志贺毒素论文_温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲

导读:本文包含了志贺毒素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毒素,大肠杆菌,大肠,水肿病,噬菌体,浊度,耐药性。

志贺毒素论文文献综述

温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲^[1]（2019）在《I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立》一文中研究指出目的构建基于时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)的高灵敏性、高特异性的I型志贺毒素(StxI)双抗体夹心免疫检测法,用于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法采用两株针对StxI不同表位的单克隆抗体2F6-F8和8E7-E6,构建双抗体夹心TRFIA,并评价该方法的灵敏度、特异性以及稳定性;以PCR检测stxI基因结果为金标准,以TRFIA、ELISA、Duopath~?Verotoxins免疫胶体金检测试剂盒,检测54例StxI毒素粗提物,比较灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和与PCR法的一致性。结果建立的以StxI为靶向分子的TRFIA,可以在2h内完成对StxI检测,检测最大稀释倍数为1:1 000的StxI阳性菌株毒素粗提物样本,灵敏度比ELISA提高了约2个数量级。Stx I的TRFIA与StxII型无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。与PCR方法相比,TRFIA灵敏度(93.8%)高于ELISA(82.4%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(57.1%),差异有统计学意义(P<0.05);其特异性(100.0%)、阳性预测值(100.0%)、阴性预测值(97.4%)均大于等于ELISA(分别为97.2%、93.3%、92.1%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(分别为100.0%、100.0%、87.0%);TRFIA检测结果与PCR一致性(Kappa=0.955)高于ELISA(Kappa=0.809)法和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(Kappa=0.664)。结论成功构建StxI-TRFIA快速检测方法检测样品中StxI毒素,为TRFIA在毒素检测方面的推广应用提供了依据。(本文来源于《江苏预防医学》期刊2019年04期）

王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠^[2]（2019）在《类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)基因表达及间接ELISA方法的建立》一文中研究指出试验针对产类志贺毒素大肠杆菌SLT-Ⅱe初步建立一种猪水肿病大肠杆菌的血清学检测方法。通过原核表达构建出重组菌pET28a-sumo-SLT-IIe/BL21在IPTG诱导下获得表达,表达产物以包涵体形式产生,使用十二烷基肌氨酸钠(SKL)变性的生化提纯步骤获取有生物学活性的重组蛋白。将提取的SLT-IIe蛋白作为抗原包被ELISA板,初步建立了特异性强的猪水肿病诊断方法,方阵滴定确定抗原最佳包被浓度为2μg/孔,最佳血清稀释浓度是1:25,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1:15 000,5%脱脂奶封闭1h,显色15 min。该方法的建立对猪水肿病流行病学调查以及预防和控制该病的发生有重要意义。(本文来源于《畜牧兽医科学(电子版)》期刊2019年08期）

佟盼盼,马凯琪,刘争辉,谢金鑫,苏红^[3]（2019）在《新疆牛源产志贺毒素大肠杆菌耐药性及其ESBLs基因鉴定》一文中研究指出本研究的目的是通过调查新疆地区分离的牛源产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的耐药表型和基因型,掌握STEC耐药性的发展和传播规律。本研究对新疆6个地区的牛源(非O157:H7)STEC分离株进行了18种抗生素的药物敏感性试验,并检测菌株中携带的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因。结果显示:4.31%STEC表现为多重耐药,1.91%为产ESBLs菌株。检测到的主要ESBLs基因包括bla_(TEM)和bla_(CTX-M)。这是首次在新疆STEC中检测到bla_(TEM)和bla_(CTX-M)。本研究分离出的多数多重耐药STEC属于系统发育A群。多重耐药STEC可能是由非致病性大肠杆菌获得毒性和耐药基因而形成的。抗生素的选择压力可能对细菌在牛肠道中的定植表现出一定竞争优势,从而增加了耐药STEC对食物的污染。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2019年04期）

杨斌,邹杰,羊扬,朱国强^[4]（2019）在《产志贺毒素大肠杆菌检测技术研究进展》一文中研究指出产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一种重要的人畜共患病病原菌,可以引起人类水样腹泻、出血性肠炎等轻度肠不适,严重时导致溶血性尿毒综合征(Hemolytic uremic syndrome,HUS)、终末期肾病(End stage renal disease,ESRD)甚至死亡。有研究显示,每年全球范围内估计感染致病型STEC造成超过2 800 000例人类急性疾病,死亡230例~([1])。鉴于STEC对(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年02期）

马崇礼,杨俊,段合波,毕旺来^[5]（2018）在《非O157型产志贺毒素大肠杆菌分子进化和流行特征分析》一文中研究指出为分析非O157型产志贺毒素大肠杆菌的流行特点和分子进化,从NCBIGen Bank数据库下载197条非O157型产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素2基因序列。搜集分离菌株的采集地点、采集年代、宿主类型等流行病学信息,通过构建进化树分析菌株间的遗传进化关系。结果表明,我国非O157型产志贺毒素大肠杆菌基因型主要属于stx2c、stx2d和stx2e,血清型分布较广泛,主要流行型不是欧美国家常见的"Top Six"。(本文来源于《生物化工》期刊2018年04期）

游淑珠,王小玉,冯家望,蔡教英,姚丽锋^[6]（2018）在《LAMP实时浊度法快速检测食品中产志贺毒素大肠埃希氏菌》一文中研究指出针对产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC) stx1和stx2基因的特异性序列分别设计4条特异性引物,采用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,利用实时浊度仪建立食品中STEC的LAMP实时浊度法快速检测方法。LAMP反应在实时浊度仪63℃恒温下1 h可完成。对方法的特异性、灵敏度、稳定性进行了评价,并在实际样品检测中进行应用。经优化该方法的检测灵敏度可达150拷贝/反应,4株STEC菌株LAMP扩增结果与其基因型一致,其他21株非STEC菌株均未出现非特异性扩增。395份食品样品检出STEC阳性68份(阳性率为17.2%),所检食品类别中畜产品阳性率最高(达31.3%),禽产品、水产品和可生食蔬菜均有少量阳性样品检出,阳性样品中以stx2基因阳性型为主。结果表明,LAMP实时浊度法具有快速、灵敏、特异性强、操作简便的优势,适用于食品中STEC的快速筛查。(本文来源于《食品工业科技》期刊2018年22期）

傅珊珊^[7]（2018）在《人源性非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株特征及肠溶血素基因分型分析》一文中研究指出产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能产生一种或一种以上志贺毒素大肠埃希菌的总称。STEC是重要的食源性致病菌,可引起人的感染性腹泻、出血性肠炎(hemorrhagic colitis,HC)及病死率高的溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)。志贺毒素(Shiga toxin,Stx)是STEC最关键的致病因子,但其他一些致病因子如紧密粘附素(Intimin)、肠溶血素(Enterohemolysin,EhxA)等在STEC致病性中也发挥一定的作用。O157:H7是STEC中最常见、最重要的血清型,但近年来由非0157 STEC引起的散发感染或暴发逐渐增多,在许多国家或地区甚至超过STEC 0157。本研究拟了解中国腹泻患者和健康人群粪便中非0157 STEC检出情况,并从血清分型、毒力基因特征、多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)、志贺毒素噬菌体分析及全基因组测序分析等方面对分离菌株进行分析。2010年-2014年间,从河南睢县、四川自贡、青海玉树、深圳龙岗和上海5个地区的腹泻患者或健康人粪便标本中共分离非0157 STEC菌株27株,部分地区腹泻患者非0157 STEC的分离率约为1.3%,而健康人群的分离率仅约0.2%。27菌株分为16种不同的O:H血清型,最常见为O130:H8血清型,包括6株菌;026:H11和0117:H8血清型分别包括3株菌;091:H14和O107:H7血清型分别包括2株菌;其余11种血清型(O111:H8、0112:H8、021:H25、084:H2、05:HNT、020:H30、ONT:H30、O104:H7、048:H21、O149:H10 及 043:H2)分别只有 1 株菌。MLST将27株非0157 STEC菌株分为16种序列型(Sequence type,ST),最主要的ST型别为ST13,包括9株菌;ST21和ST504型分别包括3株菌和2株菌;其余13株菌分别属于不同的ST型。志贺毒素分型结果显示,11株携带stx1a亚型;12株为stx1c亚型菌株;而携带stx2d亚型菌株1株,stx2e亚型菌株3株;1株菌同时携带stx1a和stx2b两种志贺毒素亚型。其他毒力基因 eae、efa1、saa、paa、astA及ehx 的携带率分别为 18.5%(5)、18.5%(5)、29.6%(8)、22.2%(6)、11.1%(3)、11.1%(3)及 25.9(7)%。对两株stx2&阳性菌株STEC413和STEC509的Stx2诱导及Vero细胞毒性测定表明,这两株菌在丝裂霉素C诱导剂的作用下Stx2e的诱导性及对Vero细胞的毒性均明显低于STEC 0157:H7暴发菌株Xuzhou21。通过全基因组测序所获得的STEC413和STEC509菌株Stx2e前噬菌体序列,其大小分别为32133bp和61142bp;C+G%分别为48%和49%;染色体插入位点分别为opmW和yecE;所包含CDS数量分别为58和105。与猪来源菌株S1191的Stx2e噬菌体参考序列相比,STEC413携带的Stx2e噬菌体序列与其相似性仅为50.0%,二者拥有相似的整合酶,但插入位点和调控基因Q均不同。而STEC509携带的Stx2e噬菌体序列非常特异,尚无类似的噬菌体序列报道,表明Stx2e噬菌体基因组具有高度多样性。通过与不同致病型和共生型大肠埃希菌及志贺菌属的全基因进化分析,发现STEC413菌株与共生型大肠埃希菌有较近的亲缘关系,而STEC509菌株与其他非0157 STEC菌株有较近的亲缘关系,表明Stx2e噬菌体可以整合到不同遗传背景的大肠埃希菌菌株中。除噬菌体编码的志贺毒素、LEE岛编码紧密粘附素(intimin)外,位于大质粒p0157上的肠溶血素作为STEC 0157:H7的毒力因子在致病性中也发挥重要作用。本研究对非0157 STEC菌株的肠溶血素基因(ehxA)进行了分析。434株非0157 STEC中检测出138株(31.8%)ehxA基因阳性菌株,分别来自健康人(1株)、腹泻患者(9株)、不同动物(108株)及食品(20株)。通过PCR扩增测序得到了 138条ehxA基因全长序列,根据序列相似性分为36种不同的序列型。将本研究中获得的36条特异序列,结合GenBank中代表性ehxA序列,进行Neibour-Joining(N-J)进化分析。根据N-J树和序列相似性,将ehxA划分为3个组别,即Group(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)。通过对不同组别非0157STEC菌株溶血特性、血清型、来源、毒力基因特征等的分析发现,腹泻患者的菌株均属于Group Ⅱ,且多数携带毒力基因eae,而动物(97.1%)和食品(80%)来源的菌株多分布在Group Ⅰ中。总之,通过本研究,初步了解了中国部分地区人源非0157 STEC的流行情况和菌株基本特征;丰富了人源性stx2eSTEC菌株及Stx2e噬菌体基因组的认识;建立了基于序列分析的肠溶血素基因(ehxA)分型的方法,该方法对菌株的致病潜力具有一定的预测作用。(本文来源于《中国疾病预防控制中心》期刊2018-06-30）

范如岳^[8]（2018）在《非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离方法的评价和优化》一文中研究指出产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是世界范围内食源性疾病的重要原因之一,可导致人感染性腹泻、出血性结肠炎(hemorrhagic colitis,HC)以及高病死率的溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)。STEC宿主广泛,反刍动物(牛)是其最主要宿主。目前已报道的STEC血清型达400多种,其中0157:H7血清型因与严重疾病的暴发流行而引起广泛关注,然而近年来由非0157 STEC引起的散发感染和暴发逐渐增多。本研究对中国不同来源非0157 STEC分离株O:H血清型,stx1、stx2及eae等主要毒力基因的情况进行了分析。476株分离株中,除68株为O不可分型和16株为H不可分型外,共检测出174种O:H血清型,其中,02:H45、08:H16和02:H32为优势血清型。stx1、stx2及stx1+stx2叁种志贺毒素基因型的检出率分别为25.84%、64.71%和9.45%,毒力基因eae的阳性率为6.93%。33株分离株同时携带stx和eae基因,主要为026、0103、O111血清群的菌株。目前0157 STEC的分离培养方法已经成熟,如使用含有亚碲酸钾和头孢克肟的山梨醇麦康凯培养基(CT-SMAC),主要是基于0157 STEC菌株不发酵山梨醇的重要特性,以及具有较其他肠杆菌科细菌较高的亚碲酸钾抗性水平。但是,由于非0157 STEC的表型和基因型的多样性,菌株的选择性分离仍存在很大挑战。本研究检测了 476株非0157 STEC分离株亚碲酸钾抗性水平,并对其在12种不同选择性培养基上的生长情况进行了评价。结果显示476株非0157 STEC菌株中仅108株菌的亚碲酸钾最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)高于4 μg/ml,96株携带完整的亚碲酸钾抗性基因簇(ter),ter基因与亚碲酸钾抗性水平相关。476株非0157 STEC菌株均能在麦康凯(MAC)、山梨醇麦康凯(SMAC)、胰蛋白胨胆汁X-葡糖苷酸(TBX)、Rainbow(?)Agar 0157、CHROMagarrMECC 和 Fluorocult(?)O157:H7 六种培养基上生长。CT-SMAC、CHROMagarTM 0157 和 CHROMagarTM STEC 培养基则分别抑制了 12.2%、31.1%和38.0%菌株的生长。此外,4.6%、33.2%和45.0%的菌株在RBA-USDA和RBA-NT两种改良Rainbow(?)Agar O157培养基以及BCM 0157:H7 培养基上被抑制。本研究显示了非0157 STEC菌株在不同培养基上的菌落特征呈现多样性,并且大多数菌株对亚碲酸钾敏感;提示不含添加剂或含低浓度添加剂的低选择性培养基结合高选择性培养基联合使用可以有效地提高不同血清型的非0157 STEC的分离效率。通过上述对不同选择性培养基的评价,我们选择四种(MAC、CHROMagarTM ECC、RBA-NT和CHROMagarTM STEC)培养基组合对四川某农场采集的肉牛粪便标本进行了 STEC分离,并分析了牛源分离株的特征。120份肉牛粪便样本中,通过实时荧光定量PCR方法对样本进行初筛,样本stx阳性率为90.00%。使用四种培养基共从87份stx1/stx2阳性样本中分离到126株STEC,样品分离率为 72.5%。使用 CHROMagarTM ECC、MAC、RBA-NT 和 CHROMagarTM STEC选择性培养基分别从29、29、71和57份样本中分离出32、31、91和73株STEC菌株。126株分离株共包括17种O:H血清型,084:H2、O81:H31、ONT:H8、O5(O70):H31为主要血清型;stx1阳性率为24.60%,均为stx1a,stx2阳性率为35.71%,亚型包括stx2a、stx2d和stx2c,分别占stx2阳性菌株的53.33%、24.44%和22.22%,其余50株同时携带stx1a+stx2d、sx1a+stx2d或stx1a+stx2c基因;iha、saa、eae、paa和subA基因的阳性率分别为 99.21%、58.73%、29.37%、23.81%和 18.25%;PFGE将126株分离株分成49种不同的PFGE带型。本研究揭示了牛具有很高的STEC携带率,且菌株具有高度多样性。通过对中国非0157 STEC分离株亚碲酸钾抗性水平检测、对不同STEC选择性培养基的评价,以及根据牛粪便样品的分离效果,建议选择不含亚碲酸钾的大肠埃希菌培养基(MAC)与含有一定浓度亚碲酸钾的选择性培养基RBA-NT结合使用,可以提高从复杂菌群环境中非0157 STEC的分离率。该方法可为开展有针对性的非0157 STEC检测和监测提供重要参考,以及对提高识别STEC暴发风险的能力具有重要意义。(本文来源于《中国疾病预防控制中心》期刊2018-06-30）

韩友霞,濮吉,滕中秋,徐伟,张玫^[9]（2018）在《膜电喷雾质谱法快速检测临床样本中志贺毒素》一文中研究指出志贺毒素是大肠杆菌O157:H7重要的毒力因子,是毒力最强的毒素之一。本文建立了采用膜电喷雾质谱(MESI-MS/MS)快速检测人粪便样本中志贺毒素的方法。将两种志贺毒素的特异性肽段作为检测目标物,在蛋白水平上对志贺毒素进行检测。对肽段YNDDDTFTVK(YK1)和YNEDDTFTVK(YK2)的母子离子对建立了定量检测方法,并对检测方法学进行了验证。实验结果表明方法具有良好的检测精密度、准确度以及回收率。MESI-MS/MS具有去除基质效应的能力,可对酶解后的混合蛋白样本实现直接检测,全部操作过程可在3 h内完成。方法有望推广至其它细菌毒素的检测,且有望与便携式质谱相结合实现现场快速检测。(本文来源于《分析试验室》期刊2018年03期）

陈义宝,孙二超,杨斓,童贻刚,宋娇阳^[10]（2018）在《产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析》一文中研究指出产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌,是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌,从湖北某规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆菌噬菌体,命名为v B_Eco M_PHB05。采用双层平板法筛选并纯化得到一株噬菌体,采用透射电镜观察噬菌体颗粒;使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序,同时对噬菌体最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、裂解谱等生物学特性进行研究。结果表明,噬菌体v B_Eco M_PHB05在电镜下可见有一正多面体立体对称头部(直径约72 nm),含收缩性尾部(尾长约45 nm,尾宽20 nm),为肌尾科噬菌体;提取基因组,酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA;其最佳感染复数为0.1;一步生长曲线试验结果显示,噬菌体v B_Eco M_PHB05潜伏期约为20 min,平均裂解量约58 PFU/cell;基因测序结果表明,该噬菌体全基因组全长147 659 bp,G+C含量37.5%。噬菌体v B_Eco M_PHB05除对本身宿主菌产志贺毒素大肠杆菌(Escherichia coli O34)产生裂解外,还裂解其它产志贺毒素大肠杆菌和沙门菌。噬菌体v B_Eco M_PHB05为一株广谱烈性噬菌体,其基因组中不含耐药基因及毒力基因,具有开发为抗产志贺毒素大肠杆菌制剂的潜力。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年04期）

志贺毒素论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

试验针对产类志贺毒素大肠杆菌SLT-Ⅱe初步建立一种猪水肿病大肠杆菌的血清学检测方法。通过原核表达构建出重组菌pET28a-sumo-SLT-IIe/BL21在IPTG诱导下获得表达,表达产物以包涵体形式产生,使用十二烷基肌氨酸钠(SKL)变性的生化提纯步骤获取有生物学活性的重组蛋白。将提取的SLT-IIe蛋白作为抗原包被ELISA板,初步建立了特异性强的猪水肿病诊断方法,方阵滴定确定抗原最佳包被浓度为2μg/孔,最佳血清稀释浓度是1:25,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1:15 000,5%脱脂奶封闭1h,显色15 min。该方法的建立对猪水肿病流行病学调查以及预防和控制该病的发生有重要意义。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

志贺毒素论文参考文献

[1].温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲.I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立[J].江苏预防医学.2019

[2].王警,张雪寒,郭芸芸,张碧成,吴庆侠.类志贺毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)基因表达及间接ELISA方法的建立[J].畜牧兽医科学(电子版).2019

[3].佟盼盼,马凯琪,刘争辉,谢金鑫,苏红.新疆牛源产志贺毒素大肠杆菌耐药性及其ESBLs基因鉴定[J].畜牧兽医学报.2019

[4].杨斌,邹杰,羊扬,朱国强.产志贺毒素大肠杆菌检测技术研究进展[J].中国预防兽医学报.2019

[5].马崇礼,杨俊,段合波,毕旺来.非O157型产志贺毒素大肠杆菌分子进化和流行特征分析[J].生物化工.2018

[6].游淑珠,王小玉,冯家望,蔡教英,姚丽锋.LAMP实时浊度法快速检测食品中产志贺毒素大肠埃希氏菌[J].食品工业科技.2018

[7].傅珊珊.人源性非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离株特征及肠溶血素基因分型分析[D].中国疾病预防控制中心.2018

[8].范如岳.非O157产志贺毒素大肠埃希菌分离方法的评价和优化[D].中国疾病预防控制中心.2018

[9].韩友霞,濮吉,滕中秋,徐伟,张玫.膜电喷雾质谱法快速检测临床样本中志贺毒素[J].分析试验室.2018

[10].陈义宝,孙二超,杨斓,童贻刚,宋娇阳.产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析[J].中国兽医科学.2018

论文知识图

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