导读:本文包含了噬菌体呈现论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:噬菌体,抗体,抗原,多肽,关节炎,疫苗,蛋白。
噬菌体呈现论文文献综述
白红妹,黄惟巍,刘存宝,孙文佳,杨旭[1]（2018）在《共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒》一文中研究指出目的:构建呈现人白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗。方法:将人IL-13抗原肽经基因重组插入Qβ噬菌体衣壳蛋白(CP)的C端。在BL21细菌中,经IPTG诱导CP及C端接有IL-13抗原肽的CP(CP/IL-13)同时表达。以硫酸铵沉淀及蔗糖密度梯度离心进行VLPs纯化及分析嵌合VLPs的存在,以HPLC分析VLPs纯度,以电镜观察颗粒形态。小鼠经皮下免疫VLPs后采集血清,以ELISA检测人IL-13特异性Ig G抗体水平。结果:重组蛋白CP与CP/IL-13获得成功表达,两者在密度梯度离心中有一致的、与QβVLPs相同的沉降行为,而CP/IL-13单独无Qβ颗粒行为。经纯化获得了高纯度颗粒,嵌合颗粒与Qβ颗粒形态相似。此外,该VLPs疫苗诱导小鼠产生了IL-13特异的抗体应答。结论:利用共表达策略可成功构建呈现人IL-13抗原表位的嵌合VLPs,为以主动免疫方式调控IL-13在疾病中的病理作用,提供了具有临床应用潜能的疫苗形式。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年05期）
于清宏,吴齐燕,林翊萍,曹景全,久荣[2]（2010）在《应用噬菌体呈现技术筛选反应性关节炎相关抗原多肽》一文中研究指出目的寻找反应性关节炎滑液中与ReA发病相关抗原多肽。方法采用随机多肽噬菌体呈现技术。关节炎滑液分析采用SDS-PAGE和ELISA法,结合和竞争抑制实验采用ELISA法。结果不同关节炎滑液中IgG水平均比非关节炎高,而以ReA升高最为明显;进而采用葡萄球菌A蛋白层析柱分离纯化了混合的ReA、AS、ReA及OA等不同关节炎滑液中IgG。以纯化的ReA滑液IgG为固相配基,选取NNK方式编码的15肽噬菌体随机文库,经3轮筛选得到18个与ReA滑液和血清特异性结合克隆,并对阳性克隆进行核心序列和同源性分析。结果表明,APR、RVS及RYXC为与ReA滑液抗体特异性结合多肽的核心序列,而且这些核心序列内均含有精氨酸(R)。其中,pReA33(EAGLTLPDRYSCBPT)与前胶原(procollagen)有66.667%的同源性,与Ⅰ型疱疹病毒蛋白(herpes virus typeⅠ)有66.667%的同源性。pReA39(ERRVSMSIVSRMWRG)与糖肽(peptidyloglycan)有57.143%的同源性。pReA 18(ESETAPRYRCENQPS)与酪蛋白激酶Ⅱβ链(casein kinaseⅡbeta chain)有77.778%的同源性。采用ELISA法,对其中4株具有核心序列及高亲和性的克隆进行结合和竞争抑制实验,高亲和性克隆pReA33、pReA39、pReA16及pReA18可明显抑制ReA滑液中抗原与滑液抗体的结合反应。对ReA滑液库中的ReA滑液(n=31)反应阳性率分别为92.0%、96.0%、88.0%和96%。对ReA滑液库以外的ReA滑液(n=29)反应阳性率分别为85.7%、71.4%、76.2%和88.5%。对ReA血清(n=)结合反应阳性率分别为56.3%、50.0%、37.5%和75.0%。结论噬菌体多肽呈现技术为寻找分析未知结构抗原多肽开辟了新的途径。所获得的与ReA特异性反应多肽,为探索ReA病因及发病机制提供了线索,并为进一步发展ReA早期诊断方法及针对性治疗奠定了基础。(本文来源于《全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编》期刊2010-11-04）
赵泽文,梁志清,史常旭,常青,李军[3]（2008）在《抗人Endoglin胞外段单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建/筛选及鉴定》一文中研究指出目的构建抗人Endoglin胞外段的特异性单链抗体(single chain variable fragment,scFv)噬菌体表面呈现文库。方法用重组人Endoglin(recombinant human Endoglin,rhEndoglin)胞外段蛋白免疫Balb/c小鼠,提取脾脏组织mRNA,经RT-PCR分别扩增出VH(heavy chain variable region)、VL(light chain variable region)基因,经Linker连接成scFv基因,再把scFv基因重组到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化到大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7拯救后建成噬菌体呈现文库。用rhEndoglin对文库进行5轮吸附-洗脱-富集panning淘筛,选择ELISA结果最强的克隆提取质粒并测序。结果经过筛选,随机挑取94个克隆进行ELISA检测,37个克隆呈阳性。序列分析表明,该scFv DNA全长738bp。其中VH基因366bp,编码122个氨基酸残基,VL基因327bp,编码109个氨基酸残基,它们之间通过(Gly4Ser)3组成的15肽连接。结论成功构建了抗人Endoglin胞外段scFv噬菌体表面呈现文库,并筛选获得一个能与Endoglin特异结合的重组噬菌体克隆。(本文来源于《华南国防医学杂志》期刊2008年04期）
杨明,金立杰[4]（2007）在《噬菌体呈现肽库技术的应用》一文中研究指出噬菌体呈现肽库是噬菌体显示技术的一个非常重要的分支。自问世以来,随着分子生物学技术的飞速发展,它已被广泛应用于免疫学、分子生物学、药理学、疫苗学等生命科学领域。简要概述了这一技术的应用。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2007年04期）
管海宏,付萌,李巍,夏汝山,王刚[5]（2005）在《天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的噬菌体呈现的scFv的构建及表达》一文中研究指出目的:构建并表达噬菌体呈现的天然抗角蛋白单克隆抗体(mAb)3B4的单链抗体(scFv),并测定其活性。方法:分别以pMD18TmAb3B4VH和pMD18TmAb3B4VL为模板进行PCR,扩增mAb3B4的VH和VL基因,然后将其依次插入噬菌体表达载体pscMH中。经DNA序列测定正确后,转化大肠杆菌,用辅助噬菌体VCSM13超感染诱导表达scFv;用ELISA检测其与亲本mAb3B4的抗原结合活性的改变。结果:对扩增的mAb3B4的VH和VL基因进行测序,结果表明VH基因与原序列完全一致,VL基因在骨架区FR1有1个碱基发生突变。用VCSM13超感染后能检测到scFv的表达,其与亲本一样具有多反应性,但抗原结合模式不完全相同。结论:成功地构建并表达了天然抗角蛋白mAb3B4噬菌体呈现的单链抗体,表达的scFv与mAb3B4的抗原结合活性有一定的差异,为探讨天然自身抗体的抗原结合模式奠定了基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2005年04期）
于清宏,吴齐雁,林翊萍,曹景全,宋久荣[6]（2005）在《应用噬菌体呈现技术筛选反应性关节炎相关抗原多肽》一文中研究指出寻找反应性关节炎(ReA)滑液中与ReA发病相关抗原多肽。采用随机多肽噬菌体呈现技术。关节炎滑液分析采用SDS-PAGE和酶联免疫吸附试验(ELISA)法,结合和竞争抑制实验采用ELISA法。结果:不同关节炎滑液中IgG水(本文来源于《第十届全国风湿病学学术会议论文集》期刊2005-06-30）
祝怀平,王迎春,季顺东,江淼,白霞[7]（2005）在《抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究》一文中研究指出目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF- A1区有高亲合力单链抗体(ScFv) ;基因重组的方法构建高效表达载体pET 2 0b(+) ScFv ,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用。结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的4 1% ,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF- A1、rvWF- A1 A3结合,但不与rvWF A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73. 7%。结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF A1区ScFv可特异性与vWF- A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2005年04期）
李华,郑萍,郭波,吴玉章,邹强[8]（2005）在《噬菌体呈现的多聚多肽3A8诱导Jurkat细胞的凋亡效应》一文中研究指出目的 检测噬菌体呈现的多肽 3A8诱导Fas+ Jurkat细胞的凋亡效应。方法 噬菌体表面呈现的多肽 3A8与Fas+ Jurkat细胞共孵育 ,通过Annexin V检测细胞膜磷脂磷脂酰丝氨酸的翻转 ;流式细胞仪检测经处理的Jurkat细胞DNA含量 ;透射电镜观察细胞形态是否出现典型的凋亡特征。结果 Annexin V检测到经 3A8处理的Jurkat细胞有 32 .6 4 %的细胞膜磷脂磷脂酰丝氨酸发生了翻转。处理细胞经PI染色流式细胞仪分析 ,发现 2 5 .4 1%的Jurkat细胞发生凋亡 ,明显高于未经处理的对照组。透射电镜镜下观察到凋亡细胞不同时期的形态。结论 噬菌体呈现的多肽 3A8与Jurkat细胞结合 ,可诱导细胞凋亡(本文来源于《免疫学杂志》期刊2005年01期）
夏永娟,黄宝成,温伟红,黄威权[9]（2004）在《抗鳗弧菌独特型单克隆抗体dsFv的构建及其噬菌体表面呈现》一文中研究指出抗鳗弧菌独特型单克隆抗体 1E10是能够模拟鳗弧菌的保护性表位 ,可以作为疫苗使用的一种单克隆抗体 .利用基因工程抗体技术从抗鳗弧菌独特型单克隆抗体杂交瘤细胞株 1E10中克隆出抗体的重链及轻链可变区基因 (VH 和VL) .通过定点突变技术将VH4 4和VL10 5突变为半胱氨酸并且连接到噬菌体表达载体pCANTAB5E中 ,突变后的VH 和VL 基因位于cpⅢ先导序列和cpⅢ基因之间 ,在LacZ启动子调控之下 ,以融合蛋白的形式被导入细胞间隙 ,依靠链间二硫键组装成二硫键稳定型Fv抗体 (dsFv) .加入辅助噬菌体M13K0 7后 ,dsFv以融合蛋白的形式表达在噬菌体表面 .ELISA测定显示 :dsFv噬菌体能够与抗原结合并且这种结合呈噬菌体浓度依赖 .结果表明 :成功构建出了抗鳗弧菌独特型单克隆抗体dsFv基因并使其在噬菌体表面获得了正确呈现 .该dsFv噬菌体有望成为新一代基因工程疫苗用于预防鱼类鳗弧菌感染(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2004年06期）
万一,石继红,韩苇,赵宁,颜真[10]（2004）在《肿瘤坏死因子-α在噬菌体表面的呈现及鉴定》一文中研究指出目的 :将人肿瘤坏死因子 α(TNF α)呈现于噬菌体表面 ,为研制TNF α疫苗奠定基础 .方法 :利用噬菌体表面呈现技术 ,在噬菌体表面表达人TNF α .结果 :重组噬菌体颗粒具有TNF α的免疫反应性 ,且不具有人TNF α的细胞杀伤活性 .结论 :人TNF α在噬菌体表面得以呈现 ,呈现TNF α的噬菌体颗粒作为TNF α疫苗的成分不会引起TNF α的毒副作用(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2004年06期）
噬菌体呈现论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的寻找反应性关节炎滑液中与ReA发病相关抗原多肽。方法采用随机多肽噬菌体呈现技术。关节炎滑液分析采用SDS-PAGE和ELISA法,结合和竞争抑制实验采用ELISA法。结果不同关节炎滑液中IgG水平均比非关节炎高,而以ReA升高最为明显;进而采用葡萄球菌A蛋白层析柱分离纯化了混合的ReA、AS、ReA及OA等不同关节炎滑液中IgG。以纯化的ReA滑液IgG为固相配基,选取NNK方式编码的15肽噬菌体随机文库,经3轮筛选得到18个与ReA滑液和血清特异性结合克隆,并对阳性克隆进行核心序列和同源性分析。结果表明,APR、RVS及RYXC为与ReA滑液抗体特异性结合多肽的核心序列,而且这些核心序列内均含有精氨酸(R)。其中,pReA33(EAGLTLPDRYSCBPT)与前胶原(procollagen)有66.667%的同源性,与Ⅰ型疱疹病毒蛋白(herpes virus typeⅠ)有66.667%的同源性。pReA39(ERRVSMSIVSRMWRG)与糖肽(peptidyloglycan)有57.143%的同源性。pReA 18(ESETAPRYRCENQPS)与酪蛋白激酶Ⅱβ链(casein kinaseⅡbeta chain)有77.778%的同源性。采用ELISA法,对其中4株具有核心序列及高亲和性的克隆进行结合和竞争抑制实验,高亲和性克隆pReA33、pReA39、pReA16及pReA18可明显抑制ReA滑液中抗原与滑液抗体的结合反应。对ReA滑液库中的ReA滑液(n=31)反应阳性率分别为92.0%、96.0%、88.0%和96%。对ReA滑液库以外的ReA滑液(n=29)反应阳性率分别为85.7%、71.4%、76.2%和88.5%。对ReA血清(n=)结合反应阳性率分别为56.3%、50.0%、37.5%和75.0%。结论噬菌体多肽呈现技术为寻找分析未知结构抗原多肽开辟了新的途径。所获得的与ReA特异性反应多肽,为探索ReA病因及发病机制提供了线索,并为进一步发展ReA早期诊断方法及针对性治疗奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体呈现论文参考文献
[1].白红妹,黄惟巍,刘存宝,孙文佳,杨旭.共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒[J].中国生物工程杂志.2018
[2].于清宏,吴齐燕,林翊萍,曹景全,久荣.应用噬菌体呈现技术筛选反应性关节炎相关抗原多肽[C].全国第八届中西医结合风湿病学术会议论文汇编.2010
[3].赵泽文,梁志清,史常旭,常青,李军.抗人Endoglin胞外段单链抗体噬菌体表面呈现文库的构建/筛选及鉴定[J].华南国防医学杂志.2008
[4].杨明,金立杰.噬菌体呈现肽库技术的应用[J].生物技术通讯.2007
[5].管海宏,付萌,李巍,夏汝山,王刚.天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的噬菌体呈现的scFv的构建及表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2005
[6].于清宏,吴齐雁,林翊萍,曹景全,宋久荣.应用噬菌体呈现技术筛选反应性关节炎相关抗原多肽[C].第十届全国风湿病学学术会议论文集.2005
[7].祝怀平,王迎春,季顺东,江淼,白霞.抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究[J].中国免疫学杂志.2005
[8].李华,郑萍,郭波,吴玉章,邹强.噬菌体呈现的多聚多肽3A8诱导Jurkat细胞的凋亡效应[J].免疫学杂志.2005
[9].夏永娟,黄宝成,温伟红,黄威权.抗鳗弧菌独特型单克隆抗体dsFv的构建及其噬菌体表面呈现[J].中国生物化学与分子生物学报.2004
[10].万一,石继红,韩苇,赵宁,颜真.肿瘤坏死因子-α在噬菌体表面的呈现及鉴定[J].第四军医大学学报.2004
论文知识图
