猪繁殖与呼吸综合征病毒3’-UTR碱基缺失对病毒复制影响的初步研究

论文摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）3’-非编码区（UTR）在病毒复制过程中具有重要作用,本研究经序列比对发现,与经典PRRSV相比,高致病性PRRSV（HP-PRRSV）3’-UTR中第17位碱基G（鸟嘌呤）发生缺失。为进一步探究3’-UTR中该碱基缺失对3’-UTR二级结构和PRRSV复制效率的影响,本研究在HP-PRRSV HuN 4感染性克隆株的基础上,将缺失碱基补平,得到突变病毒HuN 4-3’-UTR-（17+G）。复制动力学结果显示突变病毒HuN 4-3’-UTR-（17+G）在48 h和96 h病毒滴度均较亲本病毒HuN 4株显著降低（p<0.05）,表明3’-UTR第17位碱基G的缺失增强了HP-PRRSV的复制能力;同时第17位碱基对应的茎环区域的缺失不影响病毒拯救,其还可以作为标记疫苗的分子标签。本研究结果为进一步探究PRRSV复制的分子机制奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•   1.2 P RRS V 3'-UTR基因序列的比对分析
•   1.3 病毒RNA二级结构预测
•   1.4 引物设计和合成
•   1.5 突变质粒的构建和鉴定
•   1.6 突变病毒的拯救及间接免疫荧光试验（IFA）检测
•   1.7 复制动力学曲线
•   1.8 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 P RRS V 3'-UTR序列的变异分析结果
•   2.2 突变病毒二级结构的预测
•   2.3 突变质粒的鉴定
•   2.4 突变病毒拯救的IFA检测结果
•   2.5 突变病毒的复制动力学曲线
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 熊俊垚,赵款,于芳,杨勇博,田志军,蔡雪辉,安同庆

关键词: 复制,缺失

来源: 中国预防兽医学报 2019年08期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

基金: 国家自然科学基金(31270045),黑龙江省杰出青年基金(JC2017010),哈尔滨市应用技术研发项目(2016RAQXJ142),中国农业科学院基本科研业务费(Y2017JC16)

分类号: S852.651

页码: 783-788

总页数: 6

文件大小: 1546K

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