重组果聚糖蔗糖酶的发酵优化及应用

论文摘要

为了研究不同条件下重组短小芽孢杆菌产果聚糖蔗糖酶的最适条件以及利用重组酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖的最适转化条件。以前期构建的产果聚糖蔗糖酶重组短小芽孢杆菌Brevibacillus brevis/pNCMO2-lsc作为菌种,通过单因素试验以及正交试验确定其最适产酶的发酵培养基为:葡萄糖20 g/L、氮源（工业酵母粉∶棉籽粉=2∶1,质量比）为40 g/L、CaCl20.5 mmol/L,最适产酶温度30℃。在最优条件下发酵培养,果聚糖蔗糖酶的酶活可达62.1 U/mL,是优化前的3.69倍。利用该重组果聚糖蔗糖酶转化蔗糖-乳糖制备低聚乳果糖,在蔗糖和乳糖质量浓度均为200 g/L情况下,确定其最适转化条件:反应温度35℃,pH 6.0,加酶量为2 U/g底物,反应8 h后低聚乳果糖转化率可达39.1%。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株
•   1.2 培养基以及主要试剂
•   1.3 摇瓶发酵产果聚糖蔗糖酶
•   1.4 酶活力测定方法
•   1.5 菌浓 （OD600） 的测定
•   1.6 单因素实验
•   1.7 正交试验
•   1.8 果聚糖蔗糖酶制备低聚乳果糖工艺优化
•     1.8.1 加酶量和反应时间对低聚乳果糖转化率的影响
•     1.8.2 温度对低聚乳果糖转化率的影响
•     1.8.3 pH对低聚乳果糖转化率的影响
•   1.9 低聚乳果糖测定方法以及产率的计算
•     1.9.1 低聚乳果糖测定方法
•     1.9.2 低聚乳果糖转化率的计算
• 2 结果与分析
•   2.1 氮源对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•     2.1.1 氮源种类对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•     2.1.2 不同氮源配比对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•     2.1.3 复配氮源质量浓度对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•   2.2 碳源对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•     2.2.1 碳源种类对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•     2.2.2 碳源质量浓度对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•   2.3 金属离子对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•   2.4 培养温度对B.brevis产果聚糖蔗糖酶的影响
•   2.5 正交试验
•   2.6 果聚糖蔗糖酶制备低聚乳果糖的初步研究
•     2.6.1 加酶量和反应时间对低聚乳果糖转化率的影响
•     2.6.2 温度对低聚乳果糖转化率的影响
•     2.6.3 pH对低聚乳果糖转化率的影响
• 3 结语

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 唐煜,陈晟,段绪果,吴敬,吴丹

关键词: 果聚糖蔗糖酶,发酵优化,低聚乳果糖

来源: 食品与生物技术学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 食品科学与技术国家重点实验室江南大学,江南大学工业生物技术教育部重点实验室

基金: 国家杰出青年科学基金项目(31425020),江苏高校优秀科技创新团队项目[111计划(111-2-06)]

分类号: TQ925

页码: 97-103

总页数: 7

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