蛋白磷酸酶基因论文-王天菊,王先宏,杨清辉

蛋白磷酸酶基因论文-王天菊,王先宏,杨清辉

导读:本文包含了蛋白磷酸酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:割手密,蛋白磷酸酶PP2C,基因克隆,表达特征

蛋白磷酸酶基因论文文献综述

王天菊,王先宏,杨清辉[1](2019)在《割手密蛋白磷酸酶基因SsPP2C1的克隆及表达分析》一文中研究指出2C型丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(PP2C)是植物体内脱落酸ABA信号传导关键负调控酶,在植物耐非生物胁迫中发挥着重要的作用。为探讨抗旱割手密材料中蛋白磷酸酶基因的序列及其表达特征,利用转录组测序数据,结合RT-PCR技术,克隆出编码割手密PP2C蛋白的基因,命名为SsPP2C1,其核苷酸序列编码区长855 bp,编码284个氨基酸残基,这些残基中包括了与二价金属离子结合的MED、DGH、DG和D结构域。系统发生分析结果表明,该氨基酸与谷子Sipp2c亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果表明在干旱协迫条件下,SsPP2C1基因主要在割手密的叶片中表达,在根和茎中的表达量相对较低;该基因在割手密伸长期表达量最高,成熟期次之,苗期最小;随着胁迫时间的延长,该基因的表达量显着升高,在胁迫6 d时达到最大值,为对照的4 940.27倍,随后显着下降,表明SsPP2c1基因与割手密抗旱性存在紧密关联。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年08期)

刘亮亮,张娜,黑小斌,李欢,李元敏[2](2018)在《铁皮石斛蛋白磷酸酶2A基因的分子克隆研究》一文中研究指出目的克隆铁皮石斛蛋白磷酸酶(protein phosphatase)2A基因,进行生物信息及表达特征分析。方法运用RACE克隆基因,生物信息学软件进行核酸及蛋白质理化性质、保守结构域、亚细胞定位等分析;用DNAStar 7.0、MEGA 6.0分别进行蛋白序列比对和进化分析。借助定量PCR检测基因表达模式。结果 Do PP2A(Gen Bank注册号KT957552)c DNA 1 410 bp,与其他植物PP2A同源性为89%~94%。ORF编码一条由306个氨基酸组成的肽链,分子量35.19 k D,等电点4.79。推导蛋白含有金属依赖性磷酸酶保守结构域,蛋白不含信号肽或跨膜残基,定位于细胞质。Do PP2A与其他植物的PP2A相比具有高度的保守性,聚在PP2A分子进化树的A组。基因转录本在石斛根和茎中分别为叶中的4.41倍和1.45倍。结论 Do PP2A分子克隆及特征为研究其在铁皮石斛生长发育中的分子功能提供基础。(本文来源于《上海中医药杂志》期刊2018年09期)

张春玲,周李杰,王桂栾,李媛媛,王小非[3](2018)在《苹果蛋白磷酸酶基因MdPP2C-Like的克隆及其对ABA的响应分析》一文中研究指出以‘嘎拉’苹果(Malus×domestica Borkh.)为试材,克隆了ABA信号转导过程中的响应基因蛋白磷酸酶基因MdPP2C-Like(基因序列号MDP0000126636)。基因结构分析显示,MdPP2C-Like定位于苹果8号染色体上,含有5个外显子与4个内含子;该基因全长1 035 bp,编码344个氨基酸,预测其蛋白质分子量为37.84 k D,等电点(p I)为5.72。蛋白质结构分析发现,其存在1个蛋白磷酸酶2C(PP2C)保守结构域,并与拟南芥中的A类PP2C保守结构域高度同源。构建的系统进化树表明MdPP2C-Like与At4G32950位于同一进化支,同源性较高。亚细胞定位结果表明,MdPP2C-Like主要定位于细胞核,少数分布在细胞质。定量分析显示,MdPP2C-Like在苹果不同组织中表达量不同,根中表达量较高。对获得的转基因拟南芥株系和苹果愈伤组织进行ABA响应分析,结果表明该基因的过量表达降低了植株和愈伤组织对ABA的敏感性。以上结果表明,克隆得到的MdPP2C-Like在响应ABA信号过程中起着重要作用。(本文来源于《园艺学报》期刊2018年07期)

陈冠旭,秦贵龙,李恩广,赵春梅,乔利仙[4](2018)在《花生蛋白磷酸酶2C家族基因的鉴定和盐胁迫响应分析》一文中研究指出为了分析花生中蛋白磷酸酶2C基因(PP2C)的情况,对耐盐花生突变体(S2)和对照(S4)在胁迫处理前后的叶片进行RNA-Seq分析。通过生物信息学分析筛选出了79个具有完整开放阅读框的PP2C基因,它们位于花生A组野生种的10条染色体上,不同染色体上的PP2C基因数目差异很大,分布为1~15个。根据拟南芥中的PP2C基因的聚类分析结果,79个花生PP2C基因能聚到已报道的12个亚族15个亚类。为了分析这些PP2C基因对盐胁迫响应情况,利用突变体S2和对照S4构建了盐胁迫处理前后的表达谱,筛选出35个受盐胁迫诱导表达的PP2 C基因,涉及12个亚族14个亚类,其中A亚族b亚类、G亚族b亚类、I亚族、L亚族所有成员均受盐胁迫诱导表达;而G亚族a亚类的所有成员均不受盐胁迫诱导表达。对这35个PP2C基因的启动子研究发现,绝大多数PP2C基因的启动子存在多种胁迫响应元件:如与高温胁迫相关的调控元件HSE、与干旱诱导相关的MYB转录因子结合位点MBS、逆境胁迫应答元件TC-rich repeats、与抗氧化反应相关的ARE元件等。为花生PP2C基因的功能研究和利用奠定了基础。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年03期)

徐荣,曹哲群,孟玉,申明明,程志远[5](2019)在《割手密2C型蛋白磷酸酶ScPP2C基因的克隆与表达分析》一文中研究指出割手密由于具有抗病、抗虫、抗逆等潜在的有利基因,历来被用于甘蔗的抗性遗传改良。在割手密中克隆编码2C型蛋白磷酸酶(protein phosphatase 2C, PP2C)的基因,并分析其在干旱胁迫下的差异表达。本研究利用RT-PCR方法从割手密叶片中克隆得到PP2C基因的CDS全长序列,利用生物信息学在线软件对PP2C蛋白的理化性质、蛋白结构进行预测分析,并采用实时荧光定量的方法分析该基因在不同干旱处理下的差异表达。结果显示从割手密中克隆到一个全长951 bp编码316个氨基酸的2C型蛋白磷酸酶基因,命名为ScPP2C,GenBank登录号为MG322120。荧光定量分析表明,随着干旱胁迫时间的延长,其表达量呈先上调后下调的表达模式,说明该基因是干旱胁迫诱导型基因。本研究通过挖掘甘蔗野生种割手密中的抗旱新基因ScPP2C,为甘蔗野生种质资源开发利用、转基因抗旱甘蔗新品种的选育提供了参考依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年05期)

崔胜男[6](2018)在《水稻叶片衰老相关蛋白磷酸酶编码基因OsSAPP3功能分析》一文中研究指出植株发育的最后一个阶段是叶片的衰老阶段,它将叶子中的资源降解并回收,用来维持新器官的生长。蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)在整个衰老过程中可以催化蛋白质发生可逆磷酸化反应,这一现象是叶片中衰老细胞转导的关键环节。在植物中PP2C型蛋白磷酸酶是分布较多的一大类蛋白磷酸酶。前期研究中已经筛选出一个水稻的PP2C型蛋白磷酸酶编码基因,命名为OsSAPP3(Oryza sativa Senescence-Associated Protein Phosphatase,OsSAPP3)。通过研究发现,CaMV 35S启动子驱动OsSAPP3异源过表达导致35S-OsSAPP3转基因拟南芥无法正常完成生育史,于是我们用可诱导型启动子GVG系统驱动OsSAPP3过表达,获得转基因水稻和拟南芥用于后续实验研究。1.OsSAPP3基因克隆与转基因材料的获得我们分别构建了GVG-OsSAPP3和Pro_(OsSAPP3)-GUS植物双源表达载体,利用农杆菌介导的遗传转化法获得了相应的转基因水稻和转基因拟南芥。用潮霉素抗性筛选、PCR检测、荧光定量RT-PCR检测、GUS组织化学染色等方法对转基因植物株系进行鉴定,获得相应的转基因株系。2.Pro_(OsSAPP3)-GUS转基因水稻的时空表达模式分析我们运用GUS组织化学染色法,对Pro_(OsSAPP3)-GUS转基因植物中OsSAPP3启动子活性进行时空表达模式分析。研究结果发现,在Pro_(OsSAPP3)-GUS转基因水稻的根、茎、叶、穗、颖壳颖花等各个植物组织中均能检测到启动子的表达活性;外源施加ABA和ACC可以显着促进Pro_(OsSAPP3)-GUS在转基因植物中的表达,而GA_3和6-BA则显着抑制。3.外源诱导OsSAPP3过表达促进GVG-OsSAPP3转基因植物叶片早衰GVG-OsSAPP3转基因水稻和转基因拟南芥都表现出叶片黄化严重,萎蔫衰老加快,叶绿素含量下降等早衰表型。此外,在黑暗和外源DEX同时诱导处理后,GVG-OsSAPP3转基因水稻叶片发生加速泛黄、叶绿素含量下降明显等衰老现象。4.GVG-OsSAPP3转基因植物的衰老相关标志基因表达变化结合前期在GVG-OsSAPP3转基因水稻和拟南芥实验过程中观察到的叶片表型变化,我们利用荧光定量RT-PCR检测转基因植物的分子机制变化。在GVG-OsSAPP3转基因水稻叶片中,外源诱导OsSAPP3基因过表达促进叶绿素降解途径相关基因NYC与PAO的表达,下调叶绿素合成途径相关基因CAO和光合作用相关基因PsbA的表达。在转基因水稻的黑暗诱导处理中,检测到了相同的衰老相关标志基因变化趋势。在GVG-OsSAPP3转基因拟南芥中,RT-PCR检测到SAG12等衰老标志基因和ACD1等叶绿素降解途径相关基因的表达水平显着上调,RbcL和RbcS光合作用相关基因表达显着下调。5.GVG-OsSAPP3转基因水稻响应黑暗诱导在外源DEX和黑暗同时处理条件下,OsSAPP3基因表达水平显着上调,GVG-OsSAPP3转基因水稻叶片表现出黄化严重,衰老萎蔫提前,叶绿素含量下降速度加快等现象。综上所有研究结果显示GVG-OsSAPP3转基因植物具有早衰表型,OsSAPP3参与植株叶片衰老调控过程,是叶片衰老的正向调控因子。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2018-06-01)

张娜,刘亮亮,李欢,黑小斌,白庆庆[7](2018)在《铁皮石斛蛋白磷酸酶DoPP2C1基因的克隆与表达分析》一文中研究指出目的克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)DoPP2C1基因,并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术获基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 7.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助qRT-PCR检测基因表达模式。结果分离到DoPP2C1基因(Gen Bank注册号KJ995533),cDNA全长1 221 bp,编码1条由285个氨基酸组成的多肽,相对分子质量31 080,等电点6.18;推定的DoPP2C1氨基酸序列具有植物PP2C蛋白家族保守的1个PP2C结构域(27-285);该蛋白预测无信号肽或跨膜域,定位在细胞质;DoPP2C1蛋白与多种植物PP2C蛋白一致性较高(56.3%~73.7%),与水稻OsPP2C62、高粱XP_002462907、大麦BAK00362和乌拉尔图小麦EMS47641蛋白等亲缘关系近,聚在PP2C分子进化树的F1分支;DoPP2C1基因具有组织表达特异性,其转录本在石斛根和茎中表达量较高,分别为叶中的7.57倍和1.79倍。结论获得DoPP2C1基因分子特征,为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育、逆境生理以及次级代谢调控中的生物学功能奠定基础。(本文来源于《中草药》期刊2018年07期)

张盼娃,张夏玮,于好强,盘林秀,付凤玲[8](2018)在《玉米蛋白磷酸酶2C基因ZmPP2C26两个可变剪接体的功能分析》一文中研究指出【目的】探讨蛋白磷酸酶2C在植物生长发育和逆境抗性中的作用。【方法】利用逆转录PCR扩增玉米蛋白磷酸酶2C基因ZmPP2C26的两个可变剪接体,用生物信息学工具预测其推导蛋白的特性后,转化野生型拟南芥,并进行功能验证和亚细胞定位。【结果】在较短剪接体中切除的213nt第一内含子,在较长剪接体中被保留。第一个内含子的剪接位点为5′-CC..CG-3′,与植物中通常的组成型剪接位点5′-GT..AG-3′不同。保留内含子及其侧翼序列的G/C含量较高,相当于其他内含子及其侧翼序列的2倍。两个剪接体在野生型拟南芥中的异源表达均可增加其对干旱胁迫的敏感性。两个剪接体推导蛋白的预测叁维结构均与PP2C相似,较长剪接体保留内含子编码的71个冗余氨基酸序列保持随机螺旋状态,预测为叶绿体定位信号肽。绿色荧光蛋白标记法定位表明,较长剪接体定位于细胞核、细胞膜和细胞器,而较短剪接体定位于细胞核和细胞膜。【结论】ZmPP2C26基因转录后加工过程中发生内含子保留型可变剪接。第一个内含子的保留没有改变其编码蛋白的PP2C功能,但有可能使其作用由细胞核和细胞膜延伸至叶绿体。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2018年07期)

程龙,詹婷婷,周鹏,黄燕,米荣升[9](2017)在《弓形虫Ⅰ型蛋白磷酸酶基因的原核表达及蛋白的定位研究》一文中研究指出为表达刚地弓形虫Ⅰ型蛋白磷酸酶(Toxoplasma gondii protein phosphatase 1,Tg PP1)基因、确定Tg PP1在弓形虫速殖子上的定位,将全基因合成的Tg PP1基因克隆到表达载体p ET-30a(+)中,构建重组载体p ET30a-Tg PP1,转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导,利用SDS-PAGE和Westernblot检测重组蛋白表达情况及其免疫学活性。通过亲和层析获得Tg PP1重组蛋白,制备抗血清,采用间接ELISA检测血清效价、免疫荧光法检测Tg PP1蛋白在弓形虫中的定位。结果显示,成功构建了重组表达载体p ET30a-Tg PP1并实现了在大肠杆菌中的表达,表达产物的分子质量约为36 ku。Western-blot检测结果显示,重组蛋白能与弓形虫感染小鼠阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。免疫荧光检测结果显示,Tg PP1主要定位于弓形虫速殖子顶端。上述结果为进一步研究Tg PP1在弓形虫入侵和繁殖过程中的作用及其机制打下了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2017年08期)

夏立群,童邦卓,徐亮,苏泽杰,陈锐敏[10](2017)在《一种鰑鱼诺卡氏菌酪氨酸蛋白磷酸酶基因的克隆及功能初步研究》一文中研究指出这鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原,可导致鱼类慢性系统性肉芽肿疾病。这鱼诺卡氏菌全基因组序列分析发现了一个酪氨酸蛋白磷酸酶(protein tyrosine phosphtase,PTP)基因,生物信息学分析显示该基因很可能编码一个靶向定位于宿主细胞线粒体的分泌蛋白。本实验对这鱼诺卡氏菌PTP进行了基因克隆、分泌蛋白鉴定、亚细胞定位、过表达和线粒体膜电位检测,结果显示,在这鱼诺卡氏菌胞外产物中质谱鉴定到了PTP肽段,证实其为分泌蛋白。亚细胞定位研究观察到PTP-GFP融合蛋白均匀地分布在FHM细胞中,与线粒体分布不重合,说明这鱼诺卡氏菌PTP蛋白并未靶向定位于线粒体。亚细胞定位和过表达研究都显示PTP蛋白在FHM细胞中表达后,细胞核出现固缩浓染、凋亡小体等明显的细胞凋亡特征。通过线粒体膜电位检测表明,在pcDNA-PTP转染后48 h,线粒体跨膜电位被明显破坏,说明这鱼诺卡氏菌PTP很可能是一种可诱导细胞凋亡的细菌蛋白。通过对这鱼诺卡氏菌PTP开展基因克隆和功能初步研究,为进一步揭示该基因的功能和深入了解这鱼诺卡氏菌的分子致病机理奠定了基础。(本文来源于《水产学报》期刊2017年07期)

蛋白磷酸酶基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的克隆铁皮石斛蛋白磷酸酶(protein phosphatase)2A基因,进行生物信息及表达特征分析。方法运用RACE克隆基因,生物信息学软件进行核酸及蛋白质理化性质、保守结构域、亚细胞定位等分析;用DNAStar 7.0、MEGA 6.0分别进行蛋白序列比对和进化分析。借助定量PCR检测基因表达模式。结果 Do PP2A(Gen Bank注册号KT957552)c DNA 1 410 bp,与其他植物PP2A同源性为89%~94%。ORF编码一条由306个氨基酸组成的肽链,分子量35.19 k D,等电点4.79。推导蛋白含有金属依赖性磷酸酶保守结构域,蛋白不含信号肽或跨膜残基,定位于细胞质。Do PP2A与其他植物的PP2A相比具有高度的保守性,聚在PP2A分子进化树的A组。基因转录本在石斛根和茎中分别为叶中的4.41倍和1.45倍。结论 Do PP2A分子克隆及特征为研究其在铁皮石斛生长发育中的分子功能提供基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

蛋白磷酸酶基因论文参考文献

[1].王天菊,王先宏,杨清辉.割手密蛋白磷酸酶基因SsPP2C1的克隆及表达分析[J].分子植物育种.2019

[2].刘亮亮,张娜,黑小斌,李欢,李元敏.铁皮石斛蛋白磷酸酶2A基因的分子克隆研究[J].上海中医药杂志.2018

[3].张春玲,周李杰,王桂栾,李媛媛,王小非.苹果蛋白磷酸酶基因MdPP2C-Like的克隆及其对ABA的响应分析[J].园艺学报.2018

[4].陈冠旭,秦贵龙,李恩广,赵春梅,乔利仙.花生蛋白磷酸酶2C家族基因的鉴定和盐胁迫响应分析[J].华北农学报.2018

[5].徐荣,曹哲群,孟玉,申明明,程志远.割手密2C型蛋白磷酸酶ScPP2C基因的克隆与表达分析[J].基因组学与应用生物学.2019

[6].崔胜男.水稻叶片衰老相关蛋白磷酸酶编码基因OsSAPP3功能分析[D].沈阳农业大学.2018

[7].张娜,刘亮亮,李欢,黑小斌,白庆庆.铁皮石斛蛋白磷酸酶DoPP2C1基因的克隆与表达分析[J].中草药.2018

[8].张盼娃,张夏玮,于好强,盘林秀,付凤玲.玉米蛋白磷酸酶2C基因ZmPP2C26两个可变剪接体的功能分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2018

[9].程龙,詹婷婷,周鹏,黄燕,米荣升.弓形虫Ⅰ型蛋白磷酸酶基因的原核表达及蛋白的定位研究[J].中国兽医科学.2017

[10].夏立群,童邦卓,徐亮,苏泽杰,陈锐敏.一种鰑鱼诺卡氏菌酪氨酸蛋白磷酸酶基因的克隆及功能初步研究[J].水产学报.2017

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