细胞自噬调控颅内动脉瘤血管平滑肌细胞表型转化的体外研究

论文摘要

目的:探讨流体切应力（SS）对体外大鼠脑血管平滑肌细胞（VSMCs）表型转化的影响及相关自噬调控机制。方法:运用倒置相差显微镜和免疫细胞化学方法对大鼠VSMCs进行鉴定后,并给予15. 28 dyne/cm2流体切应力冲击VSMCs6、12、24 h。为探讨自噬在VSMCs表型转化中作用,于冲击前6 h给予自噬激动剂（Rapa）和抑制剂（3-MA）干预。实验分为control组、SS组、SS+3-MA组和SS+Rapa组。于冲击后6、12、24 h采用Real-time PCR法检测VSMCs收缩表型及合成表型的标志基因的表达水平;免疫细胞化学和免疫印迹法检测自噬标志蛋白LC-3和Beclin-1的定性定量表达。结果:与control组相比,SS组中VSMCs收缩表型标志基因α-SMA及SM-22a的表达显著下调（P<0. 05）;合成表型标志基因MMP-2和TNF-α的水平显著上调（P<0. 05）;自噬蛋白LC-3和Beclin-1的表达显著增强（P<0. 05）;与SS组相比,自噬抑制剂3-MA可显著逆转流体切应力诱导的VSMCs表型转化（P<0. 05）,与之相反,自噬激动剂Rapa可促进VSMCs的表型转化（P<0. 05）。结论:流体切应力可能通过激活细胞自噬诱导体外VSMCs的表型转化,进而参与颅内动脉瘤的发生发展。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 VSMCs培养及鉴定
•     1.2.2 流体切应力冲击VSMCs
•     1.2.3 Real-time PCR
•     1.2.4 免疫细胞化学染色
•     1.2.5 Western blot法
•   1.3 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 VSMCs的鉴定结果
•   2.2 流体切应力诱导VSMCs的表型转化
•   2.3 流体切应力促进VSMCs的自噬激活
•   2.4 自噬可调控SS诱导的VSMCs的表型转化
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 袁广胜,吴海东,陈胜利,李小梅,邵楠,王纪斌,张婷

关键词: 颅内动脉瘤,流体切应力,血管平滑肌细胞,表型转化,自噬

来源: 中国免疫学杂志 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 东营胜利医院

基金: 山东省东营市科技计划项目

分类号: R329.2

页码: 1337-1340+1353

总页数: 5

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