蛋白双向电泳论文-周琳,申加枝,段玉,王婷,王玉花

蛋白双向电泳论文-周琳,申加枝,段玉,王婷,王玉花

导读:本文包含了蛋白双向电泳论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:茶树,叶片,蛋白双向电泳,体系建立

蛋白双向电泳论文文献综述

周琳,申加枝,段玉,王婷,王玉花[1](2019)在《茶树叶片蛋白双向电泳体系建立与应用》一文中研究指出为开展茶树Camellia sinensis低温和干旱胁迫下差异蛋白的分离和鉴定,以抗逆性较强的茶树品种‘迎霜’为试材,通过对提取方法、IPG胶条pH范围、上样量、分离胶浓度、染色方法的比较,筛选适用于茶树叶片的蛋白质双向电泳体系。结果表明,采用TCA-丙酮法或Tris-HCl法提取叶片总蛋白,选用17 cm pH 4~7IPG胶条用于等电聚焦,选择1.6~2.2 mg上样量、13.5%聚丙烯酰胺凝胶进行分离,随后通过高敏考马斯亮蓝R-250法染色;最终,叶片各分子量的蛋白充分分离,获得的双向电泳图谱分辨率高、背景清晰、重复性好,适用于‘迎霜’低温和干旱胁迫下叶片差异蛋白分析。(本文来源于《亚热带植物科学》期刊2019年03期)

尹泽超,王玉婷,王耀杰,桑利群,罗秋香[2](2019)在《西藏巨柏双向电泳叶片总蛋白提取方法优化》一文中研究指出为了获取高质量的西藏巨柏叶片蛋白质,分别采用酚抽提法、TCA/丙酮法和改良的TCA丙酮法3种方法对西藏巨柏叶片进行总蛋白的提取,同时利用蛋白试剂盒(The 2-D Quant Kit)对蛋白质的浓度和纯度进行了分析测定,并通过蛋白质斑点数量及分布特征,最后确定了最佳蛋白提取方法。结果表明:对样品研磨的精细程度、丙酮清洗沉淀次数等操作细节均能影响提取结果,同时采用改良的TCA丙酮法提纯后的结果最佳。说明改良的TCA丙酮法可应用于西藏巨柏叶片后续的蛋白质组学研究。(本文来源于《中南林业科技大学学报》期刊2019年07期)

李贞彪,王军节,王鹏[3](2019)在《适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选》一文中研究指出为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电泳体系。结果表明:TCA/丙酮-SDS/酚抽提法所获得的蛋白质浓度为15.9 mg/mL,分别是其他叁种方法所得蛋白浓度的2.64、4.61和1.43倍;SDS-PAGE图谱中形成的条带数目最多、丰度最好;所获得的2-DE图谱背景清晰干净,无明显的横纵条纹,分辨率高,可辨别的蛋白质点数为1 138个,是TCA-丙酮法所分离蛋白点数的1.89倍。由此可知,TCA/丙酮-SDS/酚抽提法为链格孢菌蛋白提取的最优方法,该方法所提取的蛋白质适用于双向电泳分析及后续的蛋白质组学研究。(本文来源于《植物保护》期刊2019年03期)

和立穹,宋宗斌,邢曼玉,李正弈棋,吴璟[4](2019)在《吗啡耐受大鼠脊髓蛋白质组双向电泳图谱的建立与差异蛋白鉴定》一文中研究指出目的:建立吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织蛋白质组双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图谱,比较分析吗啡耐受大鼠腰段脊髓组织中蛋白质组的变化和差异表达,鉴定出差异表达的蛋白质点并进行验证。方法:将16只鞘内置管雄性SD大鼠随机分为吗啡耐受组(MT组,n=8)和生理盐水组(NS组,n=8),取其腰段脊髓组织蛋白以固相pH梯度等电聚焦(immobilized pH gradients isoelectric focusing,IPGIEF)为第一向,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electroporesis,SDS-PAGE)为第二向进行2-DE,应用PDQuest分析软件对考马斯亮蓝染色的2-DE图谱进行图像分析,对差异蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,并利用Mascot查询软件搜索SwissProt数据库进行生物信息学分析。采用蛋白质印迹法验证部分差异蛋白。结果:MT组和NS组大鼠脊髓组织2-DE图谱中各分离出约1 000个清晰的蛋白质点,其中明显差异表达的蛋白有36个。采用MALDI-TOF-MS分析,并利用Mascot查询软件搜索Swiss-Prot数据库,共搜索到14个蛋白质,与NS组比较,MT组中表达下调的蛋白质点有2个,表达上调的蛋白点有12个。采用蛋白质印迹法对其中的NADH脱氢酶及伽玛烯醇化酶蛋白质点进行验证,结果与蛋白质组学结果一致。结论:初步建立了吗啡耐受大鼠脊髓组织蛋白质组双向电泳图谱,证明吗啡耐受可以引起脊髓中多种蛋白质的表达改变。(本文来源于《中南大学学报(医学版)》期刊2019年04期)

陈凌艳,赖金莉,张力,赵婷,何天友[5](2019)在《适用于花叶唐竹叶片总蛋白的双向电泳体系的建立》一文中研究指出本研究以花叶唐竹二年生苗木的健康叶片为材料,采用3种不同的蛋白质提取方法(酚法, TCA-丙酮法, TCA-丙酮/酚法)、不同的上样量、不同p H值IPG胶条及不同等电聚焦方案等因素进行筛选和优化,以期获得最佳的花叶唐竹叶片总蛋白的提取方法,并建立适用、高效的花叶唐竹蛋白质双向凝胶电泳技术体系。结果表明,选择TCA-丙酮/酚法的蛋白得率高、纯度高,选择17 cm pH 5~8的线性IPG胶条,450μg的上样量以及60 000 Vhs的等电聚焦强度进行双向电泳,共检测到726个蛋白点,整体分布均匀,分离效果较好。本研究初步建立了花叶唐竹蛋白质双向电泳体系,有助于后续研究叶片呈色机理提供技术帮助。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年07期)

杨慧敏,吴良如,杨金来,潘雁红,郑友苗[6](2019)在《勃氏甜龙竹笋蛋白的提取及双向电泳分析》一文中研究指出为建立一套适于勃氏甜龙竹笋蛋白的双向电泳体系,分别采用TCA/丙酮法和改良TCA-酚法提取竹笋总蛋白,pH 3~10和pH 4~7的IPG胶条进行蛋白双向电泳研究。结果表明,TCA/丙酮法更适合勃氏甜龙笋总蛋白的提取,不仅具有更高的提取率,而且还能提取更多的蛋白种类;采用24 cm,pH 4~7线性IPG胶条,共分离出约1 196个蛋白点,比pH 3~10胶条获得更多的蛋白点数量,且蛋白点清晰可见,分辨率更高,分离效果更好。勃氏甜龙竹的竹笋蛋白主要是以等电点在pH 4~7,分子量集中在10~40 kDa范围内的低分子量酸性蛋白为主。(本文来源于《竹子学报》期刊2019年01期)

甄文轩,杨晓桐,郭歌扬,宋颖,赵雨薇[7](2019)在《大豆叶片蛋白响应干旱胁迫的双向电泳分析》一文中研究指出大豆是我国重要的农作物之一,蛋白质组学技术是解析植物响应逆境胁迫的重要工具之一。为进一步推进对响应干旱胁迫的大豆叶片蛋白的鉴定工作,以大豆幼苗的叶片为研究对象,用甘露醇溶液模拟干旱胁迫,处理24 h后提取叶片蛋白粉进行双向电泳分离和图谱差异分析。结果表明:采取叁氯醋酸(TCA)-丙酮沉淀法提取的叶片蛋白进行双向电泳分离能够得到稳定清晰的双向电泳蛋白图谱。采取PD-Quest软件对干旱胁迫下的大豆叶片蛋白表达图谱进行差异分析,共检测和匹配425个大豆叶片蛋白点,其中差异表达的蛋白点有101个,60个表达量上调,41个表达量下调。本研究结果表明有一部分大豆叶片蛋白响应了干旱胁迫。(本文来源于《大豆科学》期刊2019年01期)

杨金来,吴良如,潘雁红,杨慧敏,钟浩[8](2018)在《建瓯白笋及其竹叶蛋白双向电泳分析》一文中研究指出建瓯白笋属于毛竹笋,其肉质鲜嫩、通体洁白、口感脆甜。以建瓯白笋及其竹叶为原料,采用酚抽提法提取竹笋总蛋白,得到了2个质量浓度为11.13和9.98 mg·mL~(-1)的蛋白样品,并进行了总蛋白的双向电泳实验(pH=3~10)。结果表明,建瓯白笋及其竹叶中蛋白种类丰富,其蛋白点数分别为1 626个和900个,竹笋多于竹叶,也多于杭州余杭毛竹冬笋(1 024个);等电点主要集中在pH=5~7,建瓯白笋及其竹叶蛋白点分别为1 102个和589个,占总蛋白点数的67.8%和65.4%;建瓯白笋及其竹叶蛋白的分子量均主要分布在18~66 kDa,蛋白点个数分别为1 083(66.6%)和672(74.7%),以35~45 kDa范围最为集中。因此,建瓯白笋及其竹叶是一种潜在的天然优质植物蛋白源。(本文来源于《竹子学报》期刊2018年04期)

李雯煜,张梅娟,马天意,沙伟[9](2018)在《砂藓总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化》一文中研究指出为进行砂藓(Racomitrium canescens)蛋白质组学的研究工作,获得质量较好的砂藓总蛋白质是首要前提,因此,需要建立一套完整高效的适用于砂藓的双向电泳体系。本研究以砂藓为研究对象,对试剂盒(北京索莱宝有限公司,BC3720)法、Tris-酚抽提法和TCA/丙酮法提取的砂藓总蛋白质进行了评估,比较了3种蛋白质提取方法所获得蛋白质的浓度、单向SDS-PAGE电泳结果中蛋白质条带的完整性和分辨率,同时对双向电泳结果进行分析比较,以筛选最优的砂藓总蛋白质提取方法。通过比较不同IPG胶条pH范围与蛋白质上样量对砂藓总蛋白质双向电泳体系进行优化,以得到更好的双向凝胶电泳效果。结果表明:3种方法中Tris-酚抽提法获得的砂藓总蛋白质浓度最高,为8.46493μg/μL,单向SDSPAGE电泳条带清晰且较完整,双向电泳后获得的蛋白点最多,是叁种方法中提取砂藓蛋白质浓度最高完整性最好的方法;进一步对基于Tris-酚抽提法提取的砂藓总蛋白质双向电泳体系进行优化,结果显示利用pH范围为4-7的IPG胶条,蛋白上样量为1000μg的条件下,获得的砂藓蛋白质双向电泳图谱蛋白质点最多,图谱中可分辨的蛋白质点共(712±10)个,且低丰度蛋白质点清晰。本研究筛选出的方法获得了蛋白质点分布均匀、背景清晰、分辨率高、质量高的双向电泳图谱,建立了砂藓蛋白质组学研究体系的较好方法。可为砂藓蛋白质组学研究奠定良好基础。(本文来源于《中国植物学会八十五周年学术年会论文摘要汇编(1993-2018)》期刊2018-10-10)

熊朝伟,阮成江,吴波,杜维,韩平[10](2019)在《沙棘果肉与种子蛋白双向电泳-质谱体系建立》一文中研究指出为了建立一套适用于沙棘蛋白质的双向电泳-质谱体系,本研究采用TCA-丙酮法提取沙棘果肉和种子蛋白,选用24 cm、pH=4~7的IPG预制干胶条进行等电聚焦,聚焦后进行12%SDS-PAGE二向分离和考马斯亮蓝染色,并应用PDQuest软件对图谱进行分析。结果表明:(1)沙棘果肉有800~1 000个蛋白点,峰密度在240密度单位以上的蛋白点有305个,其中相对表达量较高的蛋白有32个,果肉的酸性蛋白较碱性蛋白数量多;(2)沙棘种子有700~900个蛋白点,峰密度在40密度单位以上的蛋白点有314个,其中相对表达量较高的蛋白有17个;(3)随机选取6个蛋白点做质谱分析,在数据库中成功鉴定到6个同源蛋白。本研究首次建立了一套较完整的沙棘果肉与种子蛋白双向电泳-质谱体系,可为应用蛋白组学方法研究沙棘油脂合成积累的分子机制提供科学依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年08期)

蛋白双向电泳论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了获取高质量的西藏巨柏叶片蛋白质,分别采用酚抽提法、TCA/丙酮法和改良的TCA丙酮法3种方法对西藏巨柏叶片进行总蛋白的提取,同时利用蛋白试剂盒(The 2-D Quant Kit)对蛋白质的浓度和纯度进行了分析测定,并通过蛋白质斑点数量及分布特征,最后确定了最佳蛋白提取方法。结果表明:对样品研磨的精细程度、丙酮清洗沉淀次数等操作细节均能影响提取结果,同时采用改良的TCA丙酮法提纯后的结果最佳。说明改良的TCA丙酮法可应用于西藏巨柏叶片后续的蛋白质组学研究。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

蛋白双向电泳论文参考文献

[1].周琳,申加枝,段玉,王婷,王玉花.茶树叶片蛋白双向电泳体系建立与应用[J].亚热带植物科学.2019

[2].尹泽超,王玉婷,王耀杰,桑利群,罗秋香.西藏巨柏双向电泳叶片总蛋白提取方法优化[J].中南林业科技大学学报.2019

[3].李贞彪,王军节,王鹏.适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选[J].植物保护.2019

[4].和立穹,宋宗斌,邢曼玉,李正弈棋,吴璟.吗啡耐受大鼠脊髓蛋白质组双向电泳图谱的建立与差异蛋白鉴定[J].中南大学学报(医学版).2019

[5].陈凌艳,赖金莉,张力,赵婷,何天友.适用于花叶唐竹叶片总蛋白的双向电泳体系的建立[J].分子植物育种.2019

[6].杨慧敏,吴良如,杨金来,潘雁红,郑友苗.勃氏甜龙竹笋蛋白的提取及双向电泳分析[J].竹子学报.2019

[7].甄文轩,杨晓桐,郭歌扬,宋颖,赵雨薇.大豆叶片蛋白响应干旱胁迫的双向电泳分析[J].大豆科学.2019

[8].杨金来,吴良如,潘雁红,杨慧敏,钟浩.建瓯白笋及其竹叶蛋白双向电泳分析[J].竹子学报.2018

[9].李雯煜,张梅娟,马天意,沙伟.砂藓总蛋白双向电泳研究体系的建立与优化[C].中国植物学会八十五周年学术年会论文摘要汇编(1993-2018).2018

[10].熊朝伟,阮成江,吴波,杜维,韩平.沙棘果肉与种子蛋白双向电泳-质谱体系建立[J].分子植物育种.2019

标签:;  ;  ;  ;  

蛋白双向电泳论文-周琳,申加枝,段玉,王婷,王玉花
下载Doc文档

猜你喜欢