膜片钳全细胞记录论文_王文伟,祁小燕,张雪梅

导读:本文包含了膜片钳全细胞记录论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,膜片,神经元,平滑肌,大鼠,电流,体视。

膜片钳全细胞记录论文文献综述

王文伟,祁小燕,张雪梅[1](2015)在《一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法》一文中研究指出目的:探讨一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法。此方法使玻璃电极与细胞内液保持电化学连续性,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜造成的破膜难和封接不稳,以及常规全细胞膜片钳破膜后造成的封接不稳。方法:以成骨细胞为研究对象,采用β-七叶素穿孔全细胞膜片钳技术,记录骨细胞L型钙通道电流。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到成骨细胞上L型钙通道电流。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究疾病中成骨细胞的病理生理机制提供实验基础。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2015年06期)

徐祖才,徐平,张骏,雷显泽,徐忠祥[2](2012)在《新生大鼠海马神经元原代培养及膜片钳全细胞记录》一文中研究指出目的探讨一种适用于膜片钳全细胞记录的海马神经元培养方法。方法选择鼠龄在1d内的Wistar大鼠,迅速断头,取双侧海马,神经基础培养基添加B-27及L-谷氨酰胺进行神经元原代培养,培养至第10天时,使用免疫荧光技术配合神经元特异性核蛋白NeuN进行细胞鉴定;神经元的电生理特征由膜片钳全细胞记录。结果该方法所培养神经元状态良好,经鉴定发现纯度可高达100%,通过膜片钳全细胞法可记录到自发性动作电位及自发性兴奋性突触后电流。结论本方法操作简便、高效,所培养的海马神经元状态良好,适用于膜片钳全细胞记录。(本文来源于《重庆医学》期刊2012年31期)

程俊,曾晓荣,刘智飞,李鹏云,李妙龄[3](2010)在《一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法》一文中研究指出目的:探讨一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法,使细胞内环境保持稳定,改善常规全细胞膜片钳破膜所造成的封接不稳定。方法:以人肠系膜动脉平滑肌细胞为研究对象,采用穿孔全细胞膜片钳技术,记录人肠系膜动脉平滑肌细胞上大电导钙激活钾通道(big-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)宏观电流以及自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)。结果:采用这种穿孔全细胞膜片钳技术,能有效记录到人肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa和STOCs。结论:穿孔膜片钳技术是一种简便而有效的记录全细胞电流的实验方法,该方法的建立为今后更深入的研究提供实验基础。(本文来源于《泸州医学院学报》期刊2010年03期)

张舟,章骏,孙传文[4](2009)在《膜片钳全细胞记录法在研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制中的应用》一文中研究指出为了研究中性氨基酸转运蛋白-谷氨酰胺转运蛋白的结构与功能,采用膜片钳全细胞记录法测定谷氨酰胺转运蛋白2介导的电流.结果表明:谷氨酰胺转运蛋白诱导了底物氨基酸和Na+浓度依赖性电流,可用于测定底物氨基酸和Na+对转运蛋白的表观亲和常数Km,SNAT2野生型对丙氨酸的表观亲和常数KmA la为(200±5)×10-6mol/L,对Na+的表观亲和常数KmNa为(100±7)×10-3mol/L.谷氨酸转运蛋白转运底物氨基酸过程是生电的过程,在膜电势负值时氨基酸转运电流增大,可用于转运机制的研究.因此膜片钳全细胞记录法是研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制的有效方法.(本文来源于《上海师范大学学报(自然科学版)》期刊2009年04期)

邵金平,杨卓[5](2008)在《快反应电压敏感染料脑片功能性成像结合全细胞膜片钳记录的体外研究》一文中研究指出在大脑的许多区域,局部回路的连接被分离成特定的层状体或神经纤维球,如海马、大脑新皮质和嗅球等。在解剖学上这些区域相互分隔。而功能成像对表现回路特征发挥着独(本文来源于《天津医药》期刊2008年04期)

查定军,王智明,薛涛,林颖,邱建华[6](2008)在《应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性》一文中研究指出为了深入了解耳蜗螺旋神经节(SG)神经元的基本电生理特点,本研究首先成功培养了急性分离的大鼠SG神经元,然后采用穿孔全细胞膜片钳记录技术观察了培养SG神经元的基本电生理特性。结果表明,可从培养的SG神经元记录到动作电位,且不同的SG神经元具有异质性的放电特征。上述结果提示穿孔全细胞膜片钳记录技术可用于体外培养耳蜗SG神经元的电生理特征研究,为开展听觉信息传导和调控的功能研究开辟了新途径。(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊2008年02期)

崔文玉,陈玉萍,汪海[7](2003)在《动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术》一文中研究指出目的 :介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法 ,并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法 :采用胶原酶Ⅰ (1mg ml)、木瓜蛋白酶 (5mg ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(1mg ml)、胶原酶Ⅰ (1mg ml)消化分离大鼠尾动脉平滑肌细胞 ;用链霉蛋白酶E(0 .5mg ml)灌流消化、分离得到豚鼠心室肌细胞。结果 :以上分离的细胞数量多 ,形态正常 ,胞壁光滑完整 ,活性好。于4℃无钙液中保存 ,8h内可用于膜片钳全细胞记录。记录出的外向电流可被钾通道阻断剂CsCl及TEA所阻断。结论 :用酶急性分离的动脉平滑肌和心室肌细胞应用于膜片钳研究中具有快速、经济、简便易行等优点。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2003年06期)

刘振伟,杨胜,张永祥[8](2003)在《在体大鼠膜片钳全细胞记录技术初探》一文中研究指出目的 :建立在体大鼠膜片钳全细胞记录方法。方法 :固定麻醉大鼠后对其顶叶皮层锥体神经元行全细胞记录。结果 :成功记录到顶叶内锥体层神经元电压门控性钠离子通道电流及自发突触活动电流。结论 :初步建立了在体大鼠膜片钳全细胞记录方法 ,但对记录的稳定性仍有待于进一步提高(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2003年03期)

涂娅莉,刘应兵,阴正勤,胡志安[9](2003)在《与视皮层脑片膜片钳全细胞记录相结合的生物素标记技术》一文中研究指出目的 在视皮层脑片膜片钳全细胞记录的同时 ,建立神经元的生物胞素标记技术。方法 利用盲法获得视皮层脑片膜片钳全细胞记录 ,在电生理记录的同时 ,Biocytin通过记录电极尖端灌注到所记录的细胞内 ,标记成功后再进行组织学染色。结果 能观察视皮层同一细胞的电生理和形态学特性及神经元之间的染色耦合。结论 本法操作简便 ,细胞标记成功率高 ,易于推广使用。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2003年01期)

罗层[10](2002)在《孤啡肽受体和大麻受体参与脊髓伤害性信息调节的细胞和分子药理学机制—薄片膜片钳全细胞记录技术》一文中研究指出孤啡肽受体和大麻受体是新近发现的两类G蛋白耦联型受体(Mollereau et al.,1994;Lachowicz et al.,1995;Pertwee,1997,1998)。随着受体的克隆,其内源性配体也相继被发现,它们分别是Nociceptin(又名Orphanin FQ)和Anandamide(N-arachidonoylethanolamide)。已经有研究表明这两类受体具有非常相似的作用,表现为抑制腺苷酸环化酶,开启多种类型神经元(如PAG,海马等)上的钾通道和抑制大鼠海马和背根节神经元上的钙电流。免疫组织化学和原位分子杂交实验结果显示这两类受体及其配体在脊髓背角浅层均有大量的分布(Anton et al.,1996;Farquhar-Smith et al.,2000)。行为学研究也观察到鞘内注入Nociceptin和大麻受体的激动剂如WIN 55,212-2(WIN-2)、Anandamide等均可在多种痛模型上(包括急性痛、持续性痛和慢性痛模型等)产生明显的抗伤害性作用(see Mogil & Pasternak,2001;Pertwee,2001 for review),由此可见Nociceptin—孤啡肽受体系统和Anandamide—大麻受体系统构成了内源性镇痛系统的重要组成部分。但是关于孤啡肽受体和大麻受体在脊髓水平参与伤害性信息传递的细胞和分子机制仍不清楚,大量的实验证 第 四军 医 大学博士学位论文 明脊髓背角胶状质(Substania gelatinos’ SG)在将伤害性信息从外周向中枢 传递的过程中起着重要的作用。故滩究首先应用脊髓薄片膜片钳全细胞记 录技术观察了在电压钳制下孤啡肽受体的内源性配体Nociceptin对脊髓背角 SG神经元膜电流的影响作用以及其对脊髓背角兴奋性和抑制性突触传递的 作用,其次观察了nand.----------de对脊髓背角SG神经元膜电流的影响作用以 及其对脊髓背角兴奋性突触传递的作用并将其作用与Capsaicin进行了比较 研究。本论文包括以下几个方面的研究内容: 1.Nociceptin在电压钳制下对成年大鼠脊髓背角SG神经元膜电流的影响 在钳制电压为刁0 mV的情况下,灌流给子 Nociceptin可以诱致脊髓背角 SG神经元产生一外向电流并且呈浓度依赖性,它的 ECS。值为 0二3卜M,Hill 系数为 l.5。l卜M Nociceptin诱致的卜向电流的平均幅度为 26土 5 pA (一 68X并且其翻转电位与钾离子的平衡电位基本相近…-4X在给予Nociceptin 之前灌流不同钾通道的阻断剂如 BaCI(100卜M;n-4)、4aminopyridine 卜AP;IInM;n一 4)和Tetrae山ylammoniuxn(TEA; 5 InM;n一 4),结果发现 Nociceptin诱致的外向电流可以被时”大大地抑制门制率为 56 i 8%),而 不受 4AP和 TEA的影响。灌流 m(Tetrodotoxm;lqM; n=4)和纳洛酮 (阿片类受体的非特异性桔抗剂;l卜* n=4)均对Nociceptin诱致的外向 电流也不产生任何作用。而当检测几种与孤啡肽受体有关的抑制剂的作用时 发现:Nocistatin(合成Nociceptin前体的产物,lpM)和CompB(孤啡肽 受体的非肽类桔抗剂,lpM)均对 Nociceptin诱致的外向电流产生了不同 程度的抑制,它们的抑制率分别为 18 土 4%(n-6)和 64土 10%*-7),而这 两种物质本身不弓1起 SG神经元膜电流的变化;而以往被公认为是孤啡肽受 体桔抗剂的[Phe’叭CH二-帆Gghnociceptm-(l-13)-NH*(Nociceptin的千生物; 1卜M)本身就可以引起SG神经元产生一外向电流,在这一外向电流的狙 上 NocicCptin引起的电流可以被大大地抑制,其抑制率为 56%切-8X 从上述结果我们可以看出Nocice加通过作用于SG神经元上的孤啡肽 受体来激活内向整流性钾通道从而使该神经元产生超级化;这个超级化的作 用可能参与了Nocic叩tin介导的抗伤害性作用。 2 第四军 医大学博士学位论文 2.NOOSOO*h口对传向脊髓背角SG神经元的兴奋性和抑制性突触传递的影 响 在i己录电极内液中加入 GDP书S、艳离子和 TEA(主要用于阻断突触 后的 G蛋白和钾通道的作用)的状况下,Nociceptin诱致的外向电流可以完 全被阻断。以下的实验都是在Nociceptin对SG神经元的超级化效应被完全 阻断的情况下进行的。在钳制电压为刁0 mV的状况下;NocicePtin可以明显 地抑制刺激AS纤维和C纤维诱发的单突触的兴奋。吐突触后电流(excitatory postsyn@tic currents,EPSCs的幅度,并且其对 C纤维 EPSC抑制的程度* 制率为扣 土6%,n一比)要强于对AS纤维EPSC的抑制(4制率为30土5%, n一 23;P<0.05)。Nociceptin对C纤维和A6纤维EPSC的抑末作用在0.l-imp 的浓度范围内呈明显的浓度依赖性,(本文来源于《第四军医大学》期刊2002-04-01)

膜片钳全细胞记录论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的探讨一种适用于膜片钳全细胞记录的海马神经元培养方法。方法选择鼠龄在1d内的Wistar大鼠,迅速断头,取双侧海马,神经基础培养基添加B-27及L-谷氨酰胺进行神经元原代培养,培养至第10天时,使用免疫荧光技术配合神经元特异性核蛋白NeuN进行细胞鉴定;神经元的电生理特征由膜片钳全细胞记录。结果该方法所培养神经元状态良好,经鉴定发现纯度可高达100%,通过膜片钳全细胞法可记录到自发性动作电位及自发性兴奋性突触后电流。结论本方法操作简便、高效,所培养的海马神经元状态良好,适用于膜片钳全细胞记录。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

膜片钳全细胞记录论文参考文献

[1].王文伟,祁小燕,张雪梅.一种有效记录成骨细胞L型钙通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法[J].中国病理生理杂志.2015

[2].徐祖才,徐平,张骏,雷显泽,徐忠祥.新生大鼠海马神经元原代培养及膜片钳全细胞记录[J].重庆医学.2012

[3].程俊,曾晓荣,刘智飞,李鹏云,李妙龄.一种有效记录人肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的穿孔全细胞膜片钳方法[J].泸州医学院学报.2010

[4].张舟,章骏,孙传文.膜片钳全细胞记录法在研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制中的应用[J].上海师范大学学报(自然科学版).2009

[5].邵金平,杨卓.快反应电压敏感染料脑片功能性成像结合全细胞膜片钳记录的体外研究[J].天津医药.2008

[6].查定军,王智明,薛涛,林颖,邱建华.应用穿孔全细胞膜片钳记录技术研究培养大鼠耳蜗螺旋神经节神经元的基本电生理特性[J].神经解剖学杂志.2008

[7].崔文玉,陈玉萍,汪海.动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术[J].军事医学科学院院刊.2003

[8].刘振伟,杨胜,张永祥.在体大鼠膜片钳全细胞记录技术初探[J].中国应用生理学杂志.2003

[9].涂娅莉,刘应兵,阴正勤,胡志安.与视皮层脑片膜片钳全细胞记录相结合的生物素标记技术[J].第叁军医大学学报.2003

[10].罗层.孤啡肽受体和大麻受体参与脊髓伤害性信息调节的细胞和分子药理学机制—薄片膜片钳全细胞记录技术[D].第四军医大学.2002

论文知识图

能显着缓解FSK引起的vlPAG脑区神...膜片钳工作原理示意图原代大鼠心肌细胞中表达Kv4.3蛋白的比...线虫CEP神经元的在体膜片钳全细胞采用“盲法”进行大鼠视皮层脑片膜一2膜片钳全细胞记录缺血缺氧再灌...

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