孤啡肽对新物体识别记忆的调节作用及机制研究

论文摘要

实验目的:孤啡肽（nociceptin/orphanin FQ,N/OFQ）是阿片受体样受体（opioid receptor-like 1 receptor,ORL1,也称为NOPR）的内源性配体,在体内广泛分布。孤啡肽参与调节疼痛、摄食、心血管调节、应激、焦虑和抑郁等生理功能。孤啡肽及其受体广泛分布于神经系统中,在空间记忆、恐惧记忆和物体识别记忆的调节中起重要作用。嗅周皮层是调节新物体识别（novel object recognition,NOR）记忆的关键脑区,N/OFQ受体高表达于嗅周皮层。然而,N/OFQ在嗅周皮层是否参与新物体识别记忆的调节仍然未知。此外,孤啡肽是在哪个阶段（获取、巩固及回想）参与新物体识别记忆的调控仍然不清楚。因此,本文旨在研究N/OFQ对新物体识别记忆获取、巩固及回想的影响,并研究其在嗅周皮层是否参与该记忆的调节。实验方法:1对小鼠进行侧脑室或双侧嗅周皮层埋管手术,并在行为学实验后通过HE染色来判断给药位置是否正确。2依据小鼠喜欢探索新鲜事物的特性建立新物体识别模型,研究N/OFQ给药小鼠和对照小鼠在NOR记忆上的差异。3在NOR实验的三个阶段（训练前、训练后及检测前）对小鼠侧脑室注射N/OFQ及对照液体,研究N/OFQ对NOR记忆获取、巩固和回想的影响。4在NOR实验训练前对小鼠侧脑室注射N/OFQ的拮抗剂Nphe,研究N/OFQ发挥作用的机制。5 NOR实验训练前在小鼠双侧嗅周皮层注射N/OFQ（0.1及0.3 nmol/侧）及对照液体,研究N/OFQ在嗅周皮层对NOR记忆的调节机制。6在小鼠侧脑室和双侧嗅周皮层中注射N/OFQ后进行旷场实验,研究N/OFQ是否会影响运动能力从而干扰新物体识别记忆的结果。实验结果:1 NOR实验训练前在小鼠侧脑室注射N/OFQ（0.3及1 nmol）及对照液体,训练阶段中各组小鼠无明显表现差异,检测阶段中对照组小鼠的识别指数显著高于N/OFQ给药组小鼠,且差异性呈剂量依赖性上升。说明训练前在侧脑室注射N/OFQ能够剂量依懒性的损伤新物体识别记忆。2 NOR实验训练后在小鼠侧脑室侧脑室注射N/OFQ（1及3 nmol）及对照液体,训练及检测阶段中N/OFQ给药组小鼠与对照组小鼠都无明显表现差异。说明训练后侧脑室注射N/OFQ对新物体识别记忆的巩固阶段没有影响。3 NOR实验检测前在小鼠侧脑室注射N/OFQ 1 nmol及对照液体,训练及检测阶段中N/OFQ给药组小鼠与对照组小鼠都无明显表现差异。说明检测前侧脑室注射N/OFQ对新物体识别记忆的回想阶段没有影响。4提前给予孤啡肽选择受体拮抗剂Nphe（[Nphe1]N/OFQ（1-13）NH2）,发现10nmol的Nphe可以拮抗N/OFQ对小鼠NOR记忆的损伤。说明N/OFQ是通过激活NOP受体发挥作用的。5在NOR实验训练前在小鼠双侧嗅周皮层注射N/OFQ（0.1及0.3 nmol/侧）及对照液体,训练阶段中各组小鼠无明显表现差异,检测阶段中对照组小鼠的识别指数显著高于N/OFQ给药组小鼠,且差异性呈剂量依赖性上升。说明嗅周皮层对于N/OFQ削弱NOR记忆发挥着关键作用。6旷场实验前在小鼠侧脑室注射N/OFQ（1及3nmol）及对照液体,检测过程中发现1nmol N/OFQ对小鼠运动有轻微抑制,3nmol N/OFQ对小鼠运动有显著抑制。在小鼠双侧嗅周皮层注射N/OFQ（0.3nmol）及对照液体,检测过程中发现0.3nmol N/OFQ对小鼠运动无影响。综合结果说明,N/OFQ对NOR记忆的损伤不受其调控的运动抑制作用影响。结论:孤啡肽（N/OFQ）在记忆的获取阶段特异性的损伤新物体识别记忆,而对该记忆的巩固和回想阶段无影响,且是通过激活N/OFQ的受体发挥作用的;嗅周皮层是介导N/OFQ调节新物体识别记忆的关键脑区,N/OFQ在嗅周皮层中会损害新物体识别记忆。

论文目录

• 摘要
• abstract
• 中英文缩略词表
• 第1章 前言
•   1.1 N/OFQ-NOP受体系统简介
•     1.1.1 孤啡肽
•     1.1.2 孤啡肽受体
•   1.2 学习与记忆
•   1.3 N/OFQ-NOP受体对学习与记忆的作用
•   1.4 N/OFQ-NOP受体系统对新物体识别记忆的作用
•   1.5 研究目的与意义
• 第2章 材料和方法
•   2.1 主要仪器和试剂
•     2.1.1 主要仪器设备
•     2.1.2 主要试剂
•   2.2 实验动物
•   2.3 实验方法
•     2.3.1 脑立体定位埋管手术
•     2.3.2 新物体识别实验
•     2.3.3 旷场实验
•     2.3.4 冰冻切片
•     2.3.5 HE染色
•     2.3.6 统计学分析
• 第3章 实验结果
•   3.1 侧脑室注射N/OFQ对新物体识别记忆的影响
•     3.1.1 训练前在侧脑室注射N/OFQ对新物体识别记忆的影响
•     3.1.2 训练后或检测前在侧脑室注射N/OFQ对新物体识别记忆的影响
•   3.2 训练前在侧脑室注射N/OFQ受体拮抗剂对N/OFQ作用的影响
•   3.3 嗅周皮层打药位点切片检验
•   3.4 训练前在双侧嗅周皮层注射N/OFQ对新物体识别记忆的影响
•   3.5 侧脑室与双侧嗅周皮层中注射N/OFQ对运动能力的影响
• 第4章 讨论
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 综述 孤啡肽和孤啡肽受体在学习与记忆中的作用研究进展
•   参考文献

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 田奡文

导师: 韩仁文

关键词: 孤啡肽,嗅周皮层,新物体识别记忆,获取

来源: 南昌大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 南昌大学

分类号: R338

总页数: 64

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