糖蛋白基因表达对人永生化角质形成细胞株活性的影响及机制

论文摘要

目的探讨糖蛋白（GP）基因表达对人永生化角质形成细胞株活性的影响及相关机制。方法体外培养HaCaT人永生化表皮细胞,设计并合成3组GP130 siRNA序列,转染HaCaT细胞,从mRNA和蛋白质水平筛选并验证最佳siRNA序列和浓度。分别于转染HaCaT细胞24 h、48 h时,使用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞术检测细胞增殖和增殖周期;实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）、Western印迹检测白细胞介素（IL）-6 mRNA和蛋白表达。结果培养24 h时siRNA1组、siRNA-nc组、空白对照组HaCaT细胞增殖率之间差异无统计学意义（P>0.05）;培养48 h时siRNA1组HaCaT细胞增殖率明显低于siRNA-nc组、空白对照组（P<0.05）。培养24 h时G1期、S期、G2期的HaCaT细胞水平在siRNA1组、siRNA-nc组、空白对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）;培养48 h时siRNA1组G1期HaCaT细胞数量明显高于siRNA-nc组、空白对照组,S期和G2期细胞数量明显低于siRNA-nc组、空白对照组（P<0.01）;培养48 h时siRNA1组G1期细胞数量明显高于培养24 h时,G2期细胞数量明显低于培养24 h时（P<0.01）。培养24 h时siRNA1组、siRNA-nc组、空白对照组IL-6 mRNA及蛋白表达水平之间差异无统计学意义（P>0.05）;培养48 h时siRNA1组IL-6 mRNA及蛋白表达水平明显低于siRNA-nc组、空白对照组（P<0.01）;培养48 h时siRNA1组IL-6 mRNA及蛋白表达水平明显低于培养24 h时（P<0.01）。结论下调GP130基因表达可抑制HaCaT细胞增殖,影响细胞增殖周期;其机制可能通过抑制IL-6表达,经Janus激酶（JAK）-信号转导与转录激活子（STAT）3信号通路调控HaCaT细胞增殖。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要材料与试剂
•   1.2 siRNA制备与分组
•   1.3 细胞培养与转染
•   1.4 细胞增殖检测
•   1.5 细胞周期检测
•   1.6 实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测
•   1.7 Western印迹检测蛋白水平
•   1.8 统计学分析
• 2 结 果
•   2.1 siRNA对GP130基因的抑制效率
•   2.2 120 pmol/L siRNA1沉默GP130基因效果验证
•   2.3沉默GP130基因对细胞增殖的影响
•   2.4沉默GP130基因对细胞周期的影响
•   2.5沉默GP130基因对细胞IL-6 mRNA和蛋白表达的影响
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王丽昆,岳海龙,孙小强,刘阳,姜峰,毕庭民,刘燕,何艳舫

关键词: 人永生化角质形成细胞,糖蛋白基因,白细胞介素

来源: 中国老年学杂志 2019年21期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 华北理工大学附属医院皮肤科,开滦总医院麻醉科,华北理工大学机能实验室,华北理工大学附属医院妇产科

分类号: R329.2

页码: 5353-5355

总页数: 3

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