幼兔颅盖骨成骨细胞的分离培养及鉴定

论文摘要

背景:成骨细胞的提取分离尚无公认的高效简便的实验方法。目的:探讨用改良酶消化法体外分离、培养并鉴定新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞的实验方法。方法:实验利用成纤维细胞胰酶消化时脱壁早,终止消化后贴壁快的特点,采用改良酶消化法分离3 d龄新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞并用差速贴壁法纯化培养。倒置显微镜每日观察细胞形态及其生长状况,采用MTT法检测细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线,测定碱性磷酸酶含量,免疫组织化学染色法检测Ⅰ型胶原、骨钙素,Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,RUNX2)表达,茜素红染色矿化结节等对成骨细胞及其生物化学特性进行鉴定。结果与结论:(1)成功分离提取并差速贴壁法纯化培养成骨细胞;(2)分离培养的成骨细胞贴壁生长,显示正常的成骨细胞形态和生长特征;细胞增殖能力良好;(3)细胞碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、骨钙素、RUNX2染色均阳性,常规培养21d茜素红染色形成矿化结节;(4)结果证实,改良酶消化法培养出的成骨细胞具有典型的成骨细胞特征,成分单一,存活率高。

论文目录

• 文题释义:
• 0引言Introduction
• 1 材料和方法Materials and methods
•   1.1 设计
•   1.2 时间及地点
•   1.3 材料
•     1.3.1 实验用试剂与仪器
•     1.3.2 实验动物
•   1.4 实验方法
•     1.4.1 成骨细胞分离培养并纯化
•     1.4.2差速贴壁法纯化成骨细胞[3-4]
•     1.4.3 细胞形态观察
•     1.4.4 成骨细胞增殖活性的测定
•     1.4.5 碱性磷酸酶染色
•     1.4.6 碱性磷酸酶活性测定
•     1.4.7 免疫细胞化学染色
•     1.4.8茜素红染色
•   1.5 主要观察指标
• 2 结果Results
•   2.1 细胞形态观察
•   2.2 细胞增殖活性的测定结果
•   2.3碱性磷酸酶染色结果
•   2.4 碱性磷酸酶活性测定结果
•   2.5 免疫细胞化学染色结果
•   2.6 成骨细胞茜素红染色结果
• 3 讨论Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 艾力麦尔旦·艾尼瓦尔,李鹏,刁兆峰,木合塔尔·霍加

关键词: 颅骨,成骨细胞,细胞分离,组织工程,颅盖骨,改良酶消化法,差速贴壁法,分离培养,鉴定,组织构建

来源: 中国组织工程研究 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 新疆维吾尔自治区人民医院口腔科,深圳市罗湖区人民医院

基金: 国家自然科学基金资助项目(81560180)~~

分类号: R329.2

页码: 996-1000

总页数: 5

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