导读:本文包含了半胱氨酸蛋白酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:苦豆子,发根农杆菌,功能鉴定,耐旱性
半胱氨酸蛋白酶基因论文文献综述
赵亚男[1]（2019）在《苦豆子半胱氨酸蛋白酶SaCP1基因的克隆及功能验证》一文中研究指出地球水资源约13亿8600万立方千米,其中咸水占97.5%,可用淡水资源相对贫乏。随着人类经济的发展和人口膨胀,水资源短缺现象日益严重,这也导致了干旱地区的扩大和干旱程度的增加,从而加剧了农业干旱。在中国,干旱对农业造成的危害最大,且有受害程度逐年增加的趋势。因此,提高作物的耐旱能力已成为作物抗逆育种亟待解决的问题。随着分子生物学转基因技术的进步,利用转基因技术提高植物耐旱性这一方法已得到广泛重视。在耐旱植物中分离并克隆显着提高植物耐旱性的基因是转基因技术中耐旱基因的选择有效方法之一。苦豆子(Sophora alopecurides L.)是豆科槐属多年生小灌木,广泛分布于我国西北部干旱荒漠地区,具有耐旱、耐盐碱和耐寒的特性,是抗逆基因丰富的基因资源库。本实验从苦豆子苗期cDNA酵母表达文库筛选得到一个耐旱相关基因半胱氨酸蛋白酶SaCP1,并对此基因进行了初步的结构分析和功能验证。主要研究结果如下:1.对苗期苦豆子进行耐旱指标鉴定,结果表明,苦豆子具有强耐旱能力。2.从苦豆子苗期cDNA酵母表达文库中克隆SaCP1基因。SaCP1 ORF全长为534 bp,编码177个氨基酸残基,预测相对分子质量为19.075 KDa。蛋白质叁级结构预测结果表明,该基因属于木瓜蛋白酶家族。3.利用荧光定量PCR技术对SaCP1基因进行基因表达分析,结果表明,SaCP1在苦豆子叶片、茎秆、根系中均表达,且在根部表达量最高。4.对苦豆子进行盐(NaCl)、碱(NaHCO_3)、干旱(PEG6000)处理后,进行苦豆子苗期转录组测序,结果表明,SaCP1在盐、干旱胁迫下表达量上调,在碱胁迫下表达量下调。SaCP1参与细胞凋亡过程。5.对转入SaCP1基因的酿酒酵母INVSC1 Ura缺陷型进行高渗透胁迫处理,结果表明,SaCP1基因提高了酿酒酵母INVSC1 Ura缺陷型的高渗透胁迫耐受性。6.利用豆科模式转化系统将SaCP1基因转化发根农杆菌K599,侵染大豆子叶节,对转基因大豆发状根进行干旱胁迫(山梨醇)和盐胁迫(NaCl),结果表明,与对照相比,转SaCP1的大豆发状根的耐旱性和耐盐性显着提高,说明SaCP1能提高转基因大豆根系的耐旱性和耐盐性。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
何勉,梁凯,郑宝,唐莉莉,何姗姗[2]（2019）在《华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆表达及其生物信息学分析》一文中研究指出目的:克隆、表达华支睾吸虫的全长分子量为36.96 ku半胱氨酸蛋白酶(36.96 ku-CsCP)基因,并分析其生物学特性。方法:提取华支睾吸虫成虫总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增目的基因,构建pET28a(+)-36.96 ku-CsCP重组质粒,测序正确后转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析;并运用NCBI和ExPASy等有关的生物信息学分析工具,对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。结果:测序结果显示,36.96 ku-CsCP基因序列与GenBank上已发表的序列有2个氨基酸位点突变(aa_(32)由E→K,aa_(86)由E→G);重组质粒经IPTG诱导后,目的蛋白在大肠杆菌中成功表达;生物信息学分析显示36.96 ku-CsCP蛋白由信号肽(aa _(1-18))和前体蛋白(aa _(19-327))组成,为胞外分泌性蛋白,属于木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶中C1A超家族,理论等电点为5.11,为亲水性蛋白;在36.96 ku-CsCP蛋白的二级结构中,α-螺旋、β-折迭、β-转角和无规则卷曲所占的比例分别为28.75%、18.35%、7.03%和45.87%,含有11个亲水性和7个柔韧性较高的区域(临界值2.0),23个表面可及性较高的区域(临界值1.9),4个保守结构区域,10个翻译后修饰位点,13个潜在B细胞抗原表位与3个T细胞表位。结论:成功克隆、表达了华支睾吸虫36.96 ku-CsCP基因,并获得该蛋白的生物信息学数据,可为后续相关研究提供参考。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2019年05期）
刘健伟,王雁[3]（2019）在《半胱氨酸蛋白酶抑制剂C基因G73A位点和载脂蛋白E基因多态性与血管性认知障碍的临床研究》一文中研究指出目的探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂C基因(CST3)G73A位点和载脂蛋白E(APOE)基因多态性与血管性认知功能障碍(VCI)的关系。方法采用病例-对照研究,收集2015年1至6月青岛大学附属医院神经内科门诊、住院患者与同期门诊健康体检者,其中血管性认知障碍(VCI)患者155例,无认知损害的脑梗死(CI)患者210例,同期健康体检者(ND)250例。应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR/RFLP)技术检测CST3 G73A位点和APOE基因的多态性。应用卡方检验进行基因型及等位基因分析,经多元Logstic回归纠正影响因素后分析这两种基因多态性对VCI的影响。结果 CST3 G73A位点基因型频率(χ~2=3.40,P=0.18)及等位基因频率(χ~2=3.95,P=0.14)均差异无统计学意义;APOEε4/4基因携带型与非携带型比较,发生VCI的风险是CI组4.98倍(P<0.01,95%CI:1.94～12.80),是ND组的5.68倍(P<0.01,95%CI:2.22～14.60)。将CST3 G73A位点与APOE基因经多元Logstic回归纠正相关危险因素后,结果表明,G73A位点为AA突变型时,APOEε4/4基因携带型发生VCI的风险是CI组的7.19倍(纠正OR:6.30,95%CI:1.34～29.60,P=0.013),是ND组的8.22倍(纠正OR:7.26,95%CI:1.55～34.10,P=0.008)。结论 CST3 G73A位点AA基因突变型可能增加APOEε4/4基因携带型发生VCI的发病风险。(本文来源于《中华诊断学电子杂志》期刊2019年02期）
许泽远,苟洪兰,段柳剑,张忠明[4]（2019）在《百脉根半胱氨酸蛋白酶基因在根瘤衰老过程中的表达分析》一文中研究指出为明确半胱氨酸蛋白酶与定型根瘤衰老的相关性,通过与已鉴定的紫云英半胱氨酸蛋白酶AsNODf32进行序列比对分析,从百脉根中鉴定出2个与根瘤衰老相关的蛋白酶基因LjCyp1和LjCyp5。蛋白序列及结构分析表明,LjCyp1和LjCyp5同源性高达96.2%,均含有2个典型的半胱氨酸蛋白酶结构域和液泡定位信号肽,属于木瓜蛋白酶家族。体外酶活检测显示,2个蛋白都具有半胱氨酸蛋白酶活性。通过Realtime PCR和组织化学定位分析表明,2个蛋白酶基因主要在成熟和衰老的根瘤中表达。结果表明LjCyp1和LjCyp5可能在百脉根根瘤衰老过程中发挥重要作用。(本文来源于《华中农业大学学报》期刊2019年01期）
白慧芳,柯琪文,陈韵秋,刘芷晴,张玲敏[5]（2018）在《广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶AcCBL1和AcCBL2基因的克隆、表达及鉴定》一文中研究指出目的克隆、表达广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶1 (AcCBL1)和AcCBL2基因,分析重组半胱氨酸蛋白酶rAcCBL1和rAcCBL2的免疫反应性。方法基于广州管圆线虫Ⅳ期幼虫的cDNA文库筛选获得AcCBL1和AcCBL2基因,构建pET-28a-AcCBL1和pET-28a-AcCBL2重组质粒,转入大肠埃希菌BL21 (DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达、镍柱纯化后,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分析重组蛋白表达情况。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白对6×His标签单克隆抗体、感染广州管圆线虫的小鼠和患者血清的免疫反应性。结果AcCBL1和AcCBL2基因PCR扩增产物分别约为1 000、1 100 bp。SDS-PAGE结果显示, rAcCBL1为可溶表达蛋白,相对分子质量(M_r)约为37 800; rAcCBL2主要以包涵体形式存在,约为M_r 40 800。Western blotting结果显示, rAcCBL1和rAcCBL2能与6×His标签单克隆抗体、感染广州管圆线虫的小鼠和患者血清特异性结合。结论成功克隆和表达AcCBL1和AcCBL2基因,二者表达产物均具有良好的免疫反应性。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2018年05期）
殷雪艳,杨柳,罗万麟,赵爽,刘彪[6]（2018）在《烟草半胱氨酸蛋白酶的基因和蛋白序列分析》一文中研究指出以ABW71226.1、BAA96501.1、ACB70409.1、AAW78660.1和ADV41672.1为材料,采用生物数据分析工具对烟草的半胱氨酸蛋白酶的基因和蛋白序列进行分析,分别以GSDS、MEME和Signal P 4.1工具对其基因结构、保守基序和信号肽进行检测。结果显示,Nt CP-1和Nt CP-2基因具有7个外显子,Nt CP-3和Nt CP-4基因含有4个外显子,Nt CP-5基因具有3个外显子,Nt CP-1、Nt CP-2和Nt CP-5基因具有上游序列,Nt CP-1、Nt CP-2、Nt CP-4和Nt CP-5基因具有下游序列;检测Nt CP共有5个Motif,其核心保守基序区为Motif-1—Motif-2—Motif-4,且位于木瓜蛋白酶家族半胱氨酸蛋白酶结构域中,Motif-1和Motif-2含有半胱氨酸和谷氨酰胺;Nt CP均属于信号肽,Nt CP-1和Nt CP-2的信号区分布相同(1~22),Nt CP-3和Nt CP-4的信号区分布相同(1~20),Nt CP-5的信号区为1~29。(本文来源于《天津农业科学》期刊2018年09期）
江红霞,李喜莲,侯富军,刘勇杰,李飞[7]（2018）在《日本沼虾半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆及其组织表达特征》一文中研究指出半胱氨酸蛋白酶抑制因子(CST)是一种能够可逆结合并抑制半胱氨酸蛋白酶类的活性的蛋白,为了明确日本沼虾(Macrobrachium nipponense)CST基因(Mn CST)序列及其在日本沼虾卵巢中的作用,本研究利用RACE方法克隆获得日本沼虾Mn CST全长cDNA序列,利用qRT-PCR分析了其在不同组织和不同发育阶段的卵巢中的表达情况,并利用RNA干扰(RNAi)技术初步分析了Mn CST在日本沼虾卵巢发育中的作用。结果显示,Mn CST cDNA序列全长6199 bp,包含1183 bp 5′非编码区、2304 bp 3′非编码区和2709 bp开放阅读框,编码903个氨基酸残基,其氨基酸序列上有6个cystatin-like(半胱氨酸蛋白酶抑制因子样)结构域和42个磷酸化位点;Mn CST基因在各个组织中均有表达,肠中表达量最高;日本沼虾不同发育阶段的卵巢中均有Mn CST基因表达,Ⅳ期卵巢中表达量最高,Ⅱ期卵巢中表达量最低;Mn CST基因在日本沼虾卵巢中的表达变化与组织蛋白酶B(Cts B)和组织蛋白酶L(Cts L)基因的表达变化基本是一致的,但对卵黄蛋白原(Vg)基因的表达没有直接影响。Mn CST在日本沼虾卵巢中的作用可能主要是抑制Cts B和Cts L的活性,在日本沼虾卵巢发育过程中对Vg的水解起间接的调控作用。(本文来源于《中国水产科学》期刊2018年05期）
邓鹏,黎杏梅,陈华东,唐亚辉,刘光华[8]（2018）在《鼻用激素治疗鼻息肉对髓样细胞白血病1基因和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达的影响》一文中研究指出目的探讨鼻用激素治疗鼻息肉的机制及对其髓样细胞白血病1(MCL-1)基因和半胱氨酸天冬氨酸酶蛋白-3(Caspase-3)基因表达的影响。方法选取35例鼻息肉患者作为观察组,均在接受丙酸氟替卡松鼻喷剂治疗14 d后行内镜下鼻息肉切除术治疗,分别留取治疗前后鼻息肉组织,将激素治疗前采集的鼻息肉组织作为单纯鼻息肉组,将激素联合手术切除术后采集的鼻息肉组织作为鼻息肉激素组;另选取35例同期单纯鼻中隔偏曲患者作为对照组,采集其正常的中鼻甲组织作为鼻腔黏膜组。3组标本均行常规苏木精-伊红(HE)染色和免疫组化染色。记录10个高倍视野中的嗜酸性粒细胞(EOS)数量,比较3组MCL-1、Caspase-3表达水平。结果单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组的EOS数量均多于鼻腔黏膜组,且单纯鼻息肉组的EOS数量多于鼻息肉激素组(P<0.05)。单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的MCL-1阳性率依次降低(均P<0.05);单纯鼻息肉组、鼻息肉激素组和鼻腔黏膜组的Caspase-3阳性率依次升高(均P<0.05)。单纯鼻息肉组和鼻息肉激素组的MCL-1表达与EOS浸润程度呈正相关,Caspase-3表达与EOS浸润程度呈负相关(P<0.05)。结论丙酸氟替卡松鼻喷雾剂作为经典的鼻用人工合成类固醇激素,可有效治疗鼻息肉,其作用机制可能与下调MCL-1表达和促进Caspase-3活化有关。(本文来源于《广西医学》期刊2018年15期）
洪子茜,杨秋萍,侯馨怡,邓鸽,张立[9]（2018）在《甘薯半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(CPI)克隆及功能初步分析》一文中研究指出半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitor,CPI)是一类广泛存在于动植物体内的蛋白质超家族,它可以与巯基蛋白水解酶形成动态平衡,参与细胞内的多种生命活动,对植物的生长发育和逆境生长具有重要的意义。为了研究甘薯CPI基因的功能,本研究以徐薯18为研究材料,利用甘薯转录组数据库中的注释信息,通过RT-PCR扩增得到全长CPI基因,并对其进行了生物信息学分析。将甘薯CPI基因插入到原核表达载体pET-32a(+)中,并将其转入到大肠杆菌BL21,然后在高温、PEG6000等胁迫培养基中培养,发现含有CPI基因的重组菌株在干旱和高温的环境下胁迫能力有所增加。这表明CPI基因在甘薯抗逆过程中可能起到了一定的作用,为未来进一步研究甘薯CPI基因的功能以及利用遗传工程技术提升甘薯抗逆作用打下了基础。(本文来源于《新农业》期刊2018年15期）
李蒙[10]（2018）在《不同植物半胱氨酸蛋白酶及其基因的生物信息学分析》一文中研究指出采用生物信息学方法对GenBank中已经登录的10种植物的半胱氨酸蛋白酶(Cysteine Protease,CP)基因和氨基酸序列进行了解析,对其组成成分、理化性质、翻译后修饰位点、二级结构、亚细胞定位和分子进化等进行了预测和推断。结果表明:10种植物CP的基因全长在1053~1443 bp,编码350~480个氨基酸,在蛋白质N端存在信号肽;10种植物CP都具有酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N端肉豆蔻酰化修饰位点;大多数植物CP具有N端糖基化位点和蛋白激酶C磷酸化位点;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主;根据构建的CP系统进化树,不同科植物具有一定的亲缘关系。(本文来源于《江西农业学报》期刊2018年07期）
半胱氨酸蛋白酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:克隆、表达华支睾吸虫的全长分子量为36.96 ku半胱氨酸蛋白酶(36.96 ku-CsCP)基因,并分析其生物学特性。方法:提取华支睾吸虫成虫总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增目的基因,构建pET28a(+)-36.96 ku-CsCP重组质粒,测序正确后转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析;并运用NCBI和ExPASy等有关的生物信息学分析工具,对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。结果:测序结果显示,36.96 ku-CsCP基因序列与GenBank上已发表的序列有2个氨基酸位点突变(aa_(32)由E→K,aa_(86)由E→G);重组质粒经IPTG诱导后,目的蛋白在大肠杆菌中成功表达;生物信息学分析显示36.96 ku-CsCP蛋白由信号肽(aa _(1-18))和前体蛋白(aa _(19-327))组成,为胞外分泌性蛋白,属于木瓜蛋白酶样半胱氨酸蛋白酶中C1A超家族,理论等电点为5.11,为亲水性蛋白;在36.96 ku-CsCP蛋白的二级结构中,α-螺旋、β-折迭、β-转角和无规则卷曲所占的比例分别为28.75%、18.35%、7.03%和45.87%,含有11个亲水性和7个柔韧性较高的区域(临界值2.0),23个表面可及性较高的区域(临界值1.9),4个保守结构区域,10个翻译后修饰位点,13个潜在B细胞抗原表位与3个T细胞表位。结论:成功克隆、表达了华支睾吸虫36.96 ku-CsCP基因,并获得该蛋白的生物信息学数据,可为后续相关研究提供参考。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
半胱氨酸蛋白酶基因论文参考文献
[1].赵亚男.苦豆子半胱氨酸蛋白酶SaCP1基因的克隆及功能验证[D].吉林大学.2019
[2].何勉,梁凯,郑宝,唐莉莉,何姗姗.华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆表达及其生物信息学分析[J].广西医科大学学报.2019
[3].刘健伟,王雁.半胱氨酸蛋白酶抑制剂C基因G73A位点和载脂蛋白E基因多态性与血管性认知障碍的临床研究[J].中华诊断学电子杂志.2019
[4].许泽远,苟洪兰,段柳剑,张忠明.百脉根半胱氨酸蛋白酶基因在根瘤衰老过程中的表达分析[J].华中农业大学学报.2019
[5].白慧芳,柯琪文,陈韵秋,刘芷晴,张玲敏.广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶AcCBL1和AcCBL2基因的克隆、表达及鉴定[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2018
[6].殷雪艳,杨柳,罗万麟,赵爽,刘彪.烟草半胱氨酸蛋白酶的基因和蛋白序列分析[J].天津农业科学.2018
[7].江红霞,李喜莲,侯富军,刘勇杰,李飞.日本沼虾半胱氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆及其组织表达特征[J].中国水产科学.2018
[8].邓鹏,黎杏梅,陈华东,唐亚辉,刘光华.鼻用激素治疗鼻息肉对髓样细胞白血病1基因和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3基因表达的影响[J].广西医学.2018
[9].洪子茜,杨秋萍,侯馨怡,邓鸽,张立.甘薯半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(CPI)克隆及功能初步分析[J].新农业.2018
[10].李蒙.不同植物半胱氨酸蛋白酶及其基因的生物信息学分析[J].江西农业学报.2018