载体(本文来源于《植物学报》期刊1996年12期）
吴忠义,陈珈,朱美君[4]（1996）在《光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白》一文中研究指出光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白吴忠义，陈珈，朱美君（北京农业大学生物学院，１０００９４）关键词结合蛋白；光亲和标记；ＡＢＡ；受体；微粒体脱落酸（ＡＢＡ）作为一大类植物激素，在高等植物的生长发育以及对逆境的适应过程中发挥着重要作用。在探讨激素作用的...(本文来源于《生物化学与生物物理学报》期刊1996年06期）
夏凯,周燮[5]（1996）在《脱落酸结合蛋白的纯化及抗体制备》一文中研究指出以脱落酸（ＡＢＡ）为配基，分别通过其Ｃ１位和Ｃ４′位偶联的亲和层析柱对玉米根尖中的膜ＡＢＡ结合蛋白（ＡＢＢＰ）进行了纯化，其中，用Ｃ１偶联的亲和柱具有较高的纯化效率；对比了以尿素和硫氰化钾（ＫＳＣＮ）为解吸附剂的洗脱效果，发现使用后者（３ｍｏｌ／Ｌ）能得到纯净的ＡＢＢＰ；放射性配基结合分析（ＲＬ－ＢＡ）结果表明，经过亲和纯化后的ＡＢＢＰ具有受体的基本特性——专一结合ＡＢＡ的能力。以Ｃ１－ＡＢＢＰ和Ｃ４′－ＡＢＢＰ为免疫原，制备了２种多克隆抗体。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊1996年03期）
张子连,陈珈,张大鹏[6]（1996）在《葡萄果实中脱落酸结合蛋白的存在及其性质》一文中研究指出葡萄果实微粒体上存在高亲和力的脱落酸（ＡＢＡ）结合位点，这些位点与ＡＢＡ的结合具有饱和性，高亲和力及低容量，胰蛋白酶或ＤＴＴ处理可以使该位点的特异结合活性下降约９０％，表明此结合位点是一种蛋白质，故称为ＡＢＡ结合蛋白，它含有维系蛋白质特定构象的二硫键，该蛋白与ＡＢＡ反应的最适ｐＨ为６．０，说明与配基结合部位可能存在带有正电荷的氨基酸残基，结合活性在２５℃高于０℃，结合反应达到动态平衡需要３０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ以后结合活性随时间延长而下降。该蛋白与ＡＢＡ结合反应的平衡解离常数为１７．５ｎｍｏｌ／Ｌ，最大结合容量（Ｂｍａｘ）为９８．４ｆｍｏｌ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ。(本文来源于《生物化学杂志》期刊1996年04期）
万寅生,唐剑栋,张能刚,周燮,杜念兴[7]（1991）在《玉米根尖微粒体脱落酸结合蛋白的分离纯化与鉴定(简报)》一文中研究指出以玉米根尖为材料,经匀浆,分级离心得到微粒体,用丙酮、Triton X-100分步抽提得到富含脱落酸(ABA)结合蛋白的粗制品,再过ABA-BSA-Sepharose 4B亲和层析柱,用7mol/L尿素解脱得到纯化的ABA结合蛋白。ELISA阻断试验结果表明,玉米根尖微粒体ABA结合蛋白粗制品能部分阻断抗体对ABA-OA的结合,而经亲和层析得到的ABA结合蛋白高浓度能完全阻断抗体对ABA-OA的结合反应。(本文来源于《植物生理学通讯》期刊1991年05期）
万寅生,徐义俊,周燮[8]（1988）在《黄瓜根细胞质膜脱落酸特异性结合蛋白的初步研究》一文中研究指出笔者在前期的研究中发现ABA能显着抑制黄瓜根质膜ATPase活性和H~+分泌,这些效应的机理何在?尽管一般认为ABA可能直接在质膜水平上起作用,但迄今证据尚乏。Hocking,Curvetto对ABA受体作了初步研究。Claudian和Weiler研究表明,蚕豆叶片气孔保卫细胞膜上存在ABA高亲和的结合部位,表现有ABA受体的性质和特点。我们以黄瓜苗(本文来源于《南京农业大学学报》期刊1988年S1期）
脱落酸结合蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
用抗脱落酸 (Abscisicacid ,ABA)结合蛋白 (ABBP)血清作为探针筛选玉米cDNA表达文库 ,从 2 0 0 0 0 0个独立噬斑中 ,仅获得 1个编码多肽的cDNA克隆 ,它与动物的某些核酸结合蛋白基因的同源性高达 6 0 %～ 6 5 % .此外 ,获得 1 2 0个编码玉米 1 7SrRNA的cDNA克隆 .鉴于此 ,对经ABA亲和纯化所得的ABBP及其抗血清进行了复查 .发现rRNA伴随ABBP而存在 ;该抗血清除能识别ABBP外 ,还能识别rRNA ,推断某些ABBP具有与核糖核酸结合的性质 ,即能与rRNA形成复合物
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脱落酸结合蛋白论文参考文献
[1].沈元月.脱落酸（ABA）结合蛋白基因克隆、表达及其产物对ABA的特异结合[D].中国农业大学.2003
[2].郑志富,金振华,周燮,夏凯,马诚.一种与核酸复合的脱落酸结合蛋白[J].中国科学C辑:生命科学.1998
[3].张大鹏,张子连,陈珈.葡萄果实发育过程中脱落酸结合蛋白动力学特性的变化[J].植物学报.1996
[4].吴忠义,陈珈,朱美君.光亲和标记鉴定玉米根脱落酸结合蛋白[J].生物化学与生物物理学报.1996
[5].夏凯,周燮.脱落酸结合蛋白的纯化及抗体制备[J].南京农业大学学报.1996
[6].张子连,陈珈,张大鹏.葡萄果实中脱落酸结合蛋白的存在及其性质[J].生物化学杂志.1996
[7].万寅生,唐剑栋,张能刚,周燮,杜念兴.玉米根尖微粒体脱落酸结合蛋白的分离纯化与鉴定(简报)[J].植物生理学通讯.1991
[8].万寅生,徐义俊,周燮.黄瓜根细胞质膜脱落酸特异性结合蛋白的初步研究[J].南京农业大学学报.1988
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