小鼠诺如病毒巢式PCR检测方法的建立及应用

论文摘要

为了建立一种高敏感性和特异性的检测方法,突破目前小鼠诺如病毒(MNV)检测局限,根据MNV保守区基因组序列设计合成内、外2对引物,通过PCR反应条件的优化,建立MNV的巢式PCR检测方法。结果表明,该方法仅能特异的扩增MNV目的基因而不能扩增其他病毒,且敏感度达到500个拷贝,比普通PCR提高1 000倍。说明本研究建立的巢式PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速的用于小鼠诺如病毒的病原检测。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒
•   1.2 主要试剂
•   1.3 引物的设计与合成
•   1.4 病毒RNA提取和cDNA合成
•   1.5 巢式PCR反应的建立
•   1.6 序列分析
•   1.7 巢式PCR敏感性试验
•   1.8 巢式PCR特异性试验
•   1.9 巢式PCR对临床样品的检测
• 2 结果与分析
•   2.1 扩增产物的检测及鉴定
•   2.2 序列分析
•   2.3 巢式PCR的敏感性
•   2.4 巢式PCR的特异性
•   2.5 巢式PCR对临床样品的检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵娜,王丽媛,赵歆伊,曹福源,陈松,张艳淑,姚林,李爽

关键词: 小鼠诺如病毒,病毒,巢式,检测,特异性,感染率

来源: 中国兽医杂志 2019年07期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 华北理工大学实验动物中心,华北理工大学公共卫生学院,华北理工大学基础医学院

基金: 华北理工大学博士科研启动项目,河北省卫计委项目(20170912)

分类号: S852.65

页码: 102-104

总页数: 3

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