PLG-g-TA/RGD酶催化交联水凝胶用于透明软骨细胞黏附和三维细胞培养

论文摘要

制备了一种基于聚谷氨酸-g-酪胺/cRGDfk（PLG-g-TA/RGD）的新型酶催化交联水凝胶,用于兔透明软骨细胞黏附和三维细胞的培养. PLG-g-TA/RGD聚合物材料在辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢（H2O2）存在下,能够通过酪氨基团的自交联快速形成水凝胶.环状多肽（cRGDfk）的引入能够显著提高材料的溶液-凝胶转变速率和凝胶强度.透明软骨细胞在水凝胶表面黏附3 d后,在PLG-g-TA/RGD水凝胶表面有更多的细胞黏附;将透明软骨细胞包裹在水凝胶内培养1, 4, 7 d后,细胞在PLG-g-TA/RGD水凝胶内增殖效率明显高于对照组PLG-g-TA水凝胶.细胞实验结果表明,该水凝胶材料具有良好的生物相容性. cRGDfk的引入,促进了透明软骨细胞的黏附和增殖,显示了PLG-g-TA/RGD水凝胶材料在三维细胞培养方面的应用潜力.

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 试剂与仪器
•   1.2 聚合物材料的合成
•     1.2.1 L-谷氨酸酯-N-羧基内酸酐 （BLG-NCA） 的合成
•     1.2.2 聚谷氨酸苄酯 （PBLG） 的合成
•     1.2.3 聚L-谷氨酸 （PLG） 的合成
•     1.2.4 PLG-g-TA共聚物的合成
•     1.2.5 PLG-g-TA/RGD的合成
•   1.3 水凝胶的制备与性能表征
•     1.3.1 磷酸盐缓冲溶液 （PBS） 的配制
•     1.3.2 水凝胶的制备和成胶时间的测定
•     1.3.3 动态流变学分析
•   1.4 细胞提取与培养
•   1.5 水凝胶生物相容性评价
•   1.6 水凝胶表面的透明软骨细胞黏附行为
•   1.7 水凝胶内部的细胞增殖行为表征
•   1.8 水凝胶内部软骨细胞的存活率测试
•   1.9 统计学分析
• 2 结果与讨论
•   2.1 材料的合成与结构表征
•   2.2 水凝胶的制备及性能
•   2.3 兔软骨细胞的提取与培养
•   2.4 水凝胶的体外生物相容性和透明软骨细胞黏附评价
•   2.5 细胞在水凝胶内的增殖及水凝胶内细胞的存活率

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 文静,徐志民,齐德胜,王佳玉,于双江,贺超良,韩冰

关键词: 环状多肽,酶催化交联,细胞黏附,三维细胞培养,聚谷氨酸酪胺

来源: 高等学校化学学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,有机化工

单位: 吉林大学口腔医院,中国科学院长春应用化学研究所生态环境高分子材料重点实验室,长春理工大学化学与环境工程学院

基金: 国家自然科学基金(批准号:81771041),吉林省发展和改革委员会项目(批准号:2018C052-12),吉林省科技发展计划项目(批准号:20180201053YY)资助~~

分类号: Q813.11;TQ427.26

页码: 2020-2027

总页数: 8

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