肝癌细胞蛋白磷酸酶2A催化亚基在过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导急慢性肝癌细胞损伤模型中的表达及其对肝癌细胞的影响

论文摘要

目的探讨过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导肝癌细胞急慢性损伤后蛋白磷酸酶2A催化亚基（PP2A）的表达情况。方法采用不同浓度的过氧化氢（0、50、100、200、400、800μmol/L）或黄曲霉毒素B1（0、1. 25、2. 5、5、10、20、40μmol/L）诱导肝癌细胞（HepG2/Huh-7细胞） 2、4、6、8和24、48 h后,倒置显微镜观察细胞形态,刃天青实验检测肝癌细胞活性,Western Blot检测去甲基化PP2A催化亚基C（PP2Ac）和总PP2Ac蛋白的表达情况。两组间比较用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析和析因设计资料两因素方差分析。结果 HepG2/Huh-7细胞对过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导敏感,随着过氧化氢和AFB1浓度升高或孵育时间延长,细胞形态发生变化,数量减少。在2、4、6和8 h时间段,100μmol/L及以上浓度的过氧化氢诱导HepG2/Huh-7细胞后,随着过氧化氢浓度的升高,HepG2/Huh-7细胞活性逐渐下降,不同浓度过氧化氢与对照组（0μmol/L）比较,差异均有统计学意义（P值均<0. 05）。在4个不同时间段,两株细胞IC50用两因素方差分析比较,差异均无统计学意义（P值均> 0. 05）。在24、48 h时间段,2. 5μmol/L及以上浓度黄曲霉毒素B1诱导HepG2/Huh-7细胞后,随着浓度的升高,HepG2/Huh-7细胞活性逐渐下降,不同黄曲霉毒素B1浓度与对照组（0μmol/L）相比,差异均有统计学意义（P值均<0. 05）。在两个不同时间段,两株细胞IC50用两因素方差分析比较,差异均无统计学意义（P值均> 0. 05）。用200μmol/L过氧化氢诱导HepG2 2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义（t值分别为-5. 553、-2. 990,P值分别为0. 005、0. 040）; 400μmol/L过氧化氢诱导Huh-7细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义（t值分别为0. 073、-5. 149,P值分别为0. 002、0. 007）。用10μmol/L黄曲霉毒素B1诱导HepG2细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义（t值分别为-4. 561、-5. 788,P值分别为0. 010、0. 004）; 20μmol/L黄曲霉毒素B1诱导Huh-7细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义（t值分别为-5. 120、-6. 144,P值分别为0. 007、0. 004）。结论过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导肝癌细胞急慢性损伤后细胞形态发生变化,细胞活性降低,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达升高。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 方法
•     1.2.1 肝癌细胞培养
•     1.2.2 刃天青检测肝癌细胞活性
•     1.2.3 倒置生物显微镜观察细胞形态
•     1.2.4 细胞蛋白提取和定量
•     1.2.5 Western Blot检测蛋白表达水平
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 H2O2和AFB1对肝癌细胞形态的影响
•   2.2 H2O2和AFB1对肝癌细胞活性的影响
•   2.3 H2O2和AFB1对肝癌细胞PP2Ac蛋白表达的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨成雷,黄燊,莫来铭,唐深,李习艺,张志明

关键词: 肝细胞,过氧化氢,黄曲霉毒素,蛋白质磷酸酶,细胞

来源: 临床肝胆病杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科,广西医科大学基础医学院,广西医科大学公共卫生学院

基金: 广西教育厅中青年教师基础能力提升项目(KY2016YB085)

分类号: R735.7

页码: 2730-2735

总页数: 6

文件大小: 2383K

下载量: 178