蛋鸡INHBA的克隆分析及其对卵泡发育调控的研究

论文摘要

试验旨在探讨INHBA（Inhibin subunit beta A）基因在鸡卵泡发育过程中的作用,为提高蛋鸡产蛋性能提供理论依据。首先从海兰褐蛋鸡各级卵泡组织中提取总RNA,经反转录后对INHBA CDS编码区进行克隆且进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量PCR法检测鸡INHBA在不同卵泡以及卵泡膜细胞和颗粒细胞中的表达规律。结果表明:扩增片段为1 547 bp,包含1 275 bp的编码区,编码424个氨基酸;海兰褐蛋鸡与日本鹌鹑、黄牛、绵羊、兔、猪、人、小鼠和非洲爪蛙的INHBA同源性分别为97.7%、78.2%、78.0%、77.4%、77.0%、72.8%、79.8%和72.8%,进化分析表明海兰褐蛋鸡的INHBA在进化过程中保守性较高,与日本鹌鹑关系最近,与哺乳动物相差也不远,与非洲爪蛙等两栖类动物相差最远。INHBA蛋白质理化性质分析表明,其属于弱酸性蛋白,不稳定,流动性较好。蛋白结构分析显示,其无跨膜域,N端有信号肽,无规则卷曲为整体的主要结构。不同卵泡INHBA表达显示,INHBA随着卵泡的发育表达量逐渐升高,并且在等级卵泡颗粒细胞中表达量最高,在等级卵泡颗粒细胞中添加低浓度促卵泡素（Follicle-stimulating hormone,FSH）处理后,INHBA表达显著升高,表明其在卵泡发育过程中可能受FSH的调控。研究结果可为后期INHBA功能以及其对鸡卵泡发育调控机制的研究提供一定的参考依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 主要试剂与仪器
•   1.3 引物设计
•   1.4 鸡卵泡原代颗粒细胞和膜细胞的分离培养与激素处理
•   1.5 总RNA的提取与反转录
•   1.6 PCR产物的克隆、鉴定及测序
•   1.7 海兰褐蛋鸡INHBA序列的生物信息学分析
•   1.8 INHBA表达qRT-PCR检测
•   1.9 统计与分析
• 2 结果与分析
•   2.1 卵泡、细胞总RNA提取
•   2.2 海兰褐蛋鸡INHBA的克隆及鉴定
•   2.3 海兰褐蛋鸡INHBA同源性比较及进化树构建
•   2.4 海兰褐蛋鸡INHBA蛋白理化性质分析
•   2.5 海兰褐蛋鸡INHBA蛋白结构和功能的生物信息学预测
•   2.6 INHBA在高低产蛋鸡卵巢组织中的表达
•   2.7 INHBA在海兰褐蛋鸡各级卵泡中的表达
•   2.8 INHBA在卵泡膜细胞和颗粒细胞中的表达变化
•   2.9 FSH对颗粒细胞中INHBA表达的影响
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孙君卫,马向飞,朱帅鹏,田亚东,康相涛,孙桂荣

关键词: 海兰褐蛋鸡,基因,克隆分析,卵泡发育

来源: 中国家禽 2019年22期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 畜牧与动物医学

单位: 河南农业大学牧医工程学院

基金: 现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-40-K04),国家自然科学基金(31872987)

分类号: S831.2

DOI: 10.16372/j.issn.1004-6364.2019.22.003

页码: 9-15

总页数: 7

文件大小: 2252K

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