导读:本文包含了纤连蛋白结合蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,葡萄球菌,金黄色,链球菌,免疫,螺旋体,细胞因子。
纤连蛋白结合蛋白论文文献综述
杨汐静,陈晓婷,刘道龙,杨阳,杨光[1]（2018）在《金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A r10-11截短体蛋白基因片段的原核表达与免疫原性》一文中研究指出目的构建金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A(fibronectin binding protein A,FnBPA)r10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株并研究其免疫原性。方法采用重组聚合酶链反应(ploymerase chain reaction,PCR)技术从金黄色葡萄球菌Newman株全基因组序列中进行PCR扩增,对扩增产物进行纯化,连接T载体后转入大肠杆菌DH5α中进行克隆,提取重组后的质粒进行双酶切鉴定,并回收目的片段连接到pET-32a质粒中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达,采用HIS蛋白纯化柱纯化截短蛋白FnBPAr10-11,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴定,纯化后的FnBPAr10-11用于免疫小鼠[分为无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)组、FnBPA组、FnBPAr10-11组],检测小鼠血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平、细胞因子水平、免疫保护率。结果 SDS-PAGE分析显示,表达后的蛋白相对分子质量约为33.1×103。FnBPAr10-11组与FnBPA组IgG抗体效价达1∶128 000,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。FnBPAr10-11组的细胞因子水平与FnBPA组比较差异无统计学意义(P>0.05),与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.01)。攻毒试验中FnBPAr10-11组的免疫保护作用在50%以上。结论成功构建了金黄色葡萄球菌Fn BPAr10-11截短体融合蛋白的原核表达菌株,该截短蛋白免疫原性良好。(本文来源于《华西医学》期刊2018年12期）
肖勇健,刘卓然,赵飞骏,余坚,曾铁兵[2]（2016）在《梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136前炎症活性的研究》一文中研究指出目的初步研究梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136潜在的前炎症活性。方法构建重组质粒p ET-28a/Tp0136并诱导其表达目的蛋白;将不同浓度(1、2、5、10μg/m L)的r Tp0136分别刺激THP-1源性巨噬细胞,ELISA法分别检测其产生前炎症细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平;并同时用二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预先处理巨噬细胞,检测相应细胞因子分泌量。结果成功构建了p ET-28a/Tp0136重组质粒,并诱导表达和纯化出r Tp0136;重组蛋白能诱导巨噬细胞产生IL-1β、IL-6和TNF-α,并且呈浓度和时间依赖性;重组蛋白刺激经PDTC预处理后的巨噬细胞,其IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平分别降至32%、35%和27%。结论r Tp0136可诱导巨噬细胞产生前炎症细胞因子,该过程可能受NF-κB调控。(本文来源于《中南医学科学杂志》期刊2016年03期）
范皓天,周梦曦,蒋子奇,蔺辉星,范红结[3]（2015）在《马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白的原核表达及其免疫原性的检测》一文中研究指出根据已发表的纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FNZ)基因(fnz)序列,设计并合成1对引物,以马链球菌兽疫亚种(SEZ)ATCC35246菌株基因组DNA为模板,PCR扩增fnz基因,并定向将其克隆至表达载体pET-32a(+)中。重组质粒pET-32a(+)-fnz经酶切及测序鉴定后,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达,表达产物经Western-blot检测后进行纯化,得到了74ku的纯化蛋白。以纯化的FNZ与ISA206佐剂以1∶1的体积比混合后免疫ICR小鼠,每只小鼠背部皮下多点注射120μL(含蛋白22.5μg),14d后以同样方法进行加强免疫。间接ELISA检测结果表明,FNZ免疫组小鼠的血清FNZ抗体效价显着高于其他3个对照组。二免后第15天小鼠腹腔注射ATCC35246菌液5.0×105 CFU(10LD50),观察注射后10d内小鼠的临床表现及存活状况;结果显示,FNZ免疫组小鼠的存活率为62.5%,显着高于阴性对照组(0)和空白对照组(0),但低于SEZ灭活疫苗免疫组(87.5%)。结果表明,FNZ可使免疫小鼠对SEZ的感染产生一定的抵抗作用。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2015年02期）
周益装,尤元海,张建中[4]（2011）在《链球菌属纤连蛋白结合蛋白的生物信息学分析》一文中研究指出对链球菌属纤连蛋白结合蛋白进行系统的分析,找出其特征,为以后的研究奠定基础。通过MUSCLE、BLASTP、PSI-BLAST、PHYLIP、Perl编程等生物信息学方法对217条候选纤连蛋白结合蛋白进行研究。发现共有31个序列纤连蛋白结合蛋白重复单元序列模体,绝大部分蛋白由两个或两个以上的不同模体序列构成,其保守结构域组合呈现多样性等特征。表明链球菌属纤连蛋白结合蛋白重复单元序列模体不是严格统一的,总体上具有变异性,但模体之间又有很大的相似性。(本文来源于《生物信息学》期刊2011年01期）
王晨红,李春更,杨瑞敏[5]（2009）在《纤连蛋白结合蛋白新功能肽段FnBPA-D1c/D2n的初步研究》一文中研究指出金黄色葡萄球菌是引起化脓性感染的主要病原菌,而且能引起多种其他疾病,纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding pro-tein,FnBP)是介导金葡菌侵袭宿主细胞的关键表面蛋白[1]。本研究选定金葡菌FnBP蛋白D结构域的一个非完整重复序(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2009年08期）
马保臣,秦卓明,董玉兰,柴同杰,袁小远[6]（2008）在《奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白配基结合区基因的克隆与原核表达》一文中研究指出运用PCR方法扩增出奶牛乳腺炎分离株10A的Fnbp配基结合区基因,该片段大小为350bp左右,将其与PGEM-T载体连接,转化到受体菌DH5α中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板筛选出含有重组子的菌株,鉴定成功后,测序结果表明:奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌10A的Fnbp配基结合区基因的序列与金黄色葡萄球菌Mu50、N315、MSSA476、MW2、RF122、COL以及NCTC8325的相应区域序列同源性分别为97%、97%、95%、95%、96%、94%和94%。将重组克隆载体质粒进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切回收后的DNA,定向插入到融合表达载体PET-32a中,构建了重组质粒PET-Fnbp,并转化到宿主菌BL21(DE3)株中,经IPTG4h诱导后,SDS-PAGE电泳表明,重组蛋白得到高效表达,重组蛋白主要以分泌形式存在,分子量35000左右,Ni柱纯化后的蛋白经Western-blotting检测,具有良好的抗原性和特异性。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2008年06期）
耿建新[7]（2007）在《马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白功能片段的确定及免疫保护试验》一文中研究指出马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp．zooepidemicus)对集约化养猪业的发展危害严重，同时对养猪业的相关从业人员的健康具有潜在威胁。能引起猪和人的脑膜炎、败血症、关节炎、肺炎、及突发性死亡，是重要的人兽共患病病原。纤连蛋白(fibronectin，Fn)是由α和β链组成的一种二聚体糖蛋白，由多种类型的细胞表达产生，Fn在动物体内以可溶形式存在于血浆及各种体液中，以不溶形式存在于细胞外基质及细胞表面。前者总称血浆Fn，后者总称细胞Fn。纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein，FNZ)是链球菌一种重要的表面蛋白和毒力因子，是链球菌建立感染所依附的重要的表面分子之一，该菌是重要的黏附素。本试验在分子水平上对马链球菌兽疫亚种FNZ蛋白的功能片段进行了研究，为该菌的致病机制和基因工程疫苗的研制进行了有益的探索。根据已经发表的马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白的基因序列，设计和合成一对引物，并以ATCC35246株的基因组为模板，通过PCR技术，扩增出缺失信号肽的FNZ基因，并定向克隆至PMD19-T载体中。酶切鉴定正确后，对克隆片段进行序列测定，其长度为1895bp。利用DNAstar软件，比较所测序列与不同来源链球菌的纤连蛋白序列的同源性，该序列与已经发表的马链球菌兽疫亚种VTU211菌株FNZ基因的同源性为89．9％，氨基酸同源性为84．4％，其中突变部位较多，而且中间有111个碱基缺失。与马链球菌马亚种的同源性为78％，氨基酸同源性为44．1％，与其他链球菌的同源性较低。根据ATCC35246的FNZ基因序列，设计和合成五对引物，用PCR方法分别扩增出FNZ基因的4-277bp、4-808bp、592-1134bp、895-1615bp区间和全长的基因片段。将扩增片段双酶切后用T4 DNA连接酶定向克隆于融合表达载体pET-32a(+)的相应酶切位点。构建pFNZ(2-91)、pFNZ(2-268)、pFNZ(197-378)、pFNZ(299-538)和pFNZ重组质粒，对阳性插入片段进行酶切测序鉴定，结果表明pFNZ(2-91)、pFNZ(2-268)、pFNZ(197-378)、pFNZ(299-538)和pFNZ的插入序列与ATCC35246FNZ的相应序列完全一致。将重组质粒转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导表达，表达产物大小分别为31、50、40、45、84kD，与预测结果一致。采用配基印迹结合试验确定FNZ上Fn的结合部位，结果表明pFNZ(2-268)、pFNZ(197-378)、pFNZ(299-538)和pFNZ与人的Fn结合。据此推断在FNZ基因的277-808bp、895-1134bp，即197-268aa、299-378aa之间有Fn的线性结合位点。将含有Fn线性结合部位的重组质粒细菌进行表达，SDS-PAGE检测，结果表明表达的蛋白位于上清之中，以His亲和层析柱纯化表达蛋白，将纯化好的蛋白与ISA206佐剂1：1进行乳化后免疫ICR小鼠，融合蛋白免疫方式为pFNZ(2-268)、pFNZ(299-538)和pFNZ(2-268)+pFNZ(299-538)，以0．2ml(1．0×10~8cell／ml)ATCC35246强毒株攻击后，小鼠的存活率分别为20％、30％和30％，证实所表达的蛋白具有一定的保护性，为马链球菌兽疫亚种重要的保护性抗原。(本文来源于《南京农业大学》期刊2007-05-01）
王花茹,王长军,唐家琪,陆承平,潘秀珍[8]（2006）在《猪链球菌2型四川人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白基因的克隆和序列分析》一文中研究指出目的对2005年猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,S.suis2)四川资阳人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白(FBPS)基因进行克隆和序列分析。方法以ZYH18的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白基因片段,克隆于pMD-T18载体,构建成载体pMD-T-fbps,转化到宿主菌TG1中,进行序列测定(GenBank登录号为DQ345444)。测序结果与实验室保存的其它7株猪链球菌2型临床分离菌株测序结果及GenBank提交序列AF438158进行编码区基因的同源性比对。结果成功克隆了实验室保存的分离于不同时间和地点的,包括ZYH18在内的8株S.suis2临床分离菌株的fbps基因,并对其编码区基因进行了同源性比对。结论实验室保存的8株菌的FBPS编码区基因同源性高达100%,并不因分离时间和地点的不同而不同;与GenBank提交序列AF438158同源性为99%,存在两个氨基酸的差异。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2006年05期）
王花茹[9]（2006）在《猪链球菌PCR检测方法的建立及纤连蛋白结合蛋白的克隆和表达》一文中研究指出猪链球菌(Streptococcus suis，SS)是重要的人兽共患病的病原，能引起猪和人类的脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎、肺炎以及突发性死亡，对养猪业造成巨大的经济损失。迄今为止，根据SS荚膜多糖(capsular polysaccharide，CPS)抗原性的不同，可将其分为35个血清型(1～34，1／2)，主要致病血清型为SS1、SS2、SS1／2、SS7、SS9和SS14，其中以SS2流行最广、致病性最强。研究发现，并不是所有的SS2都有致病性，菌株致病性强弱与其是否表达毒力相关因子有很大关系。目前，已知的与SS致病性相关的毒力因子主要有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白(muraminidase released protein，MRP)、胞外因子(extracellular factor，EF)、溶血素(suilysin，Sly)、和IgG结合蛋白、44000的蛋白等，在SS致病方面一般都是协同发挥作用。对于SS检测和分型，国内研究主要针对SS2，所以本试验第一部分中，根据Genbank中gdh、cps1、cps2、cps7、cps9和mrp、epf(epf~*)、sly设计引物建立两个多重PCR，希望实现对SS系统的检测。 此外，近年来发现SS一种新的毒力因子—纤连蛋白结合蛋白。作为一种值得重视的细菌非菌毛黏附素，它普遍存在于SS的除32和34型以外所有血清型中。有研究说它可以作为交叉保护性抗原，有望用于SS的检测和免疫等方面。本试验第二部分是以四川资阳人源分离株为模板进行的表达纯化等工作。 1 SS及其主要致病血清型多重PCR检测方法的建立 根据SS谷氨酸脱氢酶基因和血清型1型、2型、1／2型、7型、9型和14型荚膜多糖编码基因核酸序列，分别设计SS型通用引物和型特异性引物，建立、优化多重PCR检测方法，并检测分析种属背景明确的菌株73株(其中猪链球菌49株、其他对照菌株24株)及临床分离样本94株(包括四川资阳人源和猪源临床分离样本45株)。其中73株种属背景明确菌株多重PCR种检测结果符合率为87.5％，6种主要致病血清型检出率可达率为100％。24株对照菌株在种和血清型水平均检测为阴性。对45株四川猪链球菌病暴发现场分离菌株进行检测，其中41株为SS2。上述结果提示本试验建立的多重PCR方法，可确定被检测SS是否属于主要致病血清型，特异性和敏感性好，可用于猪链球菌病的快速诊断和流行病学调查。(本文来源于《南京农业大学》期刊2006-05-01）
贺宽军,郭闯,张涌[10]（2006）在《金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达》一文中研究指出根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(fnbA)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了3 600bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pGEM T easy载体中,成功地构建了克隆质粒pGEM-fnbA。以HindⅢ和XhoⅠ双酶切pGEM-fnbA和pET28a(+),将纯化的基因fnbA亚克隆至pET28a(+)中,构建了原核表达质粒pET28a-fnbA,并将其转化至E.coliBL21(DE3)感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在约165 ku处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带。Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2006年04期）
纤连蛋白结合蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的初步研究梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136潜在的前炎症活性。方法构建重组质粒p ET-28a/Tp0136并诱导其表达目的蛋白;将不同浓度(1、2、5、10μg/m L)的r Tp0136分别刺激THP-1源性巨噬细胞,ELISA法分别检测其产生前炎症细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平;并同时用二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)预先处理巨噬细胞,检测相应细胞因子分泌量。结果成功构建了p ET-28a/Tp0136重组质粒,并诱导表达和纯化出r Tp0136;重组蛋白能诱导巨噬细胞产生IL-1β、IL-6和TNF-α,并且呈浓度和时间依赖性;重组蛋白刺激经PDTC预处理后的巨噬细胞,其IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平分别降至32%、35%和27%。结论r Tp0136可诱导巨噬细胞产生前炎症细胞因子,该过程可能受NF-κB调控。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纤连蛋白结合蛋白论文参考文献
[1].杨汐静,陈晓婷,刘道龙,杨阳,杨光.金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白Ar10-11截短体蛋白基因片段的原核表达与免疫原性[J].华西医学.2018
[2].肖勇健,刘卓然,赵飞骏,余坚,曾铁兵.梅毒螺旋体纤连蛋白结合蛋白Tp0136前炎症活性的研究[J].中南医学科学杂志.2016
[3].范皓天,周梦曦,蒋子奇,蔺辉星,范红结.马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白的原核表达及其免疫原性的检测[J].中国兽医科学.2015
[4].周益装,尤元海,张建中.链球菌属纤连蛋白结合蛋白的生物信息学分析[J].生物信息学.2011
[5].王晨红,李春更,杨瑞敏.纤连蛋白结合蛋白新功能肽段FnBPA-D1c/D2n的初步研究[J].解放军医学杂志.2009
[6].马保臣,秦卓明,董玉兰,柴同杰,袁小远.奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白配基结合区基因的克隆与原核表达[J].中国兽医学报.2008
[7].耿建新.马链球菌兽疫亚种纤连蛋白结合蛋白功能片段的确定及免疫保护试验[D].南京农业大学.2007
[8].王花茹,王长军,唐家琪,陆承平,潘秀珍.猪链球菌2型四川人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白基因的克隆和序列分析[J].中国人兽共患病学报.2006
[9].王花茹.猪链球菌PCR检测方法的建立及纤连蛋白结合蛋白的克隆和表达[D].南京农业大学.2006
[10].贺宽军,郭闯,张涌.金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达[J].中国兽医科学.2006
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