导读:本文包含了小鼠肺泡巨噬细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:大鼠,肺泡巨噬细胞,COX2抑制剂,炎症反应
小鼠肺泡巨噬细胞论文文献综述
王莉,王小军,王青[1]（2019）在《COX2抑制剂对大鼠肺泡巨噬细胞生长及炎症反应的影响及机制研究》一文中研究指出目的探讨环氧合酶2(COX2)抑制剂塞来昔布对肺泡巨噬细胞凋亡、炎症反应及吞噬能力的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测0. 1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L塞来昔布对大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383的细胞毒性,选择合适的塞来昔布浓度。将NR8383细胞随机分为3组,即对照组、LPS组和LPS+塞来昔布组。对照组:细胞培养板加等体积磷酸盐缓冲液(PBS); LPS处理组:细胞用终浓度为1μg/ml的脂多糖(LPS)处理; LPS+塞来昔布组:10μmol/L的塞来昔布处理细胞1 h后,加1μg/ml的LPS处理细胞24 h。流式细胞术检测细胞凋亡率; Western blotting检测NF-κBp65、IκBα、Bax和Bcl-2蛋白表达; qRT-PCR检测炎症因子TNF-αmRNA表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力。结果 0. 1～10μmol/L塞来昔布处理对NR8383细胞无细胞毒性,20μmol/L塞来昔布处理可抑制NR8383细胞活力。LPS组与对照组比较,细胞凋亡率升高,NF-κBp65和Bax蛋白表达升高,IκBα和Bcl-2蛋白表达降低,TNF-αmRNA表达升高,细胞吞噬能力降低(P <0. 05),LPS+塞来昔布组与LPS组比较,细胞凋亡率降低,NF-κBp65和Bax蛋白表达降低,IκBα和Bcl-2蛋白表达升高,TNF-αmRNA表达降低,细胞吞噬能力升高(P <0. 05)。结论塞来昔布可通过下调NF-κB信号抑制LPS诱导的NR8383细胞凋亡及炎症反应,并维持吞噬功能,从而对肺损伤起保护作用。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2019年19期）
李乃健,潘天惠,何芳,冉丕鑫[2]（2019）在《流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞吞噬荧光标记细菌的方法学探讨》一文中研究指出目的建立流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬AlexaFluor 488(AF488)荧光染料标记细菌的方法。方法用不同浓度的AF488标记金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌,流式细胞术检测AF488对上述细菌的标记率和平均荧光强度;AM与不同浓度比例的AF488标记的细菌于37℃共孵育2、4、6和8 h,洗涤后加台盼蓝淬灭未被吞噬的细菌荧光,流式细胞术检测AM平均荧光强度、吞噬率和吞噬指数;激光共聚焦荧光显微镜下观察AM吞噬细菌的情况及分布。结果 AF488的浓度大于50μg/mL时,金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率均大于92%(P<0.05),金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率在荧光染料浓度大于50μg/mL便已迅速达到上限。随着孵育时间的延长,AM的吞噬率从孵育2 h的20.4%升高到8 h的76.5%。随着细菌比例的增加,AM的吞噬率从1∶10的7.7%升高到1∶300的85.1%。结论流式细胞术检测AM吞噬AF488荧光染料标记的细菌是测定AM吞噬活性的有效方法,但染料浓度、孵育时间和细菌比例均会对结果产生影响。(本文来源于《中国呼吸与危重监护杂志》期刊2019年05期）
程民,毛菊,杨雯雯,吴新春,陈稳[3]（2019）在《共生菌对荷瘤小鼠肺泡巨噬细胞基因表达的调控作用》一文中研究指出目的探讨共生菌群对荷瘤小鼠肺泡巨噬细胞(AM)基因表达的调控作用。方法分离纯化共生菌缺失的荷瘤小鼠及共生菌正常的荷瘤小鼠AM,利用基因芯片技术筛选差异表达的基因并进行生物信息学分析。结果分选后的AM细胞纯度可达98%,共生菌缺失荷瘤小鼠与正常荷瘤小鼠相比较,AM细胞中差异性表达基因共有353个(变化倍数≥2),上调基因171个,下调基因182个;差异表达基因的基因分类(GO)主要为细胞凋亡、细胞增殖、细胞分化、信号传导、血管生成等;KEGG通路主要为氮素代谢、趋化因子信号、TGF-β信号及肿瘤通路等;M2型巨噬细胞特异性基因CCL24、Arg1、Retnla及IL-13等在共生菌缺失荷瘤小鼠AM细胞中表达上调。结论共生菌可以调控荷瘤小鼠AM细胞的基因表达,包括CCL24、Arg1、Retnla及IL-13等基因,差异表达基因与多个GO分类和KEGG通路密切相关。(本文来源于《中国临床保健杂志》期刊2019年05期）
陈思[4]（2019）在《miR-101通过靶向Atg4D抑制矽肺大鼠肺泡巨噬细胞自噬的作用研究》一文中研究指出目的采用体外细胞培养的方法,建立SiO_2诱导的NR8383细胞染尘模型,探讨miRNA-101(miR-101)对SiO_2诱导NR8383自噬水平的影响。方法1模型制备及分组:(1)体内实验:雄性SD大鼠40只,适应性饲养一周后随机分为对照组和模型组,每组各20只。对照组:每只大鼠气管内灌注1.0ml灭菌NaCl溶液,左右气管各0.5ml;模型组:对每只大鼠气管内灌注1.0ml灭菌NaCl溶液与SiO_2粉尘混悬液(50mg/ml),左右支气管各0.5ml。两组分别于造模后3d、7d、14d、28d分批处死留取肺组织。(2)体外实验:生长状态良好的NR8383细胞消化后计数接种于96孔板,分为4组。对照组:NR8383完全培养;SiO_2刺激组:NR8383+SiO_2(0.05mg/ml);miR-101干预组:NR8383+LV-rno-mir-101α+SiO_2(0.05mg/ml),培养12h后更换常规培养基,72h观察感染效率。加入SiO_2混悬液,终浓度为50mg/l;阴性对照组:NR8383+CON137+SiO_2(0.05mg/ml),其他操作同miR-101干预组。于37℃、5%CO_2饱和湿度的孵箱中培养,分别于染尘成功后6h、12h、24h、48h留取细胞。2检测指标及方法:(1)HE染色观察NR8383细胞形态学改变;(2)Real time-PCR检测大鼠矽肺模型肺组织和体外染尘的NR8383细胞中miR-101的表达水平。Real time-PCR检测转染病毒后各组细胞中miR-101的表达水平;(3)CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;(4)免疫细胞化学染色法检测各组细胞中LC-3、Beclin-1及Atg4D的分布及表达;(5)Western-blot法检测各组细胞中LC-3、Beclin-1、Atg4D的表达。3统计学分析:应用Rotor-Gene 6.0.14软件,采用相对定量法Comparative Delta-delta Ct分析Real time-PCR结果;CCK-8法使用酶标仪测定各组OD值;使用image医学图像分析软件对免疫细胞化学结果进行半定量检测,用IOD值表示;应用image lab医学图像分析软件对蛋白印迹所表达的条带进行半定量检测,用平均光密度值表示。所得到的实验数据,建立EXCEL数据库,采用SPSS 22.0统计学软件进行分析,计量资料数据以均数±标准差(`x±s)表示,采用单因素方差分析检验,两组间对比用q检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果1 Real time-PCR结果:体内实验中,与对照组相比,大鼠肺组织中miR-101的表达在SiO_2刺激后3d、7d、14d、28d逐渐降低,于28d降到最低(P<0.05);体外染尘的NR8383细胞中miR-101的表达随着培养时间的延长逐渐降低,在48h下降到最低(P<0.05);体外实验中,转染病毒后SiO_2刺激组miR-101逐渐降低,miR-101干预组中miR-101的表达随着时间延长逐渐升高,对照组和阴性对照组各时间点无明显变化。2 HE染色结果:对照组NR8383细胞呈卵圆形或扁圆形,胞核居中或偏位,胞质颜色均匀,见不到SiO_2吞噬颗粒;SiO_2刺激组的细胞体积相对于对照组明显增大,形状为圆形或不规则形,胞核多位于一侧,能够见到点片状的细胞碎片。3 CCK-8细胞增殖检测结果:随着培养时间的增加,对照组NR8383细胞增殖明显增多,接种后第1~6h内细胞开始增殖,且增殖速度较快,第48h~72h增殖速度减缓,进入平台期;SiO_2刺激组、miR-101干预组和阴性对照组细胞也出现增殖,趋势与对照组相同,24h达到高峰,48h后增长减缓,但整体水平低于对照组(P<0.05);SiO_2刺激组、miR-101干预组和阴性对照组各时间点细胞增殖情况无明显差异(P>0.05)。4免疫细胞化学染色检测结果:LC-3、Beclin-1和Atg4D蛋白均为胞质表达,细胞胞质出现棕黄色颗粒为阳性表达。对照组仅有微弱表达;SiO_2刺激组胞浆呈棕红色或棕黄色,免疫反应较强,其表达在6h开始升高,于24h达到高峰48h后又出现回落,但仍比对照组基础水平高;miR-101干预组与SiO_2刺激组相比,各时间点叁个蛋白的表达有所降低(P<0.05),表达趋势没有变化;阴性对照组与SiO_2刺激组相比,各时间点叁个蛋白的表达并没有显着变化(P>0.05),高于对照组(P<0.05),低于miR-101刺激组(P<0.05)。5 Western blot检测结果:对照组LC-3、Beclin-1和Atg4D蛋白有少量的基础表达,各个时间点之间没有明显差异;相较于对照组,SiO_2刺激组四个时间点LC-3、Beclin-1和Atg4D的表达明显升高(P<0.05),6h开始升高,24h达到高峰,48h出现回落,但仍比对照组基础水平高;miR-101干预组与SiO_2刺激组相比,各个时间点LC-3的表达有所降低(P<0.05),表达趋势没有变化;阴性对照组与SiO_2刺激组相比,LC-3的表达并没有显着变化,高于对照组(P<0.05),低于miR-101刺激组(P<0.05)。结论miR-101参与了矽肺纤维化的发生发展,过表达miR-101后能够抑制SiO_2诱导的NR8383细胞自噬的发生,一定程度上延缓矽肺的发展,可能是通过负向调控Atg4D的表达来实现的。图22幅;表9个;参111篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-05-05）
禹茜[5]（2019）在《亚低温对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体4蛋白及下游促炎介质的影响》一文中研究指出目的:本研究旨在:1.分析比较脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(Acute Respiratory Distress Syndrome,ARDS)大鼠肺泡灌洗液(Broncho Alveolar Lavage Fluid,BALF)、脾脏及外周血3种不同来源的巨噬细胞原代提取及培养方法。2、探讨亚低温(Mild Hypothermia,MHT)处理对LPS诱导的ARDS大鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophage,AM)Toll样受体4蛋白及下游促炎介质的影响。研究方法:1、采用密度梯度离心法提取LPS诱导的ARDS SD(Sprang-Daley)大鼠BALF、脾脏及外周血中的原代巨噬细胞,通过免疫化学染色的方法对提取细胞进行鉴定、计数及纯度计算,并采用细胞增殖活性检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测叁种方法提取的原代巨噬细胞活性。2、分析亚低温处理对经LPS诱导的ARDS大鼠AM TLR4蛋白及下游促炎介质的影响。通过建立大鼠ARDS模型,分析相关TLR4、My D88、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factors-α,TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶(inducible Nitric Oxide Synthase,i NOS)的变化。分别在原代巨噬细胞中加入浓度为0ug/ml,1ug/ml,5ug/ml,8ug/ml,10ug/ml,15ug/ml的LPS,通过CCK-8试剂盒对LPS干预原代巨噬细胞进行最适浓度梯度测定后,使用完全培养基,在温度37℃,体积分数5%CO2、湿度95%的培养箱培养原代巨噬细胞24h后,随机将细胞分为亚低温组和常温(Normothermia,NT)组,分别置于32℃和37℃的CO2培养箱中培养,每组再随机分为LPS干预组和磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,PBS)对照组;LPS干预组加入5g/ml LPS进行干预,对照组加入等量PBS。分别在培养0h、1h、4h、8h、16h及24h提取巨噬细胞RNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测巨噬细胞TNF-α和i NOS m RNA表达变化;并提取巨噬细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,Elisa)检测巨噬细胞培养上清液中TNF-α和i NOS的表达变化;在培养1h、4h、8h、16h及24h提取巨噬细胞总蛋白,采用蛋白质免疫印迹法(Western Blotting,WB)检测巨噬细胞TLR4和My D88蛋白的表达变化。结果:1.肺泡灌洗液、脾脏及外周血叁种方法提取的原代巨噬细胞个数均值分别为(1.14±0.14)×106个、(9.29±0.19)×106个及(3.17±0.13)×106个,叁组间两两比较差异有显着性意义(P<0.05);叁种方法提取的原代巨噬细胞的活性比较,肺泡灌洗液提取出的巨噬细胞显着高于另2组(P<0.05),而脾脏与外周血提取的原代巨噬细胞差异无显着性意义(P>0.05);叁种方法提取的原代巨噬细胞通过免疫化学检测,得出细胞纯度分别为(95.779±1.170)%,(94.132±1.412)%,(94.012±0.954)%,差别无统计学意义(P>0.05)。2.通过CCK-8试剂盒对LPS干预原代巨噬细胞进行最适浓度梯度测定后,得出最适LPS浓度为5ug/ml。3.巨噬细胞TLR4及My D88蛋白的表达:与常温组比较,TLR4蛋白表达量于亚低温干预后4h、8h、16h、24h明显下降(4h:0.376±0.011比0.262±0.032,8h:0.588±0.040比0.390±0.029;16h:0.767±0.013比0.555±0.050,24h:0.493±0.026比0.317±0.031,均P<0.05);My D88蛋白于亚低温干预后1h、4h、8h、16h明显下降(1h:0.433±0.016比0.240±0.034,4h:0.524±0.026比0.351±0.020,8h:0.636±0.034比0.395±0.011;16h:0.726±0.008比0.568±0.023,均P<0.05)。4.巨噬细胞TNF-αm RNA、i NOS m RNA表达(2﹣△△Ct):与常温组比较,亚低温组TNF-αm RNA及i NOS m RNA表达于干预后1h、4 h、8 h、16 h和24 h明显下降(TNF-αm RNA:1h:0.802±0.244ng/L比0.366±0.074ng/L,4h:1.644±0.157ng/L比0.771±0.121ng/L,8 h:3.213±0.857ng/L比2.007±0.690ng/L,16 h:7.916±2.292ng/L比3.944±0.447ng/L,24 h:4.116±1.340ng/L比2.517±1.165ng/L;i NOSm RNA:1h:0.679±0.147ng/L比0.366±0.129ng/L,4h:1.170±0.148ng/L比0.797±0.101ng/L,8 h:2.403±0.307ng/L比1.193±0.097ng/L,16 h:4.986±1.131ng/L比3.252±0.768ng/L,24 h:8.867±1.395ng/L比4.529±1.395ng/L,均P<0.05)。5.巨噬细胞培养上清液TNF-α、i NOS炎症介质的表达:与常温组比较,亚低温组TNF-α表达于干预后4 h、8 h、16 h和24 h明显下降、i NOS表达于干预后1h、4 h、8 h、16 h和24 h明显下降(TNF-α:4h:128.859±23.667ng/L比48.784±7.627ng/L,8 h:214.136±14.460ng/L比110.594±5.957ng/L,16 h:390.949±5.789ng/L比216.305±11.229ng/L,24 h:600.659±9.415ng/L比348.981±15.844ng/L;i NOS m RNA:1h:84.297±0.582ng/L比64.798±5.479ng/L,4h:134.043±6.205ng/L比71.458±3.866ng/L,8 h:285.510±69.423ng/L比133.124±34.114ng/L,16 h:737.387±160.174ng/L比304.097±51.948ng/L,24 h:431.907±42.335ng/L比237.965±8.985ng/L,均P<0.05)。结论:1、叁种方法提取的原代巨噬细胞相较,巨噬细胞纯度差别无统计学意义,肺泡灌洗液提取的原代巨噬细胞活性最强,脾脏提取的原代巨噬细胞数量最多,外周血提取的原代巨噬细胞活性及数量介于两者之间。2、亚低温下调LPS诱导ARDS大鼠肺泡灌洗液巨噬细胞TLR4/My D88信号通路,从而抑制炎症介质的转录及表达。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
杨静亚[6]（2019）在《ATG4D对染尘后大鼠肺泡巨噬细胞自噬流的影响》一文中研究指出目的将二氧化硅混悬液灌注在大鼠肺内构建大鼠的矽肺模型,并以细胞染尘的方式建立细胞损伤模型,探讨:1 ATG4D在矽肺大鼠肺组织和染尘后肺泡巨噬细胞(NR8383)中的表达水平;2 RNA干扰ATG4D表达后,对染尘后肺泡巨噬细胞自噬流的影响。方法1模型制备及分组:(1)实验动物分组及建立矽肺大鼠模型:40只SPF级饲养SD雄性大鼠(7周,体质量190~220g)随机分为两组:对照组、矽肺模型组,每组20只。矽肺模型组采用一次性非暴露式气管插管,灌注1ml的灭菌NaCl溶液与SiO_2粉尘混悬液(50mg/ml);而对照组则只灌注1ml的灭菌NaCl溶液。分别于造模后3d、7d、14d、28d留取肺组织。(2)细胞实验分为4组:对照组:常规培养细胞;SiO_2组:培养基中加入SiO_2混悬液(50mg/L);siRNA ATG4D组:培养基中加入siRNA ATG4D,再加入SiO_2混悬液(50mg/L);阴性对照组:培养基中加入siRNA NC,再加入SiO_2混悬液(50mg/L)。各组细胞完成相应的操作之后分为6h、12h、24h、48h四个时间点获取细胞。2检测指标及方法:(1)HE染色观察肺组织和NR8383细胞的形态;(2)Real-time PCR和Western blot检测矽肺大鼠肺组织及染尘后NR8383细胞中ATG4D的表达;(3)Western blot筛选转染效率最高的siRNA,Real-time PCR和Western blot检测siRNA转染NR8383细胞后ATG4D的表达情况;(4)CCK-8试剂盒检测四组细胞在各个时间点的增殖情况;(5)酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TNF-α和IL-1β的表达水平;(6)采用免疫细胞化学法检测LC-3、Beclin-1与P62的表达与分布情况;(7)Western blot法检测LC-3、Beclin-1、P62的蛋白表达量。3定量测定及统计学分析:应用Rotor-Gene 6.0.14软件,采用相对定量法Comparative Delta-delta Ct分析Real-time PCR结果;使用Image J医学图像分析软件对蛋白特异性反应的条带进行半定量分析,测出光密度值(OD值),以目标蛋白比内参得到的OD值为蛋白表达量。所得数据用SPSS 23.0统计学软件采用完全随机设计的单因素方差分析,两组间比较选择q检验,如果P<0.05则表示具有显着差异。结果1肺组织形态学观察结果:对照组见肺泡结构清晰,肺泡壁薄,肺间质未见明显炎细胞浸润。矽肺模型组肺泡结构严重破坏,肺泡间隔增宽,肺间质炎症细胞浸润,充血、水肿,实变。2 NR8383细胞的形态学观察结果:对照组NR8383细胞呈圆形或椭圆形,胞核居中,胞质丰富,结构清楚;SiO_2组与对照组相比,NR8383细胞体积增大呈不规则形,细胞核出现偏位,胞质疏松丰富,部分细胞质内可见硅尘颗粒。3 Real-time PCR检测结果:与对照组相比,矽肺大鼠肺组织中ATG4D的表达随着时间的延长逐渐升高,14d达到最高,28d出现下降(P<0.05),染尘后大鼠肺泡巨噬细胞中ATG4D的表达趋势和肺组织一致。Western blot筛选出转染效率最高的为siRNA-2,用于后续实验。siRNA转染NR8383细胞后,ATG4D干预组中ATG4D的表达随着培养时间延长逐渐下降。蛋白表达结果和Real-time PCR结果一致。4 CCK-8细胞增殖检测结果:对照组随着培养时间的增加NR8383细胞增殖明显增多;SiO_2组和siRNA ATG4D组细胞的增殖水平低于对照组,但是两组之间细胞增殖情况无明显差异(P>0.05)。5 ELISA检测TNF-α、IL-1β的表达结果:随着时间的增加染尘细胞中TNF-α、IL-1β的表达含量逐渐升高,48h达到最高,但是24h和48h表达含量差异不显着,24h细胞状态比48h好,所以最佳染尘时间为24h。6免疫细胞化学的检测结果显示:LC-3、Beclin1蛋白的阳性表达位置均在细胞质,对照组表达情况十分微弱;与对照组相比,SiO_2组细胞体积增大,还有的出现毛刺样突起,阳性表达增强;与SiO_2组相比,siRNA ATG4D组结构及轮廓较清晰,阳性表达有所下降。P62蛋白的阳性表达同样位于细胞质,对照组阳性表达较强;SiO_2组与对照组相比,阳性表达降低,胞浆呈现淡棕黄色;siRNA ATG4D组与SiO_2组相比,阳性表达增强,胞浆出现淡棕褐色,但是仍低于对照组的阳性表达。7 Western blot检测结果:在对照组中LC-3、Beclin1蛋白表达微弱;与对照组相比SiO_2组LC-3、Beclin1蛋白表达量最高(P<0.05),6h开始升高,24h达到高峰,48h稍有回落;siRNA ATG4D组与SiO_2组相比,蛋白表达水平下降(P<0.05),但是基本趋势没变;对照组中P62蛋白的表达较强,与对照组相比SiO_2组蛋白表达量6h有所降低,24h降到最低,48h稍微回升(P<0.05);siRNA ATG4D组蛋白表达量比SiO_2组更强(P<0.05),但是低于对照组。结论ATG4D在矽肺大鼠肺组织和染尘后大鼠肺泡巨噬细胞中呈现显着的高表达,说明矽肺的发病过程中自噬被激活,沉默ATG4D可以抑制自噬流、抑制炎症反应,进而抑制矽肺纤维化的进程,提示ATG4D是治疗矽肺的靶标基因。图29幅;表16个;参93篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-03）
胡悦[7]（2019）在《肌动蛋白相关蛋白2/3复合体在慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能低下中的作用》一文中研究指出背景及目的慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能低下与AM细胞骨架的异常重排关系密切;肌动蛋白相关蛋白(Arp)2/3复合体可正性调节F-肌动蛋白导致细胞骨架重排,但慢阻肺AM吞噬功能低下与Arp2/3复合体调控F-肌动蛋白影响细胞骨架排列的研究较少,故本研究探讨在慢阻肺小鼠AM中,Arp2/3复合体在吞噬功能中的作用。方法采用单纯香烟烟雾暴露法建立慢阻肺模型,20只8周龄的SPF级BALB/c雄性小鼠进行模型建立,20只同样条件的小鼠为健康对照组,模型建成后采用EMMS动物肺功能仪测定其肺功能;处死小鼠,观察肺组织形态变化;分离AM,并将其分为健康对照组、慢阻肺组、健康CK666组、慢阻肺CK666组。噻唑兰比色法(MTT)测定CK666作用的最适浓度和时间,向健康CK666组和慢阻肺CK666组AM中加入10μmol/L CK666培养24 h;流式细胞术测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-E.coli)的能力;蛋白印迹法测定AM Arp2及F-肌动蛋白的表达;激光共聚焦显微镜测AM Arp2、F-肌动蛋白、吞噬的FITC-E.coli平均光密度及Arp2和F-肌动蛋白的共定位;扫描电镜观察AM吞噬时的超微形态。结果(1)慢阻肺小鼠肺功能测定:慢阻肺组小鼠的PIF、PEF和EF_(50)(6.56±0.25;4.26±0.23;3.20±0.15)均低于健康对照组(10.97±0.49;7.19±0.24;5.74±0.25)(均P<0.01)。(2)慢阻肺小鼠肺组织病理学改变:慢阻肺模型小鼠肺气肿改变明显,MLI和肺泡炎评分均显着增加(P<0.01);而健康对照组小鼠肺组织未见异常。(3)AM吞噬能力检测:慢阻肺组AM MFI和吞噬%[(4702±243)、(32.21±1.66)%]均低于健康对照组[(8684±234)、(65.88±1.77)%,均P<0.01];健康CK666组[(7446±236)、(50.09±1.64)%]均低于健康对照组(均P<0.01);慢阻肺CK666组[(3597±307)、(22.09±1.89)%]均低于慢阻肺组(均P<0.01)。(4)AM Arp2和F-肌动蛋白表达:慢阻肺组(0.51±0.03、0.46±0.03)均低于健康对照组(0.81±0.04、0.72±0.04,均P<0.01);健康CK666组(0.26±0.02)F-肌动蛋白低于健康对照组(P<0.01);慢阻肺CK666组(0.63±0.03)F-肌动蛋白低于慢阻肺组(P<0.01)。(5)AM Arp2、F-肌动蛋白和FITC-E.coli平均光密度值的测定:慢阻肺组(34±0.56、62±0.70、41±0.33)均低于健康对照组(143±1.90、146±3.05、189±2.60,均P<0.01);健康CK666组(137±1.35、157±1.00)F-肌动蛋白、FITC-E.coli均低于健康对照组(均P<0.01);慢阻肺CK666组(38±1.04、41±0.33)F-肌动蛋白、FITC-E.coli均低于慢阻肺组(均P<0.01)。Arp2和F-肌动蛋白MOC的测定:慢阻肺组孟德斯共定位系数(MOC)(0.395±0.014)低于健康对照组(0.880±0.002,P<0.01);健康CK666组(0.737±0.031)均低于健康对照组(P<0.01);慢阻肺CK666组(0.297±0.006)均低于慢阻肺组(P<0.01)。(6)AM形态:健康对照组AM伸出密集且长的丝状伪足,细胞表面突起皱褶多;健康CK666组AM丝状伪足伸出减少且较短,表面突起皱褶减少;慢阻肺组和慢阻CK666组AM丝状伪足伸出短小或缺失,表面突起皱褶明显减少。(7)相关性分析:基础状态和CK666干预后,AM Arp2与F-肌动蛋白表达呈正相关,AM Arp2、F-肌动蛋白表达与MFI呈正相关。结论香烟烟雾暴露可以成功建立慢阻肺小鼠模型;慢阻肺小鼠AM吞噬功能低下;Arp2/3复合体正性调控F-肌动蛋白,相互作用参与细胞骨架重排,影响AM吞噬功能;Arp2/3复合体活性降低导致其与F-肌动蛋白相互作用减少,细胞骨架重排异常,慢阻肺小鼠AM的吞噬功能显着降低,且慢阻肺小鼠AM对Arp2/3复合体活性下降更敏感。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-04-01）
蔡艳春,黄倩,危晓莉,梅汝焕,撒丽娜[8]（2019）在《红景天苷对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞共培养炎性介质分泌的影响》一文中研究指出本研究旨在探讨红景天苷(salidroside, Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR 8383和II型肺泡上皮细胞RLE-6TN共培养炎性活化的影响。CCK-8比色法检测细胞增殖百分率,Western blot检测磷酸化AKT (p-AKT)和总AKT蛋白表达,酶联免疫吸附法测定细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα, TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2, MIP-2)和白介素10 (interleukin-10, IL-10)的含量。结果显示:与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞或共培养RLE-6TN和NR 8383细胞1 h后继续培养24 h,细胞增殖百分率显着增加(P <0.05);与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞,p-AKT/AKT蛋白比值显着增加(P <0.05)。32μg/mL Sal预处理不仅抑制LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2 (P <0.05),而且加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2的抑制作用(P <0.05)。此外,32μg/mL Sal预处理能促进LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10 (P <0.05),并能加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10的促进作用(P <0.05)。以上结果提示,Sal不仅能直接抑制LPS诱导的NR 8383炎性活化,还可能通过PI3K/AKT信号通路促进RLE-6TN增殖,参与II型肺泡上皮细胞对LPS诱导肺泡巨噬细胞炎性活化的调节作用。(本文来源于《生理学报》期刊2019年04期）
王家伟,王雪凯,侯炜[9]（2019）在《不同剂量射线对大鼠肺泡巨噬细胞增殖能力的影响》一文中研究指出目的:观察不同剂量射线对大鼠肺泡巨噬细胞增殖能力的影响,为放射性肺损伤细胞模型建立奠定前期基础。方法:使用高能直线加速器X射线以不同剂量射线(0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy)照射大鼠肺泡巨噬细胞,分别于照射后24 h、48 h、72 h后观察细胞镜下形态,并用MTT法检测细胞增殖能力。结果:在不同时间节点,一个视野内,照射组细胞数量均少于正常组(0 Gy组),从细胞形态来看,0 Gy组细胞表现为大鼠肺泡巨噬细胞呈串样生长的特点,而照射组细胞则呈单个分散样生长;经MTT法检测,照射后各时间节点测定OD值分别为:0 Gy组,0.139、0.165、0.205; 2 Gy组,0.112、0.127、0.151; 4 Gy组,0.109、0.121、0.138; 6 Gy组,0.088、0.094、0.099。其中不同剂量射线照射组与正常组相比,吸光度值均有差异,P=0.000 <0.05;不同时间点,24 h,48 h,72 h,各组吸光度之间均有差异,P=0.000 <0.05;不同剂量照射组之间两两相比,2 Gy组与4 Gy组差异不明显,P=0.052> 0.05,6 Gy组与其他两组之间差异显着。结论:射线会对大鼠肺泡巨噬细胞的生长特性和增殖能力产生影响,使其串样生长特性消失,其中6 Gy剂量射线对细胞所产生的影响最大。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2019年06期）
张舒宁,乔燕,胡志乔,杨慧强,王永恒[10]（2018）在《熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞数量和波形蛋白表达的影响》一文中研究指出目的研究熊果酸对矽肺大鼠肺泡巨噬细胞(AM)数量和波形蛋白表达的影响。方法将无特定病原体级Wistar大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、矽肺组和熊果酸组,每组20只。空白对照组大鼠不予任何处理,其余3组大鼠均通过非暴露式气管滴注法一次性予剂量为250 mg/kg体质量的游离二氧化硅混悬液。其后,空白对照组和矽肺组大鼠灌胃剂量为10 m L/kg体质量的0. 9%氯化钠溶液,溶剂对照组大鼠灌胃10 m L/kg体质量为0. 6%的羧甲基纤维素钠溶液,熊果酸组大鼠灌胃剂量为40 mg/kg体质量的熊果酸,1次/d,连续56 d。在灌胃第7、14、28、56天时各组分别处死5只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测AM数量,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测肺组织中波形蛋白的表达。结果溶剂对照组和矽肺组大鼠4个时间点BALF中AM数量和肺组织中波形蛋白相对表达水平均高于同时间点空白对照组(P <0. 05)。熊果酸组大鼠BALF中AM数量在4个时间点分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P <0. 05),在第7和14天均高于同时间点空白对照组(P <0. 05),但在第28和56天分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05)。熊果酸组大鼠4个时间点肺组织中波形蛋白相对表达水平分别低于同时间点溶剂对照组和矽肺组(P <0. 05),高于同时间点空白对照组(P <0. 05)。免疫组织化学法结果显示:建立矽肺模型后,溶剂对照组和矽肺组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重,波形蛋白阳性表达在各时点有不同程度增加;熊果酸组大鼠肺组织中波形蛋白表达趋势与上述2组相似,但肺组织纤维化程度和肺泡结构破坏程度均相对较轻,波形蛋白阳性表达相对减弱。结论熊果酸可减少矽肺大鼠肺泡巨噬细胞的数量,下调波形蛋白的表达。(本文来源于《中国职业医学》期刊2018年05期）
小鼠肺泡巨噬细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬AlexaFluor 488(AF488)荧光染料标记细菌的方法。方法用不同浓度的AF488标记金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌,流式细胞术检测AF488对上述细菌的标记率和平均荧光强度;AM与不同浓度比例的AF488标记的细菌于37℃共孵育2、4、6和8 h,洗涤后加台盼蓝淬灭未被吞噬的细菌荧光,流式细胞术检测AM平均荧光强度、吞噬率和吞噬指数;激光共聚焦荧光显微镜下观察AM吞噬细菌的情况及分布。结果 AF488的浓度大于50μg/mL时,金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率均大于92%(P<0.05),金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的标记率在荧光染料浓度大于50μg/mL便已迅速达到上限。随着孵育时间的延长,AM的吞噬率从孵育2 h的20.4%升高到8 h的76.5%。随着细菌比例的增加,AM的吞噬率从1∶10的7.7%升高到1∶300的85.1%。结论流式细胞术检测AM吞噬AF488荧光染料标记的细菌是测定AM吞噬活性的有效方法,但染料浓度、孵育时间和细菌比例均会对结果产生影响。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠肺泡巨噬细胞论文参考文献
[1].王莉,王小军,王青.COX2抑制剂对大鼠肺泡巨噬细胞生长及炎症反应的影响及机制研究[J].临床和实验医学杂志.2019
[2].李乃健,潘天惠,何芳,冉丕鑫.流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞吞噬荧光标记细菌的方法学探讨[J].中国呼吸与危重监护杂志.2019
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