转移因子对猪丹毒杆菌SpaA抗原免疫效果的影响

论文摘要

为了探寻转移因子(Transfer factor,TF)对猪丹毒杆菌SpaA(Surface protective antigen A)蛋白抗原免疫效果的影响,将重组SpaA蛋白与双相佐剂乳化后(称SpaA抗原)免疫小鼠,取免疫小鼠和未免疫小鼠脾脏,以超滤法分别制备特异性TF和普通TF,并利用BCA法测定所得TF的质量分数,经过无菌及安全性检测后,将2种TF分别腹腔接种至小鼠体内,24 h后,对2组TF处理后的小鼠均免疫SpaA抗原,并以未接种TF的免疫小鼠作为对照(仅免疫组)。分别于免疫后12 d、21 d和30 d对小鼠进行采血,用间接ELISA法对小鼠血清进行抗体检测。结果表明,利用原核表达系统表达的重组SpaA蛋白分子质量60 ku且具有可溶性;以超滤法制备的特异性TF质量浓度为2.56 mg/mL,普通TF质量浓度为2.40 mg/mL,且2种TF安全无毒;抗体检测数据显示,2种TF处理组在免疫后21、30 d的抗体水平均高于仅免疫组,且差异显著,而2种TF处理组之间抗体水平差异不显著。因此,TF能诱导SpaA抗原快速产生抗体,提高SpaA抗原的免疫效果,但与TF的特异性关系不大,表明TF可作为猪丹毒杆菌基因工程亚单位疫苗的免疫增效剂,提高免疫动物的抗体水平。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 试验材料
•     1.1.1 试验小鼠及分组
•     1.1.2 主要仪器及试剂
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 SpaA疫苗的制备
•       1.2.1.1 SpaA蛋白的诱导表达
•       1.2.1.2 SpaA蛋白的纯化及疫苗制备
•     1.2.2 小鼠特异性TF的制备
•     1.2.3 小鼠普通TF的制备
•     1.2.4 BCA法测定小鼠TF
•     1.2.5 小鼠TF的无菌检测
•     1.2.6 小鼠TF的安全性检测
•     1.2.7 动物免疫试验
•     1.2.8 间接ELISA法检测小鼠血清猪丹毒IgG抗体
• 2 结果与分析
•   2.1 SpaA蛋白的表达及纯化
•   2.2 小鼠TF的质量浓度
•   2.3 小鼠TF的无菌检测和安全性试验结果
•   2.4 小鼠血清猪丹毒IgG抗体检测结果
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡辉灿,刘洋,姚清,赵墩,余兴龙

关键词: 转移因子,特异性,猪丹毒杆菌,抗原,抗体水平

来源: 河南农业科学 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 湖南农业大学动物医学院

基金: 湖南省战略性新兴产业科技攻关类项目(2016GK4015)

分类号: S852.4

DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.04.020

页码: 135-138

总页数: 4

文件大小: 413K

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