导读:本文包含了反义阻断论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核苷酸,细胞,核酸,西林,环氧化物,平滑肌,葡萄球菌。
反义阻断论文文献综述
邓益斌,温旺荣[1]（2013）在《反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断乙肝病毒C基因表达》一文中研究指出目的探讨针对乙肝病毒C基因反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断病毒基因表达的效果。方法各实验组经尾静脉给药后,采用real-time PCR、时间分辨免疫荧光技术、免疫组织化学法等技术分别检测血清HBV DNA、HBeAg含量及肝细胞内HBcAg的表达情况。结果注射锁核酸后,对乙肝病毒核酸的复制和乙肝病毒e抗原的合成均有较强的抑制作用,注射后1、3和5 d,HBV DNA的平均抑制率分别19.24%、39.20%和44.47%;HBeAg的平均抑制分别为30.71%、51.14%和63.46%;小鼠肝细胞的HBcAg阳性细胞数也较对照组明显减少。结论针对乙肝病毒C基因的反义锁核酸在转基因小鼠体内能有效抑制病毒基因的复制和表达,提示C基因可作核酸药物治疗的有效靶位。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2013年07期）
达飞,侯征,孟静茹,贾敏,罗晓星[2]（2013）在《反义锁核酸阻断耐甲氧西林金黄色葡萄球菌agr群体感应系统》一文中研究指出目的:利用反义策略,设计、筛选针对agrA mRNA的反义锁核酸,阻断agr群体感应系统,降低MRSA毒力因子的表达,减小细菌生存压力,为抗耐药菌感染提供一种新策略。方法:应用Primer Premier 5.0和RNA structure 4.5两种软件,设计、筛选2条针对agrA mRNA的反义寡核苷酸序列,对其进行锁核酸修饰,并与透膜肽(KFF)3K共价连接,将这两条反义序列导入细菌体内。体外与MRSA共培养,观察细菌生存情况。实时定量PCR检测其对agrA及agr群体感受系统的效应分子RNAⅢ和下游毒力基因hla的转录水平的影响,Western blot检测其是否能抑制α-溶血素的表达。结果:两条反义锁核酸序列PLNA34和PLNA522在体外均无抗菌活性,但都能不同程度的抑制agrA,RNAⅢ和hla的转录水平;相比较而言,PLNA34的抑制效果更佳,并能明显抑制α-溶血素的分泌表达。结论:agrA可作为抗MRSA感染的新靶点,为新型抗MRSA药物的研发提供了理论基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2013年05期）
方丽[3]（2013）在《FasL反义寡核苷酸阻断舌鳞癌细胞免疫逃逸的实验研究》一文中研究指出目的肿瘤的发生、发展与细胞凋亡机制及机体免疫功能的异常密切相关,通过Fas/FasL系统抵抗Fas介导的凋亡并诱导免疫细胞凋亡,在肿瘤细胞的免疫逃逸中发挥着重要的作用。研究表明包括口腔鳞癌在内的许多肿瘤内都有FasL的高表达且这种高表达与肿瘤的免疫逃逸有关。本研究通过设计合成特异性的FasL反义寡核苷酸(FasL antisense oligodeoxynucleotide, FasL ASODN)转染舌鳞癌细胞,观察FasL ASODN对舌鳞癌细胞自身增殖和凋亡的影响,以及对FasL蛋白表达及mRNA水平的影响。并通过舌鳞癌细胞表面的FasL的功能检测及SCC-9与Jurkat共培养实验,探讨FasL ASODN在舌鳞癌细胞免疫逃逸中的作用及对T细胞诱导凋亡的影响。方法1、根据FasL基因序列设计合成特异的互补于mRNA起始密码区的FasL ASODN,并设同长度的与mRNA起始密码区序列相同的正义寡脱氧核苷酸(sense oligodeoxynucleotide, SODN)做对照,均经硫代磷酸化修饰,且5’端进行FAM绿色荧光标记。并用阳离子脂质体介导转染人舌鳞癌细胞。荧光倒置显微镜观察及流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测转染效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度ASODN/SODN在转染前后不同时间对Tca8113细胞增殖的抑制情况；FCM测定转染前后诱导Tca8113细胞的凋亡情况,包括早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率等指标。2、FCM检测Jurkat细胞(Jurkat细胞与活化的T细胞功能相似,且高表达Fas,可作为活化的T细胞广泛应用于实验研究)表面Fas的表达：将FasL中和抗体NOK-2处理前后人舌鳞癌细胞株SCC-9细胞与Jurkat细胞共培养,探究SCC-9细胞表面FasL诱导T细胞凋亡的情况。根据预实验结果,选择0.4μmol/L的ASODN/SODN为转染的终浓度,通过脂质体介导法转染SCC-9细胞,FCM检测ASDON/SODN转染前后细胞表面FasL表达的变化,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction, RT-PCR)法检测细胞FasL mRNA的变化,用与Jurkat细胞共培养法检测口腔鳞癌细胞诱导T细胞凋亡的变化。结果1、通过荧光倒置显微镜观察及FCM检测发现脂质体一定的情况下,在一定范围内,ASODN的浓度越高,转染效率越高。MTT结果显示FasL ASODN对Tca8113细胞的增殖有明显抑制作用(P<0.05),FCM对细胞凋亡的检测结果显示反义链组与正义链组、空白对照组及脂质体组相比,总凋亡率有明显差异(P<0.05)。反义链组与空白对照组及脂质体组比较,除早期凋亡率外,其余各项均有统计学意义；而与正义链组比较,只有反义链组的晚期凋亡率、总凋亡率、总死亡率叁项有明显的差异(P<0.05)。2、通过流式细胞术检测Jurkat细胞表面Fas的表达率为97.6±2.95%,SCC-9细胞与Jurkat细胞共培养后能诱导Jurkat细胞凋亡,其凋亡率为61.5±2.44%；用FasL中和抗体NOK-2封闭SCC-9细胞表面的FasL后,Jurkat细胞的凋亡率降为6.32±0.56%。经FasL ASODN作用24h后SCC-9细胞FasL的表达率下降,FasL ASODN浓度为0.4μmol/L的处理组FasL的表达率为8.5±1.15%,与对照组27.7±2.54%相比均有显着差异(P<0.05);而相应浓度FasL SODN处理组FasL表达率与对照组比较均无显着差异(P>0.05)。SCC-9细胞经FasL ASODN作用后FasL mRNA水平下降,以β-actin基因作内参照,ASODN组FasL mRNA的相对表达量为0.19±0.01,而SODN组分别为0.98±0.22。SCC-9细胞经FasL ASODN作用后,与Jurkat细胞共培养,Jurkat细胞凋亡率减少至18.04±1.01%,与对照组Jurkat细胞凋亡率57.08±7.43%比较有显着差异(P<0.05)。而SODN组Jurkat细胞凋亡率为57.98±6.74%,与对照组比较无显着差异。结论1、FasL ASODN对Tca8113细胞的增殖有一定的抑制作用,能够促进其凋亡。2、SCC-9细胞表达有功能的FasL,能够诱导Jurkat细胞凋亡,从而抑制T细胞的免疫功能。说明Fas/FasL途径是口腔鳞癌细胞免疫逃逸的重要机制之一,可成为免疫治疗的新靶点。3、经FasL ASODN转染的SCC-9细胞,FasL mRNA及FasL蛋白表达下降；与Jukrat细胞共培养后,Jurkat细胞的凋亡率下降。表明FasL ASODN可有效地封闭口腔鳞癌细胞FasL表达,而使其诱导T细胞凋亡的能力减弱。因此,FasL ASODN对口腔鳞癌细胞免疫逃逸的抗肿瘤作用,有望逆转口腔鳞癌细胞的免疫抑制作用为反义基因技术及细胞因子在肿瘤生物治疗中的应用提供了新的理论及实验依据。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2013-04-19）
李仲杰[4]（2011）在《1：microRNAs参与7，8-二氢二醇-9，10-环氧苯并（a）芘诱发的FL细胞应答反应研究 2：地塞米松诱导的DNA聚合酶β过表达和反义阻断稳定细胞系的建立》一文中研究指出苯并(a)芘-7,8-二氢二醇-9,10-环氧化物(benzo(a)pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide, BPDE)是多环芳烃类(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)环境化学污染物苯并(a)芘(BaP)在体内经微粒体酶代谢活化的产物,被认为是BaP的终致癌物。BPDE具有亲电性碳原子活性基团,能与组成核酸的碱基和组成蛋白质的氨基酸亲核基团共价结合形成加合物,损伤生物大分子的结构和功能。BPDE损伤不是一个细胞被动接受的过程,DNA损伤会激活细胞内核苷酸切除修复、细胞周期阻滞、激活低保真度的跨损伤复制等保护性机制,以及p53, PI-3K/Akt/JNKs, MAPKs/AP-1, IKKβ/NF-κB等信号通路被激活。为了全面了解细胞对BPDE的早期应答反应,揭示其致癌机制。本实验室采用基因组学和蛋白质组学的方法,在全基因组和蛋白质水平对FL细胞在BPDE暴露后引起的早期细胞应答反应做了系统的研究。采用AfFymetrix HG-U133 Set(～33000个基因)全基因组芯片来筛选FL人羊膜上皮细胞BPDE处理后4h的应答基因发现,在基因表达水平引起1764个差异表达基因。这些BPDE的应答基因功能涉及广泛,包括细胞周期调节,转录调节,RNA剪接、蛋白质/脂类代谢、细胞骨架、胞内运输、细胞生长、凋亡、DNA修复和DNA损伤反应等；涉及的信号通路包括：p53/ Ras/MAPK/ Akt/PKB/ PKC/ Wnt和TGFbeta通路等。应用蛋白质组学方法,对应答效应蛋白进行的研究中发现量效关系中有65个蛋白斑点在BPDE处理后12小时发生了显着的变化。时效研究中一共有128个蛋白斑点的表达发生了改变。MALDI-TOF鉴定的结果表明,这些得到成功鉴定的蛋白质功能涉及面非常广,包括转录调控,细胞周期,细胞增殖,信号转导,细胞骨架,发育,代谢以及其他功能未明的等。全基因组芯片表达谱和蛋白组学的研究表明：BPDE作用后细胞内发生了广泛的变化,揭示了细胞对BPDE应答机制的复杂性。但是表达谱芯片结果发现有1764个基因表达发生改变,而蛋白质组学仅发现194个蛋白的改变,除去由于技术限制的原因,可能细胞内还存在翻译水平抑制众多基因表达的机制。对此问题的研究,引起我们浓厚的兴趣。近年来的研究表明,MicroRNA (miRNA)是一类广泛存在于真核生物中,由内源基因编码的长度为～21-24核苷酸的非蛋白编码单链小分子RNA,在基因转录后调节中起着的重要的作用。miRNA通过碱基配对介导序列特异性的基因沉默作用,包括降解靶mRNA和抑制靶mRNA的翻译。我们推测miRNA也参与了BPDE的早期细胞应答反应,为了证实这一想法,我们采用microRNA芯片和qRT-PCR研究了miRNA在BPDE早期暴露细胞应答中的作用。microRNA芯片分析采用联川公司miRNA 14.0版μParaflo(?)双色标记微阵列芯片,分析了在0.5μM浓度BPDE处理后2小时组和DMSO对照组中miRNAs表达谱的变化。结果：与对照组相比,在处理组表达改变的miRNA和miRNA*(?)有41个(p<0.1),其中18个表达下调,23个表达上调。经统计学分析筛选出有显着性差异表达的miRNAs有10个(p<0.05),其中上调的有5个,下调的有5个；：miRNAs*有4个,其中上调2个,下调2个qRT-PCR验证芯片结果用Taqman miRNA qRT-PCR试剂盒,在芯片样品和新处理样品,验证了显着性表达差异的miRNAs中选出的7个miRNA。结果：发现has-miR-509-5p是主要发生改变的miRNA基因(p<0.01),比对照表达上调1.8倍,与芯片结果相一致。Inhibtor抑制miR-509-5p基因在BPDE诱导的FL细胞中表达将合成的miR-509-5p inhibitor寡核苷酸片段和对照寡核苷酸片段,转染细胞培养72h后,分别用含BPDE或DMSO的无血清培养基处理2h,换新鲜全培养基培养液培养2h。收集细胞,TRIzol试剂提取总RNA, qRT-PCR检测miR-509-5p在各组中的表达。结果：转染对照序列组不影响BPDE诱发的miR-509-5p基因表达上调,而转染inhibtor组,DMSO处理细胞中miR-509-5p基因的表达被下调,与Control组DMSO处理细胞相比,抑制效率达60%(p<0.01); BPDE处理不再诱导其表达的上调。miR-509-5p靶基因预测用靶基因预测软件Target scan 5.1预测miR-509-5p靶基因。结果：得到受miR-509-5p调控的靶基因265个。将预测结果与本实验室全基因组筛出的有显着性差异表达的基因进行配对分析,结果发现有65个共同的基因。从中挑选出CDC14、DOCK4、EIF5B、IGF1R、MEIS1. NF1、PRKCA、RREB1、RAD23B、TDG、TET1等11个重要的靶基因,进行后续靶基因分析。qRT-PCR验证筛出的miR-509-5p靶基因用Takara SYBR Green qRT-PCR试剂盒,在芯片样品、新处理样品、转染miR-509-5p基因inhibitor样品,检测分析挑选的11个靶基因的表达变化,找出受miR-509-5p调控的靶基因。结果：在芯片样品和新处理样品中CDC14、DOCK4、IGF1R、MEIS1、NF1、PRKCA、RREB1、RAD23B等8个基因在BPDE暴露后2h表达均显着性下调(p<0.01)。在miR-509-5p基因表达抑制样品中,CDC14B, DOCK4, IGF1R, MEIS1, NF1, PRKCA, RREB1等7个基因表达显着上调(p<0.01),而RAD23B改变不明显。结论：a.首次证实miRNAs参与了BPDE引起的FL细胞早期应答反应,确认miR-509-5p是FL细胞早期应答反应的miRNA。b.首次证实了mir-509-5p通过转录后调解节抑制靶基因CDC14B, DOCK4, IGF1R, MEIS1 NFl, PRKCA, RREB1等的表达。这些基因功能涵盖细胞骨架稳定、信号转导、细胞周期调控、DNA损伤修复、转录调控等。说明mir-509-5p在BPDE引起的FL细胞早期应答反应中起着重要作用,是细胞对BPDE早期应答的分子标志物。c.这些新的发现对了解BPDE致癌效应早期的分子机制提供了新的理论基础。基因组持续受到各种内源性和外源性因子的损伤,为了保证正常的生长控制与遗传信息DNA复制的准确性,修复这些损伤是保持基因组稳定性的关键。修复失败则导致基因突变,进而增加细胞癌变的风险。其中DNA碱基修改,如脱氨,烷基化和氧化,或由于自发脱嘌呤形成的无嘌呤/嘧啶(AP)位点等损伤出现最频繁。这些小的DNA损伤主要通过碱基切除修复(base excision repair, BER)途径来完成。DNA聚合酶β(DNA polymeraseβ, po1β)是BER修复途径中不可替代的酶,因此,po1β被认为在碱基损伤修复和基因组完整性的维持中其关键作用,实验证明po1β下调或po1β基因突变都会导致由于DNA修复缺陷的基因突变。然而,近年来的研究表明,po1β可能参与了广泛的DNA代谢反应,包括DNA复制,重组,减数分裂和DNA跨损伤合成等,但在合成的DNA链上表现为高碱基错配率。这种错误配对可能是由于po1β干扰了其他精确DNA聚合酶的正常功能,而其本身又缺乏3′→5′缺乏校对活性,使得其复制保真度下降,导致基因组不稳定。因此,建立诱导型po1β稳定高表达表达和表达下调细胞系,并利用建立的细胞系,研究po1β生物学功能的变化,对了解DNA po1β表达改变引起的基因突变和基因组不稳定机制具有重要的理论意义。在本研究中,我们构建了诱导型反义阻断和表达DNAPo1β的真核表达载体,然后将构建的地塞米松(dexamethasone, DEX)诱导的真核表达载体pMAMneo-amp-pol-β-, pMAMneo-amp-pol-β+,和对照pMAMneo-amp-,分别转染FL细胞。转染细胞用含400μg/LGeneticin (G418)的MEM培养基筛选,直至细胞集落生成,挑取单集落扩大培养,建立了FL-pMAMneo-amp-, FL-pol-β和FL-po1-β+细胞系。建立的细胞系用DEX诱导72小时后的qRT-PCR和免疫印迹分析表明：FL-po1-β细胞中Po1β的表达比对照显著下调,FL-po1-β+细胞中Po1β的表达比对照显著上调。此外,MNNG的敏感性试验表明：与对照相比,Po1β表达下调的FL-po1-β细胞对烷化剂MNNG的敏感性增加,相反,Po1β过表达的FL-po1-p+细胞对烷化剂MNNG的敏感性下降。细胞周期分析表明,聚合酶p表达的变化并不显着影响细胞周期分布。结论：成功建立了诱导Po1β表达和下调的人FL细胞系,为后续深入研究Po1β在环境致癌物诱导表达升高后的致突变,致癌机制提供了良好的细胞模型。(本文来源于《浙江大学》期刊2011-04-08）
杨璐,曹悦鞍,彭朝胜,夏菁,张文洛[5]（2011）在《Wt1反义寡核苷酸阻断白血病微小残留病wt1基因表达的体外研究》一文中研究指出本研究通过wt1反义寡核苷酸(ASO)抑制wt1基因的表达,观察微小残留病模型及患者基因表达的变化。取56例复诊急性白血病完全缓解(CR)患者骨髓,用RT-PCR方法筛选出wt1基因表达阳性的骨髓标本。白血病细胞系微小残留病(MRD)模型及筛选出的wt1阳性急性白血病CR患者骨髓标本进行了细胞培养并用wt1ASO处理细胞,观察wt1基因表达的变化。结果表明:wt1基因的敏感性是10-3-10-4;56例急性白血病CR患者骨髓wt1基因的表达阳性率为16%。用wt1ASO处理wt1表达阳性的K562、HL-60细胞系MRD模型以及9例存在MRD的急性白血病CR患者骨髓,发现wt1ASO组有效的阻断了wt1基因的表达,而正义寡核苷酸组和对照组wt1基因的表达仍为阳性。结论:wt1ASO体外能够阻断白血病MRD中残留白血病细胞wt1基因的表达。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2011年01期）
孙晓彩,李文斌,李清君,张敏,羡晓辉[6]（2010）在《p38 MAPK反义寡聚脱氧核苷酸阻断肢体缺血预处理诱导的脑缺血耐受》一文中研究指出目的:观察p38MAPK反义寡聚脱氧核苷酸(As-ODN)对肢体缺血预处理(LIP)诱导的脑缺血耐受的影响。方法:48只永久凝闭双侧椎动脉的Wistar大鼠分为8组(n=6):sham组、LIP组、脑缺血损伤组、LIP+脑缺血损伤组、双蒸水+LIP+脑缺血损伤组、p38MAPKAs-ODN组和p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组,p38MAPKAs-ODN的剂量又分为5nmol/5μl和10nmol/5μl。所有动物均在sham手术后或末次全脑缺血/再灌注后7天断头取脑,硫堇染色观察海马CA1区锥体神经元迟发性死亡情况。结果:sham组和LIP组均未见延迟性神经元死亡(DND)。与sham、LIP组相比,脑缺血损伤组出现了明显的DND,表现为组织学分级(HG)升高和锥体神经元密度(ND)下降(P<0.05)。LIP可显着抑制脑缺血损伤引起的DND。与LIP+脑缺血损伤组相比,p38MAPKAs-ODN+LIP+脑缺血损伤组出现了显着的DND,表现为HG升高、ND降低(P<0.05),且此种变化与p38MAPKAs-ODN的注射剂量呈明显正相关。结论:p38MAPKAs-ODN可阻断LIP诱导的脑缺血耐受,进一步证实了p38MAPK表达上调参与了LIP诱导的脑缺血耐受。(本文来源于《中国应用生理学杂志》期刊2010年02期）
王嵩浩,盛净,蔡文玮,陆平,陈谊[7]（2010）在《反义Smad3转染阻断TGF-β_1信号转导对球囊损伤后大鼠血管内膜增生的影响》一文中研究指出目的通过建立大鼠颈动脉球囊损伤模型并体内转染反义Smad3腺病毒载体,研究阻断TGF-β1/Smad3信号途径对损伤后大鼠颈动脉内膜增生的影响。方法 90只SD大鼠随机分为单纯损伤组(单纯球囊损伤大鼠颈动脉内膜)、干预组(损伤后局部保留灌注反义Smad3腺病毒液)、空白对照组(损伤后局部灌注空载腺病毒液);另取6只同周龄大鼠作为正常对照组(不进行任何处理)。各组分别在损伤后第1天、3天、1周、2周、1月、3月时处死大鼠并取材。ELISA法检测单纯损伤组和正常对照组不同时间点血清中TGF-β1的质量浓度;Real-timePCR和HE染色法分别检测叁个损伤组在不同时间点Smad3mRNA表达和血管壁内膜、中膜厚度。结果单纯损伤组各时间点TGF-β1的质量浓度较正常对照组显着升高(P<0.05)。干预组第1天、3天、1周、2周、1月时的Smad3mRNA表达和第1天、2周、3月时的内膜/中膜比值均较单纯损伤组明显下降(P<0.05);单纯损伤组与空白对照组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论体内转染反义Smad3可以阻断TGF-β1/Smad3信号转导,从而抑制内膜增生。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2010年05期）
殷冬梅,吴娟娟,井园,王新,葛锦涛[8]（2009）在《反义寡核苷酸阻断乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达和意义》一文中研究指出目的探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因试剂MBO-asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义。方法MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7/AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO-asGCS对MCF-7-AdrR存活率的影响,RT-PCR和Western印迹分析对耐药型细胞GCS的表达变化,检测对caspase 3/7的活性影响及流式细胞仪测定MBO-asGCS对耐药型细胞的凋亡情况。结果MBO-asGCS转染人耐药型乳腺癌细胞MCF-7/AdrR后,与未转染组细胞的IC50分别是0.18μmol/L和12.50μmol/L,药物敏感性提高了69倍;MBO-asGCS抑制GCS的mRNA表达70%,减少GCS蛋白表达39%(P<0.01);转染MBO-asGCS后耐药型细胞的caspase 3/7活性上升53%(P<0.05),细胞凋亡率上升5.6倍(P<0.01)。结论GCS过表达是耐药型乳腺癌细胞的特征,靶向人GCS的反义寡核苷酸可直接抑制GCS的过表达,诱导耐药细胞凋亡,有效逆转其耐药性,GCS可能是治疗耐药型乳腺癌的一个潜在靶点。(本文来源于《同济大学学报(医学版)》期刊2009年06期）
肖亮,王海梁,刘芳,宋少华,谢江平[9]（2009）在《反义肽核酸阻断CXCR3表达延长大鼠肝脏移植物存活期》一文中研究指出目的研究反义肽核酸(antisense peptide nucleic acid,asPNA)阻断CXC趋化因子受体3(CXCR3)表达延长大鼠肝脏移植物存活期的作用和机制,探讨asPNA技术治疗肝移植急性排斥反应(acute rejection,AR)的潜在临床价值。方法采用改良"二袖套"法建立大鼠原位肝移植模型。分为4组:肝移植急性排斥组,肝移植免疫抑制剂组,asPNA组,asPNA对照组。RT-PCR法检测T细胞内CXCR3-mRNA表达水平,Western-blotting免疫印迹法检测CXCR3蛋白表达水平,流式细胞仪测定外周血CD3+T细胞表面CXCR3表达水平。AR诊断参照Banff标准。结果asPNA在体外能有效抑制T细胞内CXCR3-mRNA和CXCR3蛋白表达水平;显着延长大鼠肝脏移植物存活期;asPNA组大鼠肝移植术后第7天外周血和肝脏细胞内CXCR3的表达较AR组及asPNA对照组明显减少(P<0.05),与FK506组呈现出类似的趋势。结论asPNA能有效抑制T细胞内CXCR3基因和蛋白表达水平,降低大鼠AR发生率并延长肝脏移植物存活期,具有潜在临床应用价值。(本文来源于《肝胆胰外科杂志》期刊2009年05期）
程智慧,蔡文玮,陆平,马绍骏,陈谊[10]（2009）在《反义Smad3阻断TGF-β_1信号转导对血管平滑肌细胞增殖能力的影响》一文中研究指出目的观察反义Smad3腺病毒载体转染增生型血管平滑肌细胞(VSMC)后对其增殖能力的影响。方法构建大鼠颈总动脉急性球囊损伤模型。取损伤处血管组织,组织块贴壁法培养增生型VSMC,反义Smad3腺病毒载体转染(实验组)。以空载病毒作为阴性对照组,以无病毒载体作为空白对照组。抽提转染后细胞总RNA,RT-PCR检测转染后各组Smad3 mRNA表达;MTT比色法检测转染后细胞增殖能力的变化。结果与阴性对照组和空白对照组比较,转染后实验组Smad3 mRNA表达明显减少;转染后第2、3、5天,实验组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),转染后第7天各组细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论反义Smad3腺病毒载体转染对增生型VSMC具有增殖抑制作用,为通过基因修饰阻断TGF-β1信号转导从而预防增生性血管病变奠定了基础。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2009年08期）
反义阻断论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:利用反义策略,设计、筛选针对agrA mRNA的反义锁核酸,阻断agr群体感应系统,降低MRSA毒力因子的表达,减小细菌生存压力,为抗耐药菌感染提供一种新策略。方法:应用Primer Premier 5.0和RNA structure 4.5两种软件,设计、筛选2条针对agrA mRNA的反义寡核苷酸序列,对其进行锁核酸修饰,并与透膜肽(KFF)3K共价连接,将这两条反义序列导入细菌体内。体外与MRSA共培养,观察细菌生存情况。实时定量PCR检测其对agrA及agr群体感受系统的效应分子RNAⅢ和下游毒力基因hla的转录水平的影响,Western blot检测其是否能抑制α-溶血素的表达。结果:两条反义锁核酸序列PLNA34和PLNA522在体外均无抗菌活性,但都能不同程度的抑制agrA,RNAⅢ和hla的转录水平;相比较而言,PLNA34的抑制效果更佳,并能明显抑制α-溶血素的分泌表达。结论:agrA可作为抗MRSA感染的新靶点,为新型抗MRSA药物的研发提供了理论基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
反义阻断论文参考文献
[1].邓益斌,温旺荣.反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断乙肝病毒C基因表达[J].基础医学与临床.2013
[2].达飞,侯征,孟静茹,贾敏,罗晓星.反义锁核酸阻断耐甲氧西林金黄色葡萄球菌agr群体感应系统[J].中国生物工程杂志.2013
[3].方丽.FasL反义寡核苷酸阻断舌鳞癌细胞免疫逃逸的实验研究[D].安徽医科大学.2013
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