导读:本文包含了原位酶谱论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:原位,基质,蛋白酶,金属,免疫,化学,组织。
原位酶谱论文文献综述
刘玉槐,魏晓梦,祝贞科,葛体达,鲁顺保[1]（2017）在《土壤原位酶谱技术研究进展》一文中研究指出陆地生态系统中,土壤酶活性是衡量土壤肥力生物功能的重要指标。然而,当前通用的土壤酶学技术存在诸多缺陷,导致测定结果不能准确反映土壤酶活性与分布在环境中的真实情况,限制了土壤酶学的发展和土壤生物过程的研究。原位酶谱技术是以荧光底物为基础的新兴酶学技术,该技术不需破坏性取样,操作简单,准确度高,能在nm到μm的尺度上反应土壤酶活性的空间联系变化,很大程度上克服了传统土壤酶学技术的不足,近年来在土壤酶学研究中越来越受重视。本文概述了原位酶谱技术的发展过程及其原理与操作,首次综述了原位酶谱技术在土壤元素循环中的应用和成果,并展望了该技术的优化方向,以及与其他分析化学、酶学、分子生物学技术耦合应用在土壤生物过程研究中的价值,以期推动该技术的成熟与推广。(本文来源于《土壤通报》期刊2017年05期）
金曙光,Shin,JUNG,石清泉,沈浩员[2]（2012）在《原位明胶酶谱法检测胶质瘤18例基质金属蛋白酶活性》一文中研究指出胶质瘤是常见脑肿瘤之一,具有肿瘤早期就能侵袭周边正常脑组织的特性,尤其是胶质母细胞瘤,恶性度高。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖性内肽酶,与肿瘤细胞侵袭、转移相关的细胞外基质(ECM)降解过程密切相关[1],目前已知有26种,其中对MMP-2和MMP-9的(本文来源于《中国乡村医药》期刊2012年05期）
金曙光,石清泉,王良,洪雷[3]（2011）在《原位明胶酶谱法评估胶质瘤基质金属蛋白酶活性》一文中研究指出目的应用原位明胶酶谱法了解胶质母细胞瘤和少枝胶质细胞瘤有无表达基质金属蛋白酶的活性、具体表达部位以及与恶性度的关系方法术中获取胶质瘤组织,每块组织均含有肿瘤以及相延续的正常脑组织部分,根据术后病理分为胶质母细胞瘤组与少枝胶质细胞瘤组。原位明胶酶谱法判定组织有无基质金属蛋白酶活性,把MMPs活性部位分为:(1)肿瘤中心;(2)交界部;(3)阴性。结果胶质母细胞瘤组基质金属蛋白酶活性表达率为77%,少枝胶质细胞瘤组中只有一例由少枝胶质细胞瘤恶变为间变少枝胶质细胞瘤的样品表达交界部形式的基质金属蛋白酶活性。而正常脑组织未表达有基质金属蛋白酶活性。结论恶性度高的胶质母细胞瘤基质金属蛋白酶活性的表达率高,以交界部形式多见。初步判断基质金属蛋白酶由肿瘤细胞分泌,利用基质金属蛋白酶抑制剂来治疗胶质瘤或许也是可行的方法之一。(本文来源于《2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编》期刊2011-09-16）
李瓦里[4]（2009）在《明胶酶在大鼠坐骨神经挤压伤后的原位酶谱表达》一文中研究指出目的：临床中的周围神经损伤比较常见。一般分为神经传导障碍、轴索中断及神经中断。临床处理都需要后期的固定。那么为什么固定的时间为3-4周?在这固定期间神经的微观变化都有哪些?神经修复和时间的相关性如何?探讨周围神经挤压损伤后轴突对损伤后的潜在反应，对于帮助神经再生和修复的治疗非常关键。明胶酶参与了细胞外基质的降解、细胞的移行及增殖等有关的神经受损之后修复的所有病理及生理过程，在神经损伤修复后的过程中发挥了重要的作用。本实验以大鼠为研究对象，研究的目的是为了探讨坐骨神经损伤后，神经修复的时间过程中微观的病生理变化，探讨明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)是否有表达以及其可能发挥的作用。方法：我们用实验的方法将大鼠的双侧的坐骨神经进行暴露，一侧钳夹持续一分钟，另一侧作为正常对照组(暴露的时间与对侧相同)，从而建立了大鼠坐骨神经挤压损伤的动物模型。方法一、30只大鼠分为1天、3天、1周、2周和4周共五组。称重后盐酸氯胺酮注射液腹腔注射麻醉，150mg／kg。俯卧位固定四肢于手术台上。双侧腰、臀和股部剃毛，碘伏消毒，铺无菌纱布。两侧臀部各做一斜行切口，并向股后侧延伸。劈开臀肌，分离股二头肌和半膜半腱肌，暴露各组的双侧坐骨神经。在距离梨状肌下缘约8mm处，用反向血管钳钳夹一分钟(左侧为钳夹组，右侧为正常对照组，在手术区域和显露区域丝线标志准确位置)，所有组的正常对照组仅仅暴露，时间与钳夹组相同。0／1丝线缝合臀肌和皮肤。苏醒后送回饲养室给予动物普通饮食，同等条件下饲养。在大鼠坐骨神经挤压损伤后1天、3天、1周、2周和4周时随机取6只大鼠，进行深度麻醉下心脏灌注0．01M的PBS后取材，石蜡包埋切片，光镜下观察损伤后各个时间段内受损神经的病理变化；利用明胶酶谱的测定方法，测定损伤后大鼠坐骨神经组织内的明胶酶A(基质金属蛋白酶2，MMP-2)和明胶酶B(基质金属蛋白酶9，MMP-9)的活性变化；方法二、15只大鼠随机分为1天、7天和4周共叁组。手术方法同一。在大鼠坐骨神经挤压损伤后1天、7天和4周时，深度麻醉下心脏灌注0．01M的PBS后，分离大鼠双侧标志处的坐骨神经，切取神经长度约5-8mm，OCT包埋，立刻放入盛有4℃异戊烷的容器内，浸入液氮2分钟后，放入-25℃冰冻切片机内，切成10微米厚的纵行坐骨神经冰冻切片，粘贴于载玻片上，室温下风干，需做原位酶谱的直接在玻片上滴加反应缓冲液。免疫组织化学染色-20℃冰箱保存待用。用免疫组织化学和原位酶谱的方法观察MMPs在损伤神经轴突中的表达位置及其功能。用于神经胶质酸性蛋白(GFAP)和硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)免疫组织化学的大鼠，在损伤后1周，4周，经4％多聚甲醛心脏灌注后，取大鼠双侧标志处的坐骨神经长约各5-8mm，常规石蜡包埋，纵行切片，了解硫酸软骨素蛋白多糖与瘢痕组织及明胶酶之间可能存在的关系。结果：1．大鼠坐骨神经挤压伤之后有不同种类的明胶酶的表达，即明胶酶A和明胶酶B。在挤压伤后的各个阶段光镜下观察，有不同的细胞参与此过程，这与以往的报道一致。明胶酶谱检测的结果显示正常的大鼠坐骨神经组织内有明胶酶A的表达，没有发现明胶酶B的表达。在坐骨神经挤压伤之后的一天内有明胶酶B的迅速表达，而且表达较高。此时光镜下可见到受损区域内有很少的细胞核及血细胞，周围可看到局部中性粒细胞的出现。在伤后的叁天可看到起到吞噬作用的炎细胞，至一周时可见减少，与明胶酶B呈现正相关。明胶酶A在受损伤后的表达水平有轻微的增加，到一周时候表达的最高。此时光镜下见到炎细胞较前减少，两周时细胞恢复较多，四周时已经接近正常。Western blot分析进一步确认所消化的条带是明胶酶A和明胶酶B。2．原位酶谱和免疫组织化学的结果显示基质金属蛋白酶中的明胶酶在损伤区域的边缘有较高的表达，不仅仅如此而且和受损区域内的硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)呈现负相关的趋势。结论：1．大鼠坐骨神经损伤后的再生与修复不仅仅有巨噬细胞、雪旺氏细胞等细胞因子存在，同时还有基质金属蛋白酶类的明胶酶参与。在神经受损的第一天，神经周围本身的中性粒细胞有一定程度的反应，此时明胶酶B迅速的上调，保持高水平至叁天左右，而此时渗入性的炎细胞大量出现，一周后明胶酶B下降，而明胶酶A表达升高，至四周时明胶酶A、B表达接近正常。提示明胶酶B参与了神经受损后反应的前期阶段，即第一周；而明胶酶A参与了神经修复再生的后期阶段。2．神经的修复过程宏观上看是髓鞘的退变与再生过程，微观上是众多的细胞因子综合调控的结果。同时有大量降解细胞外基质成分的酶类参与。整个的神经修复过程是4周左右的时间，与临床神经处理术后固定时间吻合。3．损伤的坐骨神经中心部分有沉积的硫酸软骨素蛋白多糖的存在，明胶酶可能是降解了此成分，从而促进髓鞘的再生过程。(本文来源于《天津医科大学》期刊2009-05-01）
陈倩,沈丽,何琦麟,陶艳艳,刘成海[5]（2008）在《荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测》一文中研究指出目的:建立荧光原位明胶酶谱法,观察纤维化和急性损伤肝组织明胶酶活性表达特点.方法:复制二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型与N-乙酰半乳糖胺/脂多糖急性肝损伤模型,取其肝组织冰冻切片,将绿色荧光明胶底物附着于肝组织冰冻切片上,置于酶反应缓冲液中避光孵育8-24h;再以Hoechst液复染细胞核,在荧光显微镜下分别以蓝光激发拍摄明胶酶绿色荧光和紫光激发拍摄细胞核蓝色荧光,并将图像重迭.结果:成功建立荧光原位明胶酶谱法.正常大鼠肝组织仅在肝窦周围少量明胶酶表达,纤维化及急性肝损伤肝组织肝窦处明胶酶活性增强,纤维化肝组织纤维间隔处明胶酶活性也较强.结论:荧光原位明胶酶谱法具有灵敏,直观,简便的优点,可较好分析肝组织明胶酶活性水平与表达位置,对研究肝脏病理与药理具有重要意义.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2008年15期）
单丽,张水华,马志中[6]（2008）在《基质金属蛋白酶在大鼠视神经挤压伤后的原位酶谱表达》一文中研究指出目的观察大鼠视神经(optical nerves,ON)挤压伤后基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和-9在轴突损伤中的表达及与ON损伤处瘢痕成分的关系。方法建立大鼠ON挤压伤模型,利用原位酶谱和免疫组织化学的方法检测ON组织内MMP-2、MMP-9、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和硫酸软骨素蛋白聚糖(chondroitin sulphate peoteoglycan,CSPG)在损伤后时间和空间位置的表达。结果正常大鼠ON中有MMP-2的弱阳性表达,ON挤压伤后MMP-2和MMP-9均为强阳性表达,早期在损伤区边缘表达稍高,至损伤后28d时,在损伤区和周围的表达趋于一致。正常大鼠ON有GFAP和CSPG的弱阳性表达。ON挤压伤后CSPG在损伤区中心呈强阳性表达,GFAP在损伤区边缘表达较高,而在损伤区中心缺乏。结论ON挤压伤后胶质细胞增生瘢痕形成,GFAP、CSPG、MMP-2和MMP-9均参与ON的损伤修复过程。(本文来源于《眼科新进展》期刊2008年02期）
郭玉芳,梅红,李一雷[7]（2007）在《DQ明胶原位酶谱分析方法在检测乳腺癌组织中明胶酶活性的应用》一文中研究指出基质金属蛋白酶家族(MMPs)在肿瘤的侵袭和转移中具有重要的作用,其中最重要的是明胶酶类,包括 MMP-2和MMP-9。由于能特异性的降解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原而发挥作用,因此又称为Ⅳ型胶原酶。明胶酶以酶原形式分泌,在细胞外被活化后才能发挥作用,促进肿瘤细胞的(本文来源于《中华病理学杂志》期刊2007年04期）
原位酶谱论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
胶质瘤是常见脑肿瘤之一,具有肿瘤早期就能侵袭周边正常脑组织的特性,尤其是胶质母细胞瘤,恶性度高。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖性内肽酶,与肿瘤细胞侵袭、转移相关的细胞外基质(ECM)降解过程密切相关[1],目前已知有26种,其中对MMP-2和MMP-9的
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原位酶谱论文参考文献
[1].刘玉槐,魏晓梦,祝贞科,葛体达,鲁顺保.土壤原位酶谱技术研究进展[J].土壤通报.2017
[2].金曙光,Shin,JUNG,石清泉,沈浩员.原位明胶酶谱法检测胶质瘤18例基质金属蛋白酶活性[J].中国乡村医药.2012
[3].金曙光,石清泉,王良,洪雷.原位明胶酶谱法评估胶质瘤基质金属蛋白酶活性[C].2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编.2011
[4].李瓦里.明胶酶在大鼠坐骨神经挤压伤后的原位酶谱表达[D].天津医科大学.2009
[5].陈倩,沈丽,何琦麟,陶艳艳,刘成海.荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测[J].世界华人消化杂志.2008
[6].单丽,张水华,马志中.基质金属蛋白酶在大鼠视神经挤压伤后的原位酶谱表达[J].眼科新进展.2008
[7].郭玉芳,梅红,李一雷.DQ明胶原位酶谱分析方法在检测乳腺癌组织中明胶酶活性的应用[J].中华病理学杂志.2007
论文知识图
