导读:本文包含了逆转录聚合论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:逆转录,病毒,链式反应,定量,荧光,菜豆,植物检疫。
逆转录聚合论文文献综述
张菊侠,杨万福[1]（2019）在《基于85B mRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应对肺结核分枝杆菌感染的诊断价值》一文中研究指出目的探讨痰液样本中检测结核分枝杆菌(MTB)85B mRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对MTB感染的诊断价值。方法分别纳入2016年1月至2016年12月陕西省结核病防治院经痰培养法(BACTEC MGIT 960系统)确诊为MTB阳性患者60例为试验组,60例无MTB感染的健康人为对照组。提取痰液样本核酸,分别采用TaqMan法检测MTB基因中编码16S rRNA的DNA序列和RT-qPCR法检测MTB的85B mRNA,比较两种方法的诊断效能(敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性)。结果 TaqMan法诊断MTB感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为93.3%、83.3%、84.9%、92.6%和88.3%;RT-qPCR法分别为98.3%、95.0%、95.2%、98.3%和96.7%。通过二元Logistics回归分析证实基于85B mRNA的RT-qPCR法对MTB感染鉴别能力更强(OR=19.924,95%CI:5.364～73.012,P <0.001)。结论基于结核分枝杆菌85B mRNA的RTqPCR方法能够快速、有效诊断MTB感染。(本文来源于《中华实验和临床感染病杂志(电子版)》期刊2019年04期）
张阳,孙涛,徐聪林,周冲[2]（2019）在《登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价》一文中研究指出目的建立快速简便的登革病毒检验方法对控制登革热疫情至关重要。方法本研究首次建立了一种登革病毒的RT-RPA-LFD检测技术,结果本研究建立的RT-RPA-LFD检测技术能同时检测四种血清型的登革病毒,具有较好的重复性,特异性高,对乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒、黄热病毒和塞卡病毒没有交叉检测,并且具有较高的检测灵敏度,对四种血清型的登革病毒检测限都低至10拷贝/反应。结论综合考虑其快速性和操作简便性,RT-RPA-LFD是一种非常有前景的登革病毒一线检测技术。(本文来源于《口岸卫生控制》期刊2019年03期）
马磊,曾繁文,丛锋,袁文,朱余军[3]（2019）在《小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立》一文中研究指出小鼠是科学研究中使用最多的实验动物,小鼠诺如病毒(MNV)是试验小鼠感染率最高的病毒性病原,因此MNV感染小鼠将影响研究结果,及时对小鼠健康状态进行监测必不可少。本研究根据逆转录重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA),通过引物探针的筛选,建立了检测MNV的RT-RPA方法。该方法具有较好的敏感性和特异性,通过荧光扩增曲线判定样本中是否含有MNV,在20 min内即可实现样本的检测。将该方法应用于临床样本的检测,结果显示32个样本中有6个阳性,和RT-qPCR检测结果总符合率达到97%。该方法的建立对于试验小鼠的日常病原监测和MNV流行病学研究具有重要意义。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年05期）
李楠,王佳慧,李凤琴,江涛[4]（2018）在《不同水源中GⅡ型诺如病毒实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测方法建立及应用》一文中研究指出目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoV GⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 ,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoV GⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法 ;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoV GⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoV GⅡ的检测,饮用水被NoV GⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。(本文来源于《中国食品卫生杂志》期刊2018年06期）
张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬[5]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒》一文中研究指出菜豆荚斑驳病毒(bean pod mottle virus,简称BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物,建立快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,简称RT-RPA)技术用于对BPMV的检测。根据BPMV基因组的保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,简称RPA)技术特异性引物,对BPMV、南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus,简称SBMV)、大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,简称SMV)、南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,简称Ar MV)及烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,简称TRSV)共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,以验证RT-RPA方法的灵敏性。结果表明,建立的RT-RPA检测方法能够从BPMV样品中检测到198 bp的特异性条带,且仅需在40℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;特异性验证试验表明,除BPMV能检测到特异性条带外,其他4种病毒SBMV、SMV、Ar MV、TRSV均未检测到特异性条带,证明该方法特异性好; RT-RPA检测BPMV的灵敏度达到10-4稀释度,说明所建立的RT-RPA方法灵敏性高。综上所述,建立的RT-RPA方法检测BPMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年21期）
袁俊杰,魏霜,龙阳,马新华,杨卓瑜[6]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增技术(RT-RPA)检测大豆花叶病毒》一文中研究指出大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种在全世界广泛分布并且破坏性极大的植物病毒,可以导致大豆产量骤减以及种质的衰退,为此,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),利用该技术可以快速、准确、有效地检测大豆中携带的SMV。根据Gen Bank数据库中SMV的外壳蛋白基因序列,设计RPA特异性引物,采用SMV、BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,验证RT-RPA方法的灵敏性。结果显示,建立的RT-RPA检测方法能够从SMV样品中检测到154 bp的特异性条带;特异性验证试验表明除SMV能检测到特异性条带以外,其他4种病毒BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV均未检测到条带;RT-RPA检测SMV的灵敏度达到10-4稀释度。综上所述,本研究建立的RT-RPA方法检测SMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《检验检疫学刊》期刊2018年02期）
高蕾,燕勇,王恒辉,吉季梅,葛志坚[7]（2016）在《基于SpeedStar HS DNA聚合酶的高速逆转录PCR方法在流感病毒检测中的应用》一文中研究指出目的使用具有高扩增效率的Speed Star HS DNA聚合酶建立快速、可靠的RT-PCR反应体系,应用于流感病毒核酸检测工作,以提高工作效率、缩短检测周期。方法建立优化的基于Speed Star HS DNA聚合酶的高速RT-PCR体系,并与应用较广的Takara one step Prime Script RT-PCR试剂盒比较。2种方法通过对A型和B型流感的基因标准品的一系列10倍稀释液分别检测,比较两者的分析灵敏度、反应时间、扩增效率等。通过对150份流感阳性样品进行检测,比较两者的诊断灵敏度。结果 2个PCR反应体系的灵敏度相当,最低检出限均为10 copy/μl阳性标准品,均有较好的扩增效率,达到90%以上。对150份阳性样本检测的结果表明2种方法有较好的一致性。结论基于Speed Star HS DNA聚合酶的高速RT-PCR反应体系较之Takara one step Prime Script RT-PCR试剂盒灵敏度相当,都有很好的扩增效率,且反应抑制性小,整个PCR时间更短,可应用于流感病毒检测工作,且能明显提高实验室检测的工作效率。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2016年13期）
马拥军,吴勇,胡少龙,南丽,郑雅萍[8]（2016）在《基于多重逆转录-聚合酶链式反应和毛细管电泳的腹泻病原体多重检测体系建立》一文中研究指出目的为患者提供一种新型的多重(19种)腹泻病原体的检测方案,用于临床快速诊断。方法利用NCBI数据库设计19种腹泻病原体及内参的特异性引物;建立多重逆转录-聚合酶链式反应(mRT-PCR)体系;用GeXP遗传分析系统对PCR产物进行毛细管电泳分离,从而对19种腹泻病原体进行鉴别。结果 100例腹泻样本中阳性样本为85例,阴性样本为15例,共出现单病原体感染32例,混合感染53例,与测序结果一致。19种病原体特征峰均有出现,且各个峰之间分离良好,未见交叉现象。结论利用GeXP分析平台联合mRT-PCR技术同时检测19种腹泻病原体的方法,具有高通量、灵敏度高、特异性强且检验速度快等优点,此方法有可能满足临床医生对腹泻病原体检测的需求,从而指导临床治疗。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2016年09期）
张天宇[9]（2016）在《DNA聚合酶和逆转录酶对双脱氧鸟苷叁磷酸的分子识别研究》一文中研究指出病毒对人体细胞的感染主要体现为持续性的大量复制,病毒复制受控于其基因组。因此,控制病毒基因组的复制在病毒感染治疗领域尤为重要。核酸类药物做为病毒病治疗的重要药物之一,其主要作用机制是控制病毒核酸的复制,从而降低感染水平,使机体恢复抵抗力和正常功能。核酸类药物研究的一个重要方面即是评估各种修饰后的核苷分子对不同聚合酶的作用效果,因此需要建立相应的检测方法。本项研究主要采用荧光定量PCR技术检测了体外DNA聚合酶和反转录酶对合成的L/D型的双脱氧鸟苷酸识别和掺入情况,筛选具有较好抗病毒活性的先导化合物或核酸类药物,为进一步考察其在生物体内的状况提供临床前基础数据,同时建立异核苷酸掺入检测的方法。实验表明,L/D型双向脱氧鸟苷叁磷酸能够被DNA聚合酶识别,并且随着掺入比例的增加,达到了抑制其扩增的效果。其中L型掺入范围为0.8mmol/L~1.6mmol/L,并随着掺入量的增加,扩增效率逐渐降低,当掺入浓度超过1.6mmol/L时,DNA扩增完全被抑制;D型掺入范围为1.6mmol/L~3.2mmol/L,随着掺入量的增加,扩增效率逐步降低,当掺入浓度超过3.2mmol/L时,扩增完全被抑制。以病毒DNA聚合酶和HIV逆转录酶为靶点,针对L/D型双脱氧鸟苷酸开展酶识别研究,有望发现新结构类型抗HIV和抗HBV感染的药物,并阐明作用机制,对控制和治愈病毒性传染疾病的发生具有深远的意义。(本文来源于《长春师范大学》期刊2016-05-01）
丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛[10]（2015）在《评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验方法在麻疹监测中的价值》一文中研究指出目的评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法在麻疹病毒感染病例中的诊断价值。方法分析2014年天津市麻疹监测信息报告管理系统报告数据,运用χ~2检验(Chi-square Test)、配对Mc Nemar检验和效度分析,比较2种方法的判定价值。结果 171例麻疹疑似病例同时采集了血清和干血片标本,ELISA法检测两种标本IgM抗体阳性率分别为53.22%和49.71%,差异无统计学意义(χ~2=3.60,P=0.06),两种标本ELISA法检测一致率为94.15%。2 512例麻疹确诊病例中,2 439例采集了血标本,ELISA法检测IgM抗体阳性率为76.38%;871例采集了咽拭子,real-time RT-PCR检测核酸阳性率为86.68%。咽拭子采样间隔在3天内的real-time RT-PCR核酸阳性率达到91.14%,3天后的阳性率只有66.26%(χ~2=72.46,P<0.01)。血标本采样间隔在3天内的ELISA IgM抗体阳性率为71.47%,3天后达到94.14%(χ~2=118.06,P<0.01)。检验效度分析,ELISA方法灵敏度为71.60%,特异度为85.29%,约登指数为0.57。real-time RT-PCR方法灵敏度为99.60%,特异度为67.65%,约登指数为0.67。结论 real-time RT-PCR方法更敏感,适合发病早期诊断,ELISA方法更适合发病中后期诊断。(本文来源于《中国疫苗和免疫》期刊2015年06期）
逆转录聚合论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立快速简便的登革病毒检验方法对控制登革热疫情至关重要。方法本研究首次建立了一种登革病毒的RT-RPA-LFD检测技术,结果本研究建立的RT-RPA-LFD检测技术能同时检测四种血清型的登革病毒,具有较好的重复性,特异性高,对乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒、黄热病毒和塞卡病毒没有交叉检测,并且具有较高的检测灵敏度,对四种血清型的登革病毒检测限都低至10拷贝/反应。结论综合考虑其快速性和操作简便性,RT-RPA-LFD是一种非常有前景的登革病毒一线检测技术。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
逆转录聚合论文参考文献
[1].张菊侠,杨万福.基于85BmRNA的逆转录-实时定量聚合酶链反应对肺结核分枝杆菌感染的诊断价值[J].中华实验和临床感染病杂志(电子版).2019
[2].张阳,孙涛,徐聪林,周冲.登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价[J].口岸卫生控制.2019
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[5].张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬.一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒[J].江苏农业科学.2018
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[7].高蕾,燕勇,王恒辉,吉季梅,葛志坚.基于SpeedStarHSDNA聚合酶的高速逆转录PCR方法在流感病毒检测中的应用[J].中国卫生检验杂志.2016
[8].马拥军,吴勇,胡少龙,南丽,郑雅萍.基于多重逆转录-聚合酶链式反应和毛细管电泳的腹泻病原体多重检测体系建立[J].中国卫生检验杂志.2016
[9].张天宇.DNA聚合酶和逆转录酶对双脱氧鸟苷叁磷酸的分子识别研究[D].长春师范大学.2016
[10].丁亚兴,田宏,孙静,雷玥,黄海涛.评价荧光定量逆转录-聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验方法在麻疹监测中的价值[J].中国疫苗和免疫.2015
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