无血清悬浮培养BHK21细胞增殖伪狂犬病毒的参数研究

论文摘要

旨在筛选适合生物反应器悬浮培养BHK21细胞的无血清培养基,并利用该技术培养伪狂犬病毒。通过筛选市售的无血清培养基,以细胞形态、细胞活率和增殖倍数作为驯化指标,对BHK21细胞进行无血清驯化;对使用10 L和40 L生物反应器无血清悬浮培养BHK21细胞的参数进行研究;同时利用筛选的无血清培养基和悬浮细胞进行伪狂犬病毒增殖测试。结果表明,市售培养基Ⅰ符合筛选要求,其培养的细胞形态比较均一,结团少,细胞生长2 d的增殖倍数为3.5倍,细胞活率在95%以上;生物反应器悬浮培养BHK21细胞的最适参数为转速80 r/min、pH值7.2、DO 60%;利用该工艺技术培养伪狂犬病毒,当接种细胞密度为6×106 cells/mL,接毒剂量为0.3%时,48 h收获的病毒液滴度可达109.5TCID50/mL。该试验实现了伪狂犬病毒的无血清悬浮生产,为其生产工艺的优化提供了可能。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•     1.1.1 BHK21贴壁细胞株:
•     1.1.2 BHK21悬浮细胞:
•     1.1.3 伪狂犬病毒:
•     1.1.4 培养基:
•     1.1.5 血清:
•     1.1.6 仪器设备:
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 悬浮细胞培养方法:
•     1.2.2 无血清培养基的筛选:
•     1.2.3 生物反应器无血清悬浮、放大培养细胞及相关参数摸索:
•     1.2.4 伪狂犬病毒增殖参数筛选:
• 2 结果
•   2.1 无血清培养基的筛选结果
•   2.2 生物反应器无血清悬浮、放大培养细胞及相关参数试验结果
•   2.3 伪狂犬病毒增殖参数筛选结果
• 3 讨论与分析
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 魏金凤,侯蕾蕾,杨康利,王进产,李文龙,王延辉

关键词: 生物反应器,无血清培养基,参数,伪狂犬病毒

来源: 畜牧与饲料科学 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 普莱柯生物工程股份有限公司

分类号: S852.655

页码: 6-10

总页数: 5

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