导读:本文包含了脂质体法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转染,细胞,脂质体,质粒,巴马,载体,骨骼肌。
脂质体法论文文献综述
邢书涵,李方舟,曹玉桃,顾美超,倪和民[1]（2016）在《利用脂质体法建立转Toll样受体4基因大尾寒羊胎儿成纤维细胞株的研究》一文中研究指出利用脂质体转染法获得转Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)基因的成纤维细胞,将其作为供体细胞,再通过体细胞核移植技术构建重构胚,最终生产出转TLR4基因且性别可控的大尾寒羊。本研究通过原代培养大尾寒羊胎儿皮肤成纤维细胞,并进行SRY基因性别鉴定,利用脂质体转染法转入TLR4基因,然后分别从形态学与分子水平检测TLR4基因的表达,将稳定表达转TLR4的成纤维细胞核移植入绵羊去核卵母细胞中构建重构胚。最终获得5个稳定表达TLR4的阳性细胞克隆,经SRY基因性别鉴定为雌性细胞株,通过实时荧光定量PCR分析,在第4代转染的细胞中TLR4表达量最高,比未转染细胞高出7.4816倍(P<0.01),卵裂的重构胚中有EGFP的表达。试验成功构建出含TLR4基因的重构胚,为今后生产出性别可控的抗病转基因绵羊地方新品种奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2016年05期）
朱志坚,于燕妮,陶欣[2]（2015）在《慢病毒及脂质体法转染原代软骨细胞的实验研究》一文中研究指出目的利用慢病毒载体及Lipofectamine 2000脂质体转染大鼠原代软骨细胞,探讨转染软骨细胞的理想条件。方法采用机械—酶消化法获取原代软骨细胞,经Ⅱ型胶原(ColⅡ)鉴定后,使用慢病毒载体介导GFP及利用Lipofectamine 2000介导的FAM-siRNA分别转染原代软骨细胞,倒置荧光显微镜检测转染效率,MTT法测定原代软骨的增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果采用脂质法转染软骨细胞不理想,转染率不到10%。运用慢病毒载体后转染率明显高于脂质体法,且随感染复数(病毒滴度×病毒液体积/细胞数,MOI)增加而增加,MOI为100时,转染率可达92.85%。MTT及流式结果显示,低MOI时,软骨细胞活力及凋亡率与对照组相比差异无统计学意义;当高MOI(200)时,细胞活力[(81.32±10.72)%]明显低于对照组,而细胞凋亡率[(21.37±2.80)%]明显高于对照组。结论当MOI为100时可作为转染软骨细胞安全有效的条件,这为细胞转染技术在软骨细胞的研究领域提供实验基础。(本文来源于《贵州医药》期刊2015年08期）
张禾璇,单可人,何燕,张婷,王婵娟[3]（2014）在《脂质体法与电穿孔法转染两种细胞效率的比较》一文中研究指出目的对比脂质体与电穿孔法对HepG2、SGC7901/ADM两种细胞的转染效率。方法以HepG2、SGC7901/ADM细胞为研究对象,采用脂质体法和电穿孔法分别转染pcDNA3.1-EGFP质粒,流式细胞仪计算细胞存活率,借助绿色荧光标志蛋白eGFP测算转染效率。结果利用脂质体转染eGFP质粒至HepG2细胞所获得的阳性转染率为(20.8±2.1)%,而电穿孔法转染效率增高至(49.6±2.5)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。利用脂质体转染eGFP质粒至SGC7901/ADM细胞所获得的阳性转染率为(25.4±1.3)%,而电穿孔法转染效率增高至(52.6±2.1)%,二者比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论使用电穿孔法能明显提高大片段载体的转染效率。(本文来源于《重庆医学》期刊2014年33期）
郝朝亮,朱向星,曾永联,全守能,卢晟盛[4]（2014）在《脂质体法构建广西巴马小型猪转基因体细胞及转基因克隆胚的生产》一文中研究指出脂质体法是一种传统的向哺乳动物细胞导入外源基因的方法,然而其转染效率受多种因素影响。本研究将从脂质体和质粒DNA量、转染暴露时间以及混合孵育时间等四方面进行探索,以寻找最佳的转染体系。试验结果表明最佳转染体系为:脂质体1.25μL、DNA 0.7μg、脂质体-DNA混合孵育0 min以及转染暴露6 h。随后我们用优化过的转染体系对新生广西巴马小型猪肾脏成纤维细胞进行转绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)操作,获得了(26.45±2.11)%的转染率,并以此为核供体经体细胞核移植技术成功构建表达GFP的广西巴马小型猪克隆胚胎,同时证实转基因克隆胚的体外发育能力比得上非转基因克隆胚。这为我们构建用于人类疾病研究的基因修饰广西巴马小型猪奠定了基础。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年01期）
苏蕊,杨钟,杨波,张燕军,赵艳红[5]（2013）在《脂质体法转染山羊骨骼肌特异细胞条件的优化》一文中研究指出试验旨在通过脂质体转染法检测pIMAU-EGFP载体在山羊骨骼肌细胞中的表达情况,并探索其最佳的转染条件。在构建的适合携带外源基因的山羊骨骼肌特异表达载体pIMAU-EGFP基础上,以绿色荧光蛋白为报告基因,采用脂质体转染法检测了pIMAU-EGFP载体在山羊骨骼肌细胞中的表达,并对转染条件进行了摸索。试验结果表明,成功把测序验证正确的pIMAU-EGFP载体转染到山羊骨骼肌细胞中,筛选的最佳转染条件:脂质体与质粒的最佳比例为1∶2,质粒浓度为3.5μg/μL,细胞密度不低于80%,以转染24~36h观察记录转染效率为宜。本试验初步建立了转染山羊骨骼肌细胞的方法,绿色荧光蛋白可作为报告基因优化脂质体转染条件,这将为快速和规模化筛选山羊肉质特性相关基因提供新思路和研究方法。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2013年12期）
徐玉东,王宇,魏颖,尹磊淼,杨永清[6]（2013）在《叁种脂质体法转染试剂转染原代大鼠气道平滑肌细胞效果的比较》一文中研究指出气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)是呼吸道的重要组成部分之一,受气道内各类免疫细胞所释放的细胞因子和炎性介质的调节产生相应的收缩,其自身也能够分泌细胞因子、趋化因子、生长因子、黏附分子和基质金属蛋白酶等,参与气道炎症、气道高反应性与气道重塑的发生发展,是研究哮喘、COPD等气道呼吸性疾病细胞分子机制的重要载体[1]。国内外研究中使用的ASMCs大多从活组织(比如动物气管、支气管和活检样品等)中分离并原代培养获得,这比细胞系更能准确地模拟来源组织在体内环境的特异性特征。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2013年05期）
邓廷贤,庞春英,张滢寅,杨炳壮,张秀芳[7]（2013）在《脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化》一文中研究指出试验旨在研究脂质体介导基因转染水牛肾脏成纤维细胞时如何获得较高的转染效率。本研究将以绿色荧光蛋白基因为标记基因,利用Lipofectamine LTX介导外源DNA转染水牛肾脏成纤维细胞,探讨脂质体用量、质粒用量、质粒大小、转染时间、细胞初始接种密度对转染效率的影响。结果表明,4μg pmaxGFP质粒DNA与4μL脂质体转染6h,其细胞活性达98%,可获得较满意的转染效率。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2013年05期）
张旭,马红,孙亚蒙,汪亮,付博[8]（2013）在《脂质体法介导EGFP基因在细胞中的表达分析》一文中研究指出为了研究增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在上皮细胞中的表达情况,试验采用脂质体法介导真核表达质粒EGFP-C1转染PK15细胞和JEG-3细胞,分别在转染的24小时和48小时观察荧光的表达情况。结果表明:在荧光显微镜下,EGFP蛋白在PK15细胞和JEG-3细胞中均得到表达,相同条件下PK15细胞的转染效率高于JEG-3细胞,且在JEG-3细胞中EGFP均一表达,而在部分PK15细胞中EGFP表达主要聚集于细胞核区域,细胞状态对亚细胞定位存在重要的影响。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2013年07期）
王博蔚,高尚,朱振威,刘春丽,朱镇[9]（2012）在《脂质体法介导pIRES2-EGFP-hVEGF165转染人胎盘源间充质干细胞》一文中研究指出目的:构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165,通过脂质体法将其转入人胎盘源间充质干细胞(HPMSCs)中,鉴定hVEGF165的表达活性及携带目的基因的HPMSCs的多向分化潜能。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人白血病细胞HL-60中扩增出hVEGF165的基因片段,构建pIRES2-EGFP-hVEGF165重组质粒,经酶切检测其构建的正确性,通过脂质体法转染HPMSCs后分别采用RT-PCR、Western blotting法及MTT法检测其转录和表达活性;荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP),检测含有报告基因EGFP空载体及携带报告基因和目的基因的真核表达载体转染靶细胞的情况;并再次鉴定转染后HPMSCs的多向分化潜能。结果:成功构建重组质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165;RT-PCR、Western blotting及MTT法检测表明,构建的质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165具有转录及表达活性;绿色荧光显微镜下观察到EGFP表达,目的基因成功转入靶细胞,携带目的基因的HPMSCs仍保持多向分化潜能。结论:成功构建具有表达活性的hVEGF165真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165,hVEGF165在HPMSCs中具有转录及表达活性,且对HPMSCs的增殖具有促进作用;HPMSCs本身可能具有hVEGF165的内分泌功能。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2012年02期）
刘春丽,刘志辉[10]（2011）在《脂质体法介导pIRES2-EGFP-VEGF165转染人胎盘源间充质干细胞的实验研究》一文中研究指出目的:构建VEGF的真核表达质粒pIRES2-EGFP-VEGF165,通过脂质体法将其转入HPMSCS中,鉴定VEGF的表达活性及携带目的基因的HPMSCS的多向分化潜能。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从人白血病细胞HL-60中扩增出人血管内皮生长因子VEGF165的基因片段,构建pIRES2-EGFP-VEGF165重组质粒,经酶切检测其构建的正确性,通过脂质体法(本文来源于《第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议论文集》期刊2011-06-17）
脂质体法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的利用慢病毒载体及Lipofectamine 2000脂质体转染大鼠原代软骨细胞,探讨转染软骨细胞的理想条件。方法采用机械—酶消化法获取原代软骨细胞,经Ⅱ型胶原(ColⅡ)鉴定后,使用慢病毒载体介导GFP及利用Lipofectamine 2000介导的FAM-siRNA分别转染原代软骨细胞,倒置荧光显微镜检测转染效率,MTT法测定原代软骨的增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果采用脂质法转染软骨细胞不理想,转染率不到10%。运用慢病毒载体后转染率明显高于脂质体法,且随感染复数(病毒滴度×病毒液体积/细胞数,MOI)增加而增加,MOI为100时,转染率可达92.85%。MTT及流式结果显示,低MOI时,软骨细胞活力及凋亡率与对照组相比差异无统计学意义;当高MOI(200)时,细胞活力[(81.32±10.72)%]明显低于对照组,而细胞凋亡率[(21.37±2.80)%]明显高于对照组。结论当MOI为100时可作为转染软骨细胞安全有效的条件,这为细胞转染技术在软骨细胞的研究领域提供实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脂质体法论文参考文献
[1].邢书涵,李方舟,曹玉桃,顾美超,倪和民.利用脂质体法建立转Toll样受体4基因大尾寒羊胎儿成纤维细胞株的研究[J].中国畜牧兽医.2016
[2].朱志坚,于燕妮,陶欣.慢病毒及脂质体法转染原代软骨细胞的实验研究[J].贵州医药.2015
[3].张禾璇,单可人,何燕,张婷,王婵娟.脂质体法与电穿孔法转染两种细胞效率的比较[J].重庆医学.2014
[4].郝朝亮,朱向星,曾永联,全守能,卢晟盛.脂质体法构建广西巴马小型猪转基因体细胞及转基因克隆胚的生产[J].基因组学与应用生物学.2014
[5].苏蕊,杨钟,杨波,张燕军,赵艳红.脂质体法转染山羊骨骼肌特异细胞条件的优化[J].中国畜牧兽医.2013
[6].徐玉东,王宇,魏颖,尹磊淼,杨永清.叁种脂质体法转染试剂转染原代大鼠气道平滑肌细胞效果的比较[J].中国医药生物技术.2013
[7].邓廷贤,庞春英,张滢寅,杨炳壮,张秀芳.脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化[J].中国畜牧兽医.2013
[8].张旭,马红,孙亚蒙,汪亮,付博.脂质体法介导EGFP基因在细胞中的表达分析[J].黑龙江畜牧兽医.2013
[9].王博蔚,高尚,朱振威,刘春丽,朱镇.脂质体法介导pIRES2-EGFP-hVEGF165转染人胎盘源间充质干细胞[J].吉林大学学报(医学版).2012
[10].刘春丽,刘志辉.脂质体法介导pIRES2-EGFP-VEGF165转染人胎盘源间充质干细胞的实验研究[C].第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议论文集.2011
论文知识图
