李炳森1王丽玉1曾丽2薛非凡2（1珠海正太制药有限公司519110；2湖北省襄阳市第五人民医院441000）
【摘要】目的建立感冒止咳糖浆的鉴别方法。方法使用TLC对金银花、薄荷脑、柴胡、葛根、黄芩进行薄层鉴别。结果TLC得到的薄层色谱中供试品在与绿原酸对照品、薄荷脑对照品、柴胡对照药材、葛根素对照品、黄芩苷对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结论本法简便、准确、可靠、专属性强、重现性好、可作为感冒止咳糖浆的鉴别方法。
【关键词】感冒止咳糖浆薄层色谱鉴别方法研究
【中图分类号】R28【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）01-0109-02
【Abstract】Objective:ToestablishthemethodofidentificationforGanmaozhikesyruples.Method:IdentificationwasusedwithThethinlayerchromatography(TLC)ofLoniceraejaponicaeflos、Menthol、Bupleuriradix、PuerariaelobataeradixandScutellariaeradix.Results:Thetestsampieaandtheirrespeereterencesubstancewerealikeinthatthesamecolorchromatographicspots.Conclusion:Thismethodissimple,accurate,reliablewithgoodspecificityandreproducibility,itcanbeusedforthemethodsofidentificationforGanmaozhikesyruples.
【Keywords】GanmaozhikesyruplesThinlayerchromatography(TLC)MethodidentificationStudies
感冒止咳糖浆[1]由柴胡、金银花、葛根、青蒿、连翘、黄芩、桔梗、苦杏仁、薄荷脑组成、功能主治为解表清热，止咳化痰。用于感冒或流感发热，头痛鼻塞，伤风咳嗽，咽痛，肢痛。原标准无鉴别，为提高质量标准的可控性、专属性。通过试验增加了金银花、薄荷脑、柴胡、葛根、黄芩的薄层色谱鉴别，可以更好的控制质量。
1、仪器与试药
1.1CP-225D电子天平北京赛多利斯仪器系统有限公司；
1.2ZF紫外分析仪上海康华生化仪器制造厂；
1.3KQ-100B超声波清洗仪昆山市超声仪器有限公司；
1.4柴胡对照药材：中国药品生物制品检定所，批号：121060-200504；
薄荷脑对照品：中国药品生物制品鉴定所，批号：0728-200005；
绿原酸对照品：中国药品生物制品鉴定所，批号：110753-200413；
黄芩苷对照品：中国药品生物制品鉴定所，批号：110715-200514；
葛根素对照品：中国药品生物制品鉴定所，批号：110752-200511；
1.5感冒止咳糖浆：批号：20121101、20121102、20121103珠海正太制药有限公司,
1.6硅胶G青岛海洋化工厂生产；
1.7硅胶H国药集团化学试剂有限公司；
1.8聚酰胺薄膜：台州市路桥四甲生化厂
1.9羧甲基纤维素钠、甲苯、三氯甲烷、甲酸、甲醇、乙醚、无水乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚(60～90℃)、乙醇均为分析纯。
2、方法与结果
2.1薄荷脑的薄层鉴别:
2.2.1供试品溶液的制备：取本品20ml置分液漏斗中，加乙醇10ml，摇匀，用石油醚（60～90℃）15ml提取，分取石油醚液，室温挥散至1ml，作为供试品溶液。
2.2.2对照品溶液的制备：取薄荷脑对照品加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液.。
2.2.3阴性溶液的制备：取除薄荷脑外的处方药材，按制法制备薄荷脑阴性样品；按供试品溶液制备方法制备薄荷脑阴性样品溶液。
2.2.4试验方法：照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液10µl，对照品溶液5µl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，分别以甲苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液-乙醇（2：8）的混合溶液，在100℃烘至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.2.5结果：阴性无干扰，专属性较强；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点（见图1）。
2.2柴胡的薄层鉴别:
2.2.1供试品溶液的制备：取本品10ml置分液漏斗中，加20ml水使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液加乙醇2ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液（40100）洗2次，每次40ml，分取正丁醇液，蒸干干，残渣加甲醇1ml溶解作为供试品溶液。
2.2.2对照药材溶液制备：取柴胡对照药材0.5g加乙醚30ml，回流30分钟，滤过，药渣挥干乙醚，加甲醇30ml，加热回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml溶解，照供试品溶液制备方法自“加乙醚提取3次”起，依法操作，即得对照药材溶液。
2.2.3阴性溶液的制备：取除柴胡外的处方药材，按制法制备柴胡阴性样品；按供试品溶液制备方法制备柴胡阴性样品溶液。
2.2.4试验方法：照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液10ul，对照药材溶液5ul分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液（10℃以下放置）为展开剂，展开（展距为13cm），取出，晾干，喷以1%对二甲氨基苯甲醛硫酸乙醇溶液(110)在80℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与柴胡对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.2.5结果：阴性无干扰，专属性较强；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点（见图2）。
2.3金银花薄层鉴别[2]
2.3.1供试品溶液的制备：取本品5ml，加甲醇10ml，摇匀，过滤，溶液作为供试品溶液。
2.3.2对照品溶液制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml中含1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3.3阴性溶液的制备：取除金银花外的处方药材，按制法制备金银花阴性样品；按供试品溶液制备方法制备金银花阴性样品溶液。
2.3.4试验方法：照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，分别以乙酸乙酯-甲酸-水（10：2：3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.3.5结果：阴性无干扰，专属性较强；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（见图3）。
2.4黄芩的薄层鉴别:
2.4.1供试品溶液的制备：取本品2ml，加75%的乙醇5ml，摇匀，过滤，滤液作为供试品溶液。
2.4.2对照品溶液的制备:取黄芩苷对照品适量，精密称定，用75%的乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。
2.4.3阴性样品溶液的制备:取除黄芩外的处方药材，按制法制备黄芩阴性样品；按供试品溶液制备方法制备黄芩阴性样品溶液。
2.4.4试验方法：照薄层照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各2ul，分别点于同一以聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.4.5结果:阴性无干扰，专属性较强；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（见图4）。
2.5葛根的薄层鉴别:
2.5.1供试品溶液的制备:取本品30ml，置水浴上蒸至近干，加硅藻土10g，研细，加乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。
2.5.2对照品溶液的制备:取葛根素对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.5.3阴性样品溶液的制备:取除葛根外的处方药材，按制法制备葛根阴性样品；按供试品溶液制备方法制备葛根阴性样品溶液。
2.5.4试验方法：照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液5ul，对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（28：10：1）为展开剂，展开（展距为13cm），取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.5.5结果:阴性无干扰，专属性较强；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点（见图5）。
3、薄层鉴别方法
3.1薄荷脑的薄层鉴别取本品20ml置分液漏斗中，加乙醇10ml，摇匀，用石油醚（60～90℃）15ml提取，分取石油醚液，室温挥散至1ml，作为供试品溶液。取薄荷脑对照品，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液10µl，对照品溶液5µl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，分别以甲苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%香草醛硫酸溶液-乙醇（2：8）的混合溶液，在100℃烘至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.2柴胡的薄层鉴别取本品10ml置分液漏斗中，加20ml水使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液加乙醇2ml，用水饱和的正丁醇提取三次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液（40100）洗2次，每次40ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解作为供试品溶液。取柴胡对照药材0.5g加乙醚30ml，回流30分钟，滤过，药渣挥干乙醚，加甲醇30ml，加热回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml溶解，照供试品溶液制备方法自“加乙醚提取3次”起，依法操作，即得对照药材溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液10µl，对照药材溶液5µl分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液（10℃以下放置）为展开剂，展开（展距为13cm），取出，晾干，喷以1%对二甲氨基苯甲醛硫酸乙醇溶液(110),在80℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与柴胡对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.3金银花的薄层鉴别取本品5ml，加甲醇10ml，摇匀，过滤，溶液作为供试品溶液。取绿原酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml中含1mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，分别以乙酸乙酯-甲酸-水（10：2：3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.4黄芩的薄层鉴别取本品2ml，加75%的乙醇5ml，摇匀，过滤，滤液作为供试品溶液。取黄芩苷对照品适量，精密称定，用75%的乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述溶液各2ul，分别点于同一以聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.5葛根的薄层鉴别取本品30ml，置水浴上蒸至近干，加硅藻土10g，研细，加乙酸乙酯50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。取葛根素对照品适量，精密称定，用甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液5ul，对照品溶液2ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（28：10：1）为展开剂，展开（展距为13cm），取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
参考文献
[1]中华人民共和国药典委员会：卫生部药品标准中药成方制剂第三册[S]标准编号：WS3-B-0650-91[s]1992.188.
[2]陈学松张涛感冒止咳糖浆的质量标准研究[J]《中国药师》2008年第5期506-508页.