表达牛流行热病毒G蛋白的重组狂犬病病毒的构建及鉴定

论文摘要

目的以狂犬病病毒（RABV）弱毒株SAD株为载体,构建表达牛流行热病毒（BEFV）G蛋白的重组病毒SAD-BG。方法利用反向遗传技术将BEFV的G蛋白基因ORF插入到SAD株基因组的伪基因区,获得感染性克隆,与辅助质粒共转染BHK-21细胞,获得重组病毒SAD-BG株。结果与结论通过RT-PCR、免疫荧光染色鉴定,表明BEFV G蛋白基因存在于重组病毒基因组,且能表达自身RABV G蛋白与外源BEFV G蛋白。通过BHK-21细胞和NA细胞鉴定重组病毒的生长特性,在NA细胞中重组病毒的滴度高于亲本SAD株,可达1.3×108FFU/ml。成功构建了表达BEFV G蛋白的重组病毒SAD-BG,为进一步研制预防狂犬病和牛流行热（BEF）的二联疫苗奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 病毒、质粒、菌株及细胞株
•   1.2 主要试剂
•   1.3 引物设计
•   11.4 感染性克隆的构建
•   1.5 重组病毒的拯救
•   1.6 RT-RCR鉴定重组病毒
•   1.7 免疫荧光鉴定重组病毒
•   1.8 病毒复制动力学测定
• 2结果
•   2.1重组全长质粒的鉴定
•   2.2重组病毒RT-PCR鉴定
•   2.3重组病毒免疫荧光鉴定
•   2.4绘制病毒复制动力学曲线
• 3讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵忠欣,孙培录,盖微微,燕丽娜,傅倩芸,许彤,何洪彬,郑学星,郑文文,夏咸柱

关键词: 狂犬病病毒,牛流行热病毒,蛋白,二联疫苗

来源: 军事医学 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 山东大学公共卫生学院,山东省医学科学院药物研究所,军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所,山东师范大学生命科学学院

基金: 山东省自然科学基金资助项目(ZR2016CQ18,ZR2019QC010),中国博士后科学基金资助项目(2015M580592,2016T90637),中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2018JC050)

分类号: S852.65

页码: 116-121

总页数: 6

文件大小: 1643K

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